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公开(公告)号:CN106834525B
公开(公告)日:2020-06-16
申请号:CN201710212194.5
申请日:2017-03-27
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒包括多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物(Premix Taq反应液)、阳性对照(禽结核参考菌株DNA)、阴性对照(ddH2O)和DL1000分子量标准溶液(Marker)。试剂盒的检测方法包括如下步骤:(1)提供疑试临床待测样品的DNA;(2)按常规PCR方法扩增样品DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果,根据扩增条带结果进行判定。该法克服了传统诊断方法中的抗酸染色法敏感性差,生化试验方法程序多、时间长和普通单基因PCR法特异性差的缺点。具有方法特异、操作简便、灵敏度良好的优点,适合对临床疑似的家禽组织样本DNA直接鉴定。
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公开(公告)号:CN106834525A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201710212194.5
申请日:2017-03-27
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒包括多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物(Premix Taq反应液)、阳性对照(禽结核参考菌株DNA)、阴性对照(ddH2O)和DL1000分子量标准溶液(Marker)。试剂盒的检测方法包括如下步骤:(1)提供疑试临床待测样品的DNA;(2)按常规PCR方法扩增样品DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果,根据扩增条带结果进行判定。该法克服了传统诊断方法中的抗酸染色法敏感性差,生化试验方法程序多、时间长和普通单基因PCR法特异性差的缺点。具有方法特异、操作简便、灵敏度良好的优点,适合对临床疑似的家禽组织样本DNA直接鉴定。
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公开(公告)号:CN106119164A
公开(公告)日:2016-11-16
申请号:CN201610517944.5
申请日:2016-07-04
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法。禽结核分枝杆菌培养通常采用的是配氏(Petragnani)固体培养基,该培养基主要成分新鲜脱脂牛奶及鸡蛋的质量受奶牛及鸡蛋来源、新鲜程度、保存时间等因素影响大,造成批次间质量稳定性差。另外本身制作繁琐,而且对于新鲜牛奶取材来源困难的实验室难以实施。而本发明所提供的合成培养基及其制备方法,克服了以上的缺陷,制备成的培养基比配氏培养基显著减少禽结核分枝杆菌培养时间,并且临床分离效果明显优于配氏培养基。具有操作简便、质量稳定的优点,适合临床分离培养禽结核分枝杆菌,为禽结核病诊断提供了有力的保障。
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公开(公告)号:CN104845916B
公开(公告)日:2017-12-12
申请号:CN201510282638.3
申请日:2015-05-28
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与M因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株RM57。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN106754822A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611077707.8
申请日:2016-11-30
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: C12N9/24 , G01N33/573 , G01N33/569
CPC classification number: C12N9/2402 , G01N33/56911 , G01N33/573 , G01N2333/924
Abstract: 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑2及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为490823642的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。将该产物作为包被抗原,可作为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测的诊断抗原。将该抗原分别与疫苗免疫抗体及自然感染抗体进行免疫印迹(Western‑blot),差异明显。将该抗原作为间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)包被抗原,检测数百份布病临床血清样本,鉴别诊断效果显著。
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公开(公告)号:CN104845916A
公开(公告)日:2015-08-19
申请号:CN201510282638.3
申请日:2015-05-28
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与M因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株RM57。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN106119164B
公开(公告)日:2019-10-18
申请号:CN201610517944.5
申请日:2016-07-04
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法。禽结核分枝杆菌培养通常采用的是配氏(Petragnani)固体培养基,该培养基主要成分新鲜脱脂牛奶及鸡蛋的质量受奶牛及鸡蛋来源、新鲜程度、保存时间等因素影响大,造成批次间质量稳定性差。另外本身制作繁琐,而且对于新鲜牛奶取材来源困难的实验室难以实施。而本发明所提供的合成培养基及其制备方法,克服了以上的缺陷,制备成的培养基比配氏培养基显著减少禽结核分枝杆菌培养时间,并且临床分离效果明显优于配氏培养基。具有操作简便、质量稳定的优点,适合临床分离培养禽结核分枝杆菌,为禽结核病诊断提供了有力的保障。
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公开(公告)号:CN105158463A
公开(公告)日:2015-12-16
申请号:CN201510477800.7
申请日:2015-08-06
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N2333/23
Abstract: 本发明涉及一种羊布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条。本发明利用布鲁氏菌疫苗株S2提取的脂多糖(LPS)作为胶体试纸条的包被抗原,以此菌制备的LPS提高了检测的敏感性。本发明利用鼠抗羊IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫,改变传统的利用SPA对抗体蛋白的非特异性吸附,将其作为胶体金标记蛋白,进一步提高了检测的特异性。本发明制备了一套用于对试纸条进行质控的血清,确保了试纸条的特异性和敏感性。本发明能在采样现场进行使用,使用方便快捷,非常适合基层养殖场和基层兽医使用。
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公开(公告)号:CN106526205A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201610987613.8
申请日:2016-11-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/96 , G01N33/569
CPC classification number: G01N33/96 , G01N33/56911 , G01N2469/20
Abstract: 本发明涉及一种羊布鲁氏菌参考血清库。本发明的意义在于:(1)在国际上率先建成了具有一定规模的羊布鲁氏菌参考血清库;(2)为布鲁氏菌病诊断方法的科学评价提供了残酷物质;供了物质基础。(3)为开发针对牛的各类布鲁氏菌病诊断方法提
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公开(公告)号:CN105137073A
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201510477774.8
申请日:2015-08-06
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N2333/23
Abstract: 本发明涉及一种快速、高效、准确的牛布鲁氏菌胶体金诊断方法。该胶体金使用布鲁氏菌S2株脂多糖(LPS)作为测试线包被抗原,提高了检测的敏感性;改进了LPS纯化和纯度测定方法,使开发的试剂盒具有良好的特异性;本发明利用鼠抗牛IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫,进一步提高了检测的特异性。本发明试纸条可用于检测牛血清中的布鲁氏菌抗体,具有特异性强,灵敏度高、方便快捷等特点。本发明对布鲁氏菌检测不需要复杂的检测仪器,特别适合牛场养殖人员和基层兽医使用。
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