-
公开(公告)号：CN111500561A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010380799.7
申请日：2020-05-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种提高胞内普鲁兰酶提取效率的方法，属于微生物和酶工程技术领域。本发明采用两种特殊试剂对巴斯德毕赤酵母突变株处理，首先将重组巴斯德毕赤酵母突变体GS115/pPICK-BdP5 WB138与10×试剂D反应，随后在冰水中放置，再加入10×试剂E反应。离心收集细胞后用柠檬酸缓冲液悬浮细胞进行超声波破碎。经过两种试剂处理的细胞经超声波处理6 min就将细胞全部破碎，破碎液中酶活保留在85%以上。使用本发明所提供的方法及专用处理液可以大幅度减少细胞破碎所需要消耗的电力等成本，减少设备占用时间。
-
公开(公告)号：CN110669749A
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201911147726.7
申请日：2019-11-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种提高普鲁兰酶终浓度的发酵液处理方法，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明将处理溶液C与普鲁兰酶发酵上清液混合后保温，超滤浓缩，即得高酶活的普鲁兰酶发酵液。采用本发明方法，在以重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980-BdP发酵制备普鲁兰酶的后提取阶段，可以改善普鲁兰酶发酵液的超滤性能。经本发明处理的发酵液上清液经超滤浓缩后得到的浓缩液的酶活是未经溶液C处理的发酵液经同样超滤浓缩后得到的浓缩液的酶活的1.75倍以上。
-
公开(公告)号：CN109234297A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811172964.9
申请日：2018-10-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，属于基因工程与发酵工程领域。本发明通过敲除D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacA和dacB基因(单敲除和双敲除)，获得重组蛋白胞外分泌水平显著提高的重组大肠杆菌突变株。采用绿色荧光蛋白(GFP)和淀粉酶为模式重组蛋白，证明了本发明方法可显著提高胞外蛋白的含量。单敲除和复合敲除dacA和dacB后，GFP胞外荧光值分别提高2.1、2.1和2.7倍；单敲除和复合敲除dacA和dacB后，淀粉酶胞外酶活力占总酶活力的比例分别由对照菌的40.7％提高至44.7％、62.1％和64.2％。本发明方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
-
公开(公告)号：CN108410845A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810311758.5
申请日：2018-04-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的D,D-羧肽酶DacA突变体及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明公开了由大肠杆菌(Escherichia coli)BL21来源的D,D-羧肽酶DacA为母本，基于酶结构解析确定关键位点及突变方式，经分子生物学技术进行定点突变而获得催化效率提高的DacA突变体。在此改造条件下，E.coli D,D-羧肽酶DacA的突变体K113G催化效率常数kcat值提高最多，由6543.4s-1提高至9428.1s-1。利用此策略可以显著提高D,D-羧肽酶DacA的催化效率，为其在代谢改造E.coli提高其胞外分泌水平等方面的应用提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
-
公开(公告)号：CN108018325A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201710728461.4
申请日：2017-08-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种提高谷胱甘肽产量的方法，包括以下步骤：将巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)JQ在种子培养基中培养至OD600达到1.0‑40.0，得到活化后的种子液，其中种子培养基的pH为3.0‑7.0；将活化后的种子液按1‑15％接种量接种至发酵培养基中进行发酵培养，其中发酵培养基的初始pH值为4.0‑7.0，发酵培养温度为25‑35℃；当发酵培养至OD600达到40‑80时，开始补加葡萄糖；继续发酵培养，当OD600达到100‑300时，补加氨基酸和/或氨基酸盐，其中氨基酸在发酵培养基中的终浓度为1‑50mmol/L。本发明还提供了上述方法在制备含谷胱甘肽的产品中的应用。采用本发明的方法可使谷胱甘肽产量达3369mg/L，与对照菌株相比，谷胱甘肽产量提高了15倍，说明利用此方法可以大大提高谷胱甘肽产量，为其工业化生产提供基础。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105779485A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610219101.7
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/2411 , C12N9/485 , C12N2800/101 , C12P21/005 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacB提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至55.80％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
-
公开(公告)号：CN105483070A
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201510993097.5
申请日：2015-12-24
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/1051 , C12Y204/01099
Abstract: 本发明公开了一株表达果糖基转移酶的重组酿酒酵母菌株及构建方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将黑曲霉(Aspergillus niger)来源的果糖基转移酶基因(fru)克隆连接到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达载体pYX212，并转化S.cerevisiae W303宿主。经筛选鉴定得到一株高产果糖基转移酶的重组菌株，命名为：S.cerevisiae W303-pYX212-N1。在250mL摇瓶中，重组S.cerevisiae菌株表达的果糖基转移酶酶活力可达(39.79U/mL)。这为果糖基转移酶的高效表达与其在工业中应用具有重要意义与巨大的应用价值。
-
公开(公告)号：CN104878035A
公开(公告)日：2015-09-02
申请号：CN201510189018.5
申请日：2015-04-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产N-乙酰神经氨酸重组微生物的构建方法及应用。通过密码子优化、基因克隆等分子生物学技术分别构建了表达N-乙酰葡萄糖胺-2-异构酶基因和N-乙酰神经氨酸醛缩酶基因的两株重组大肠杆菌。两株重组微生物经诱导培养、按一定比例混合后，能够高效的生产N-乙酰神经氨酸。以N-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸钠为底物，以两株重组微生物作为全细胞为催化剂，经催化反应后N-乙酰神经氨酸产量可达260mM(80.5g/L)，最高底物转化率达43.3％。
-
公开(公告)号：CN103088003A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310034215.0
申请日：2013-01-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种耐氧化性淀粉酶突变体及其制备方法，属于遗传工程领域。本发明以嗜碱芽孢杆菌（Bacillus alcalophilus）JN21(CCTCC NO:M2011231)淀粉酶为母本，采用分子生物学技术对嗜碱芽孢杆菌淀粉酶序列进行定点突变。在此改造条件下，嗜碱芽孢杆菌淀粉酶在500mM H2O2环境下40°C处理5h,酶活性残留由对照（突变前）例的10%变为72%。利用此策略可以大大提高淀粉酶的耐氧化性，为其在纺织退浆、洗涤剂添加剂等工业生产领域提供了基础。此策略对淀粉酶及其它酶的耐氧化性质改造具有重要的指导意义。
-
公开(公告)号：CN102409010B
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201110311260.7
申请日：2011-10-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产碱性淀粉酶的γ-变形菌(gamma Proteobacterium)JN25，保藏编号CCTCC NO：M 2011230。该菌株生产的碱性淀粉酶具有较高的耐碱性，适用的pH值范围较宽，可以在碱性条件下，高效降解淀粉。该菌株生产的碱性淀粉酶主要用于纺织退浆、洗涤剂添加剂、食品、医药等领域。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
154
records
(took 0.027 seconds)
