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公开(公告)号:CN104004697B
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201410241278.8
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失布鲁氏菌2308株菌WboA基因1-897bp之间的碱基序列,使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件,从而由光滑型转变为粗糙型。粗糙型重组菌株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果,该重组牛种布鲁氏菌被命名为布鲁氏菌r2308-ΔWboA株(CGMCC No.8885)。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN104031874A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410240832.0
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种双基因缺失粗糙型牛种布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失牛种布鲁氏菌2308株WboA基因以及vjbR基因。上述2个基因的缺失,一方面使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件(WboA基因缺失导致),菌落形态由光滑型转变为粗糙型;另一方面由于vjbR基因的缺失,导致重组菌的毒力和在细胞内生存能力下降,降低布鲁氏菌对靶动物的感染能力,进一步提高了疫苗的安全性。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN102373277A
公开(公告)日:2012-03-14
申请号:CN201110330683.3
申请日:2011-10-27
Applicant: 中华人民共和国北京出入境检验检疫局 , 中国兽医药品监察所 , 北京农学院
Abstract: 本发明公开了一种检测猪痢疾的PCR试剂盒及引物。一组检测猪痢疾的引物,为序列表SEQIDNo:1和序列表SEQIDNo:2所示的寡核苷酸序列。本发明的优点是:将PCR技术应用于猪痢疾的检测中与病原分离培养相比,1、PCR更快、更便捷,细菌分离培养方法至少需要10天且培养条件苛刻,需要严格的厌氧培养,而PCR仅需5小时左右就能完成;2、与病原分离相比PCR需要的设备相对简单,从技术层面上讲更便于掌握和操作,更便于在条件不足的地区推广应用,更有利于对猪痢疾的诊断和监控。
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公开(公告)号:CN104004697A
公开(公告)日:2014-08-27
申请号:CN201410241278.8
申请日:2014-06-03
Applicant: 中国兽医药品监察所
Abstract: 本发明涉及一种单基因缺失粗糙型布鲁氏菌及其疫苗的生产方法。该重组菌株通过非抗性基因筛选技术,缺失布鲁氏菌2308株菌WboA基因1-897bp之间的碱基序列,使其失去了光滑型布鲁氏菌细胞壁LPS结构中O链形成的条件,从而由光滑型转变为粗糙型。粗糙型重组菌株的安全性显著提高,但仍保留了对布鲁氏菌病良好的免疫效果,该重组牛种布鲁氏菌被命名为布鲁氏菌r2308-ΔWboA株(CGMCC No.8885)。以此菌株生产疫苗将改变布鲁氏菌疫苗免疫动物与野毒株感染动物难以区分的现状,并有效提高现有疫苗的安全性。
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公开(公告)号:CN102373276B
公开(公告)日:2013-02-20
申请号:CN201110330473.4
申请日:2011-10-27
Applicant: 中华人民共和国北京出入境检验检疫局 , 中国兽医药品监察所 , 北京农学院
Abstract: 本发明公开了一种检测猪痢疾的实时荧光PCR试剂盒及核苷酸序列。所述一组检测猪痢疾的寡核苷酸序列,为序列表SEQIDNo:1至序列表SEQIDNo:3所示的寡核苷酸序列。本发明还提供了一种含有上述寡核苷酸序列的检测试剂盒。本发明的优点是:实时荧光PCR技术被应用到猪痢疾的检测中,进一步提高了检测的特异性、灵敏度,减少了工作量,提高了工作效率,而且还可以对目的片段进行定量检测。通过反应条件的优化,该实时荧光PCR最低可检测至102拷贝/反应的病原量。该方法还对来自七个猪场的318份临床样品进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的检测方法。这项技术在进出境样品检疫和临床疫病的监控和诊断中都具有极大的应用前景。
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公开(公告)号:CN102373277B
公开(公告)日:2013-01-02
申请号:CN201110330683.3
申请日:2011-10-27
Applicant: 中华人民共和国北京出入境检验检疫局 , 中国兽医药品监察所 , 北京农学院
Abstract: 本发明公开了一种检测猪痢疾的PCR试剂盒及引物。一组检测猪痢疾的引物,为序列表SEQIDNo:1和序列表SEQIDNo:2所示的寡核苷酸序列。本发明的优点是:将PCR技术应用于猪痢疾的检测中与病原分离培养相比,1、PCR更快、更便捷,细菌分离培养方法至少需要10天且培养条件苛刻,需要严格的厌氧培养,而PCR仅需5小时左右就能完成;2、与病原分离相比PCR需要的设备相对简单,从技术层面上讲更便于掌握和操作,更便于在条件不足的地区推广应用,更有利于对猪痢疾的诊断和监控。
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公开(公告)号:CN102373276A
公开(公告)日:2012-03-14
申请号:CN201110330473.4
申请日:2011-10-27
Applicant: 中华人民共和国北京出入境检验检疫局 , 中国兽医药品监察所 , 北京农学院
Abstract: 本发明公开了一种检测猪痢疾的实时荧光PCR试剂盒及核苷酸序列。所述一组检测猪痢疾的寡核苷酸序列,为序列表SEQIDNo:1至序列表SEQIDNo:3所示的寡核苷酸序列。本发明还提供了一种含有上述寡核苷酸序列的检测试剂盒。本发明的优点是:实时荧光PCR技术被应用到猪痢疾的检测中,进一步提高了检测的特异性、灵敏度,减少了工作量,提高了工作效率,而且还可以对目的片段进行定量检测。通过反应条件的优化,该实时荧光PCR最低可检测至102拷贝/反应的病原量。该方法还对来自七个猪场的318份临床样品进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的检测方法。这项技术在进出境样品检疫和临床疫病的监控和诊断中都具有极大的应用前景。
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