一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN106834525B

    公开(公告)日:2020-06-16

    申请号:CN201710212194.5

    申请日:2017-03-27

    Abstract: 本发明涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒包括多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物(Premix Taq反应液)、阳性对照(禽结核参考菌株DNA)、阴性对照(ddH2O)和DL1000分子量标准溶液(Marker)。试剂盒的检测方法包括如下步骤:(1)提供疑试临床待测样品的DNA;(2)按常规PCR方法扩增样品DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果,根据扩增条带结果进行判定。该法克服了传统诊断方法中的抗酸染色法敏感性差,生化试验方法程序多、时间长和普通单基因PCR法特异性差的缺点。具有方法特异、操作简便、灵敏度良好的优点,适合对临床疑似的家禽组织样本DNA直接鉴定。

    一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN106834525A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710212194.5

    申请日:2017-03-27

    Abstract: 本发明涉及一种诊断家禽结核病的多重PCR检测试剂盒及其检测方法。所述的试剂盒包括多重PCR引物组、2×PCR核心试剂预混物(Premix Taq反应液)、阳性对照(禽结核参考菌株DNA)、阴性对照(ddH2O)和DL1000分子量标准溶液(Marker)。试剂盒的检测方法包括如下步骤:(1)提供疑试临床待测样品的DNA;(2)按常规PCR方法扩增样品DNA,通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果,根据扩增条带结果进行判定。该法克服了传统诊断方法中的抗酸染色法敏感性差,生化试验方法程序多、时间长和普通单基因PCR法特异性差的缺点。具有方法特异、操作简便、灵敏度良好的优点,适合对临床疑似的家禽组织样本DNA直接鉴定。

    一种用合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法

    公开(公告)号:CN106119164A

    公开(公告)日:2016-11-16

    申请号:CN201610517944.5

    申请日:2016-07-04

    Abstract: 本发明涉及一种合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法。禽结核分枝杆菌培养通常采用的是配氏(Petragnani)固体培养基,该培养基主要成分新鲜脱脂牛奶及鸡蛋的质量受奶牛及鸡蛋来源、新鲜程度、保存时间等因素影响大,造成批次间质量稳定性差。另外本身制作繁琐,而且对于新鲜牛奶取材来源困难的实验室难以实施。而本发明所提供的合成培养基及其制备方法,克服了以上的缺陷,制备成的培养基比配氏培养基显著减少禽结核分枝杆菌培养时间,并且临床分离效果明显优于配氏培养基。具有操作简便、质量稳定的优点,适合临床分离培养禽结核分枝杆菌,为禽结核病诊断提供了有力的保障。

    一种用合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法

    公开(公告)号:CN106119164B

    公开(公告)日:2019-10-18

    申请号:CN201610517944.5

    申请日:2016-07-04

    Abstract: 本发明涉及一种合成培养基分离培养禽结核分枝杆菌的方法。禽结核分枝杆菌培养通常采用的是配氏(Petragnani)固体培养基,该培养基主要成分新鲜脱脂牛奶及鸡蛋的质量受奶牛及鸡蛋来源、新鲜程度、保存时间等因素影响大,造成批次间质量稳定性差。另外本身制作繁琐,而且对于新鲜牛奶取材来源困难的实验室难以实施。而本发明所提供的合成培养基及其制备方法,克服了以上的缺陷,制备成的培养基比配氏培养基显著减少禽结核分枝杆菌培养时间,并且临床分离效果明显优于配氏培养基。具有操作简便、质量稳定的优点,适合临床分离培养禽结核分枝杆菌,为禽结核病诊断提供了有力的保障。

    羊布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条

    公开(公告)号:CN105158463A

    公开(公告)日:2015-12-16

    申请号:CN201510477800.7

    申请日:2015-08-06

    CPC classification number: G01N33/56911 G01N2333/23

    Abstract: 本发明涉及一种羊布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条。本发明利用布鲁氏菌疫苗株S2提取的脂多糖(LPS)作为胶体试纸条的包被抗原,以此菌制备的LPS提高了检测的敏感性。本发明利用鼠抗羊IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫,改变传统的利用SPA对抗体蛋白的非特异性吸附,将其作为胶体金标记蛋白,进一步提高了检测的特异性。本发明制备了一套用于对试纸条进行质控的血清,确保了试纸条的特异性和敏感性。本发明能在采样现场进行使用,使用方便快捷,非常适合基层养殖场和基层兽医使用。

    牛布鲁氏菌胶体金抗体检测试纸条

    公开(公告)号:CN105137073A

    公开(公告)日:2015-12-09

    申请号:CN201510477774.8

    申请日:2015-08-06

    CPC classification number: G01N33/56911 G01N2333/23

    Abstract: 本发明涉及一种快速、高效、准确的牛布鲁氏菌胶体金诊断方法。该胶体金使用布鲁氏菌S2株脂多糖(LPS)作为测试线包被抗原,提高了检测的敏感性;改进了LPS纯化和纯度测定方法,使开发的试剂盒具有良好的特异性;本发明利用鼠抗牛IgG Fc端的单克隆抗体标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫,进一步提高了检测的特异性。本发明试纸条可用于检测牛血清中的布鲁氏菌抗体,具有特异性强,灵敏度高、方便快捷等特点。本发明对布鲁氏菌检测不需要复杂的检测仪器,特别适合牛场养殖人员和基层兽医使用。

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