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公开(公告)号:CN109939225B
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN201910284652.5
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株重组鹦鹉热衣原体(Cps)外膜蛋白MOMP基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因的重组布鲁氏菌RA343‑MOMP株。该重组菌株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对鹦鹉热衣原体MOMP抗体,从而实现对鹦鹉热衣原体的免疫保护。用该重组苗株制备的疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和鹦鹉热衣原体的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN106754822A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611077707.8
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12N9/24 , G01N33/573 , G01N33/569
CPC classification number: C12N9/2402 , G01N33/56911 , G01N33/573 , G01N2333/924
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑2及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为490823642的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将该抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN106556701A
公开(公告)日:2017-04-05
申请号:CN201611023727.7
申请日:2016-11-14
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/577 , G01N33/535 , G01N33/56911
Abstract: 本发明涉及羊布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本发明将提纯的布鲁氏菌脂多糖(LPS)经定量后包被96孔酶标板,以人工免疫健康绵羊制备阳性血清,以健康非免疫绵羊血清作阴性血清,以HRP标记兔抗羊Fc端抗体、底物溶液、终止液、样品稀释液、HRP标记兔抗羊IgG稀释液及20×洗涤液等组分组装而成,用于检测羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体。本发明在常规提取LPS中,增加了蛋白酶K消化和苯酚抽提步骤,有效提高了LPS纯度;筛选了对山羊和绵羊均具有良好亲和力的单克隆抗体作为酶标二抗。本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,有效控制试剂盒的反应背景,缩短了高通量检测所需的时间。
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公开(公告)号:CN106353496A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610987091.1
申请日:2016-11-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及布鲁氏菌荧光偏振(FPA)检测试剂盒。本发明使用了异硫氰酸荧光素(FITC)标记光滑型布鲁氏菌O链脂多糖小分子片段(OPS),作为抗原。基于FPA的实验原理,该试剂盒能对多种动物进行布病检测,同时能检测血清中的IgG和IgM类抗体,因此该试剂盒在敏感性方面具有更明显的优势;本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,特别是对阳性血清的效价进行了精确标定,有效提高了试剂盒的敏感性和特异性,敏感性、重复性、保存期、操作方便性等问题,大大缩短了高通量检测所需的时间,本发明为我国布鲁氏菌病诊断提供了新型高效的检测方法。
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公开(公告)号:CN105067812A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510477116.9
申请日:2015-08-06
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569 , G01N21/31
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N21/31
Abstract: 本发明涉及牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本试剂盒使用了申请单位上世纪60年代诱导驯化的猪种布鲁氏菌S2株脂多糖(LPS)作为包被抗原,提高了检测的敏感性;本研究改进了LPS纯化和纯度测定的方法,使开发的试剂盒具有良好的特异性,该试剂盒不仅能有效排除常规革兰氏阴性细菌对布鲁氏菌的干扰,而且能排除一般布病间接ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷,提高了检测的特异性。本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,不仅有效控制试剂盒的反应背景,而且缩短了检测所需的时间。
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公开(公告)号:CN113289027B
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202110542674.4
申请日:2021-05-18
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种通用型单克隆抗体的耐热保护剂。本发明对含有不同成分的单抗耐热保护剂进行比较发现海藻糖在常温和低温下对单克隆抗体具有更为优良的保护性;在本发明保护剂配方中添加0.1%的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris‑HCl)增强了单抗在高温环境中的稳定能力、添加10%甘油和0.25%甘露糖增强了对于IgM和IgA亚型单抗的保护作用,本发明的通用耐热保护剂将单克隆抗体有效保存时间大大延长,实现了对不同抗体亚型单抗及其相关制品在储运过程中冷藏和常温保存,单抗保存期可延长至2~8℃保存18个月以上,25℃保存15个月,37℃条件下保存16天。
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公开(公告)号:CN110760472A
公开(公告)日:2020-02-07
申请号:CN201911035458.X
申请日:2019-10-29
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株犬种粗糙型布鲁氏菌疫苗株。本发明提供的犬种布鲁氏菌基因缺失重组菌,是将犬种布鲁氏菌菌株(Brucella canis)中的群体感应系统VjbR蛋白编码基因缺失得到的菌株。与出发菌株相比,本发明得到的菌株的毒力更弱,无需灭活就可以免疫动物,且不引起成年孕犬流产。使用本发明的菌株免疫小鼠和比格犬,在小鼠和比格犬体内能够产生较好的保护力。鉴于当前即无预防犬种布鲁氏菌的疫苗,也没有治疗犬感染犬种布鲁氏菌的有效药物,本发明对开发犬种布鲁氏菌基因缺失标记疫苗和配套的鉴别诊断试剂,及对保护人类和犬只健康具有十分重要的意义。
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公开(公告)号:CN106119164B
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201610517944.5
申请日:2016-07-04
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法。禽结核分枝杆菌培养通常采用的是配氏(Petragnani)固体培养基,该培养基主要成分新鲜脱脂牛奶及鸡蛋的质量受奶牛及鸡蛋来源、新鲜程度、保存时间等因素影响大,造成批次间质量稳定性差。另外本身制作繁琐,而且对于新鲜牛奶取材来源困难的实验室难以实施。而本发明所提供的合成培养基及其制备方法,克服了以上的缺陷,制备成的培养基比配氏培养基显著减少禽结核分枝杆菌培养时间,并且临床分离效果明显优于配氏培养基。具有操作简便、质量稳定的优点,适合临床分离培养禽结核分枝杆菌,为禽结核病诊断提供了有力的保障。
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公开(公告)号:CN109694918A
公开(公告)日:2019-04-30
申请号:CN201910188946.8
申请日:2019-03-13
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及兽医微生物学诊断技术领域,尤其是组织或牛奶中快速诊断牛结核病的PCR检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒包括盒体,所述盒体内的试剂包括:含有PCR引物对、2倍的PCR核心试剂预混物、阳性对照、阴性对照、DL2000分子量标准溶液。本发明提供了一种组织或牛奶中快速诊断牛结核病的PCR检测试剂盒及其检测方法,通过选用经比对特异性的序列zlqG片段作为扩增目的片段,具有直接确诊的效果。本试剂盒选择特异性的扩增zlqG片段引物,并优化了退火温度和反应条件,具有灵敏度高、特异性强的优点,适合临床牛样本检测。
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公开(公告)号:CN104031874A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410240832.0
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失牛种布鲁氏菌2308株WboA基因以及vjbR基因。上述2个基因的缺失,一方面使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件(WboA基因缺失导致),菌落形态由光滑型转变为粗糙型;另一方面由于vjbR基因的缺失,导致重组菌的毒力和在细胞内生存能力下降,降低布鲁氏菌对靶动物的感染能力,进一步提高了疫苗的安全性。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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