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公开(公告)号:CN101575651B
公开(公告)日:2012-01-11
申请号:CN200910087100.1
申请日:2009-06-24
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种猪细小病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的猪细小病毒(PPV)序列,在其保守序列区域设计了PPV LAMP引物;采用本发明人设计并配制的病毒DNA提取试剂提取PPV病毒DNA,使用本发明建立的PPV LAMP反应体系进行检测,反应结束后加入显色剂判定结果,结果显示在63℃45min,PPV病毒DNA获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明:本方法可对2.3pg PPV病毒的DNA模板进行高效扩增,显示出本方法高度的敏感性,通过特异性实验和临床样品的PPV的检测,结果显示本发明的方法及试剂盒适合用于PPV的检测工作。
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公开(公告)号:CN101629217A
公开(公告)日:2010-01-20
申请号:CN200910087563.8
申请日:2009-06-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的SIV不同亚型的基因序列,针对PA序列相对保守区域设计了SIV RT-LAMP简并引物6条,以猪流感H1、H3、H5、H9亚型毒株为模板,建立了可以检测所有亚型猪流感毒的RT-LAMP方法。利用LA-320 LAMP Tubidimeter仪分析反应过程并判定结果,显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃反应45min,所有实验用的4种亚型SIV样品RNA均获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明:本方法可对100TCID 50 SIV样品RNA进行10 -4 稀释后仍可高效扩增,显示出本方法高度的敏感性;通过特异性实验和19份临床样品的SIV病原的RT-LAMP检测,有5份样品检测到病料中SIV核酸为阳性,与RT-PCR、鸡胚分离结果一致,经基因芯片分型鉴定验证,综合结果符合率为100%。显示本方法特异、敏感、快速,适合用于各种试验条件下SIV的检测。
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公开(公告)号:CN106749562B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201611077399.9
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑1及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为489054867的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将BLSJ‑1抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN106754822A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611077707.8
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12N9/24 , G01N33/573 , G01N33/569
CPC classification number: C12N9/2402 , G01N33/56911 , G01N33/573 , G01N2333/924
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑2及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为490823642的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将该抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN106749562A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611077399.9
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C07K14/23 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑1及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为489054867的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将BLSJ‑1抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN106353496A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610987091.1
申请日:2016-11-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及布鲁氏菌荧光偏振(FPA)检测试剂盒。本发明使用了异硫氰酸荧光素(FITC)标记光滑型布鲁氏菌O链脂多糖小分子片段(OPS),作为抗原。基于FPA的实验原理,该试剂盒能对多种动物进行布病检测,同时能检测血清中的IgG和IgM类抗体,因此该试剂盒在敏感性方面具有更明显的优势;本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,特别是对阳性血清的效价进行了精确标定,有效提高了试剂盒的敏感性和特异性,敏感性、重复性、保存期、操作方便性等问题,大大缩短了高通量检测所需的时间,本发明为我国布鲁氏菌病诊断提供了新型高效的检测方法。
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公开(公告)号:CN101629217B
公开(公告)日:2012-03-28
申请号:CN200910087563.8
申请日:2009-06-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种猪流感病毒RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的SIV不同亚型的基因序列,针对PA序列相对保守区域设计了SIV RT-LAMP简并引物6条,以猪流感H1、H3、H5、H9亚型毒株为模板,建立了可以检测所有亚型猪流感毒的RT-LAMP方法。利用LA-320 LAMP Tubidimeter仪分析反应过程并判定结果,显示在LA-320 LAMP Tubidimeter仪中63℃反应45min,所有实验用的4种亚型SIV样品RNA均获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明:本方法可对100TCID50 SIV样品RNA进行10-4稀释后仍可高效扩增,显示出本方法高度的敏感性;通过特异性实验和19份临床样品的SIV病原的RT-LAMP检测,有5份样品检测到病料中SIV核酸为阳性,与RT-PCR、鸡胚分离结果一致,经基因芯片分型鉴定验证,综合结果符合率为100%。显示本方法特异、敏感、快速,适合用于各种试验条件下SIV的检测。
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公开(公告)号:CN102304496A
公开(公告)日:2012-01-04
申请号:CN201010105953.6
申请日:2010-02-05
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株GDr株的致弱培育。本发明是将由我国分离到高致病性猪繁殖与呼吸综合征野毒株经过全面鉴定后,再将其在Marc145细胞中连续传代后使其毒力减弱获得弱毒疫苗株GDr株病毒(其保藏编号为CGMCC No.3599),回传至猪毒力不返强,遗传性能稳定;本毒株可在Marc145细胞上高效增殖;该毒株毒力低该毒株具有良好的免疫原性,最小免疫剂量可达104TCID50,接种猪后的免疫持续期可达4个月。
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公开(公告)号:CN101575651A
公开(公告)日:2009-11-11
申请号:CN200910087100.1
申请日:2009-06-24
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种猪细小病毒LAMP检测试剂盒及其检测方法。根据GenBank公布的猪细小病毒(PPV)序列,在其保守序列区域设计了PPV LAMP引物;采用本发明人设计并配制的病毒DNA提取试剂提取PPV病毒DNA,使用本发明建立的PPV LAMP反应体系进行检测,反应结束后加入显色剂判定结果,结果显示在63℃ 45min,PPV病毒DNA获得了高效的特异性扩增。通过敏感性试验证明:本方法可对2.3pg PPV病毒的DNA模板进行高效扩增,显示出本方法高度的敏感性,通过特异性实验和临床样品的PPV的检测,结果显示本发明的方法及试剂盒适合用于PPV的检测工作。
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公开(公告)号:CN106520833B
公开(公告)日:2018-08-28
申请号:CN201611001318.7
申请日:2016-11-14
Applicant: 陕西诺威利华生物科技有限公司 , 中国兽医药品监察所
IPC: C12N15/866
Abstract: 本发明的制备方法采用克隆PCV2 Cap基因杆状病毒表面展示载体连接,并加上哺乳动物启动子CAGG及报告基因eGFP获得重组转移载体;重组转移载体通过Tn7转座获得重组杆状病毒Bacmid载体;重组Bacmid用脂质体方法转染昆虫细胞,收集培养物上清,获得重组杆状病毒,重组杆状病毒感染昆虫细胞,收集细胞做Western blot分析和共聚焦显微镜分析;并把重组杆状病毒与猪血清作用,发现了与不展示Cap的病毒相比具有很强的逃逸补体清除的能力,从而提高疫苗免疫效力。
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