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公开(公告)号:CN109939225B
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN201910284652.5
申请日:2019-04-10
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株重组鹦鹉热衣原体(Cps)外膜蛋白MOMP基因的粗糙型布鲁氏菌的构建及其疫苗。本发明以粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株RA343株为亲本株,以蔗糖自杀质粒为载体,将含有特定启动子序列的鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因经密码子优化后无痕插入到了布鲁氏菌基因组中,成功构建了能够高效表达型鹦鹉热衣原体外膜蛋白MOMP基因的重组布鲁氏菌RA343‑MOMP株。该重组菌株不仅保留了原始亲本株RA343的粗糙型特性,对布鲁氏菌病(布病)良好的免疫保护性,而且该重组菌免疫动物后,能产生针对鹦鹉热衣原体MOMP抗体,从而实现对鹦鹉热衣原体的免疫保护。用该重组苗株制备的疫苗,免疫动物后能同时实现对布病和鹦鹉热衣原体的双重免疫保护。
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公开(公告)号:CN104845916B
公开(公告)日:2017-12-12
申请号:CN201510282638.3
申请日:2015-05-28
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与M因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株RM57。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN106556701A
公开(公告)日:2017-04-05
申请号:CN201611023727.7
申请日:2016-11-14
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/577 , G01N33/535 , G01N33/56911
Abstract: 本发明涉及羊布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本发明将提纯的布鲁氏菌脂多糖(LPS)经定量后包被96孔酶标板,以人工免疫健康绵羊制备阳性血清,以健康非免疫绵羊血清作阴性血清,以HRP标记兔抗羊Fc端抗体、底物溶液、终止液、样品稀释液、HRP标记兔抗羊IgG稀释液及20×洗涤液等组分组装而成,用于检测羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体。本发明在常规提取LPS中,增加了蛋白酶K消化和苯酚抽提步骤,有效提高了LPS纯度;筛选了对山羊和绵羊均具有良好亲和力的单克隆抗体作为酶标二抗。本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,有效控制试剂盒的反应背景,缩短了高通量检测所需的时间。
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公开(公告)号:CN105067812A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510477116.9
申请日:2015-08-06
Applicant: 中国兽医药品监察所
IPC: G01N33/569 , G01N21/31
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N21/31
Abstract: 本发明涉及牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本试剂盒使用了申请单位上世纪60年代诱导驯化的猪种布鲁氏菌S2株脂多糖(LPS)作为包被抗原,提高了检测的敏感性;本研究改进了LPS纯化和纯度测定的方法,使开发的试剂盒具有良好的特异性,该试剂盒不仅能有效排除常规革兰氏阴性细菌对布鲁氏菌的干扰,而且能排除一般布病间接ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷,提高了检测的特异性。本发明通过对主要试剂配方的改进和优化,不仅有效控制试剂盒的反应背景,而且缩短了检测所需的时间。
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公开(公告)号:CN104845916A
公开(公告)日:2015-08-19
申请号:CN201510282638.3
申请日:2015-05-28
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株及其疫苗。该疫苗株通过抗菌素与M因子血清相结合的驯化和筛选技术,筛选出一株粗糙型羊种布鲁氏菌弱毒株RM57。该粗糙型弱毒株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌良好的免疫效果。利用该弱毒株制备成布鲁氏菌病疫苗,将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN104004697A
公开(公告)日:2014-08-27
申请号:CN201410241278.8
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失布鲁氏菌2308株菌WboA基因1-897bp之间的碱基序列,使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件,从而由光滑型转变为粗糙型。粗糙型重组菌株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果,该重组牛种布鲁氏菌被命名为布鲁氏菌r2308-ΔWboA株(CGMCC No.8885)。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN105924506A
公开(公告)日:2016-09-07
申请号:CN201610517156.6
申请日:2016-07-04
Applicant: 中国兽医药品监察所
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , C12N7/00 , C12N15/86 , C12N2710/14021 , C12N2710/14043 , C12N2770/24322 , C12N2770/24334 , C12N2800/105 , C12N2800/22
Abstract: 本发明涉及牛病毒性腹泻病毒E2蛋白亚单位疫苗制备方法。其优点如下:(1)建立了高效获取BVDV E2蛋白的表达方法;(2)用BVDV的E2蛋白表达上清免疫兔子,证明有良好的免疫反应,可用于制备BVDV亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN104004697B
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201410241278.8
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失布鲁氏菌2308株菌WboA基因1-897bp之间的碱基序列,使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件,从而由光滑型转变为粗糙型。粗糙型重组菌株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果,该重组牛种布鲁氏菌被命名为布鲁氏菌r2308-ΔWboA株(CGMCC No.8885)。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN104031874A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410240832.0
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失牛种布鲁氏菌2308株WboA基因以及vjbR基因。上述2个基因的缺失,一方面使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件(WboA基因缺失导致),菌落形态由光滑型转变为粗糙型;另一方面由于vjbR基因的缺失,导致重组菌的毒力和在细胞内生存能力下降,降低布鲁氏菌对靶动物的感染能力,进一步提高了疫苗的安全性。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN103278635A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310213811.5
申请日:2013-05-31
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种快速、高效、准确的动物布鲁氏菌病诊断方法。一方面,该方法中使用了一种能与布鲁氏菌特异性结合的3E4株单克隆抗体,在布鲁氏菌病抗体检测中,该单克隆抗体3E4株能与布鲁氏菌产生的抗体产生特异性竞争,而与其它病原细菌无竞争性,特别是与布鲁氏菌有强烈交叉反应的小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157抗血清无竞争性,有效解决了目前商品化布病竞争ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷,提高了检测的特异性。另一方面,本试剂盒使用了对猪、牛、羊均具有良好反应原性的猪种布鲁氏菌(S2株)脂多糖(LPS)作为包被抗原,不仅提高了LPS的产量,降低了生产成本,而且提高了检测的敏感性。
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