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公开(公告)号:CN104862299A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510200528.8
申请日:2015-04-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)外源蛋白表达量的方法。采用ARTP直接诱变含重组质粒的B.subtilis,经淀粉-台盼蓝平板预筛、96孔板高通量筛选及摇瓶发酵验证,获得一酶活力高的突变株,其酶活力提高了31.4%。本发明所用的ARTP技术是一种应用范围很广的生物诱变技术;在诱变时采用含有重组质粒的B.subtilis菌株直接诱变,省去了诱变后重组质粒的转化步骤,具有高效性;同时,结合96孔板进行高通量筛选,大大提高了筛选正突变株的效率。因此,通过该方法快速筛选外源蛋白高产B.subtilis菌株具有重要经济价值。
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公开(公告)号:CN104531536A
公开(公告)日:2015-04-22
申请号:CN201410564556.3
申请日:2014-10-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高产曲酸的米曲霉菌株(Aspergillus oryzae QS),保藏编号CCTCC M 2014436。该菌株自土壤中筛选得到,30℃摇瓶发酵培养2d后开始产曲酸,发酵7d后,曲酸产量可达25g/L,是一株高产曲酸的优良野生菌株。曲酸具有较广泛的应用前景,主要用于食品防腐保鲜、化妆品、医药、农业和化工等行业。
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公开(公告)号:CN102618478B
公开(公告)日:2013-06-12
申请号:CN201210102731.8
申请日:2012-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产D-乳酸动态调控重组菌及用其制备D-乳酸的方法,属于微生物基因工程技术领域。本重组菌命名为大肠杆菌(Escherichiacoli)B0013-070B,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCCNO:M2012071。该菌株其基因组中乳酸脱氢酶基因启动子ldhAp被替换为培养环境/营养因素控制型启动子。利用该重组菌,在25~50℃条件下分阶段发酵28~40h,产D-乳酸水平达12.5%;光学纯度达99.9%,化学纯度达98.4%。本发明对D-乳酸高产菌B0013-070染色体上的D-乳酸脱氢酶编码基因的表达进行动态调控,使得D-乳酸的生产过程仅需改变发酵温度即可控制,达到以葡萄糖为原料高效合成D-乳酸的目的。本发明经简单修改后,可用于其它工业上重要的微生物代谢产物的生产。
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公开(公告)号:CN102277308B
公开(公告)日:2013-01-23
申请号:CN201110215771.9
申请日:2011-07-29
Applicant: 江南大学
CPC classification number: Y02P20/588
Abstract: 本发明涉及一种用于麦芽糖生产的固定化催化剂及其制备方法,属于酶工程和农副产品深加工技术领域。本发明以红薯为原料,用反转录技术提取其β-淀粉酶基因,再与来源于酿酒酵母的α凝集素编码基因在读框内进行融合,融合基因转化酿酒酵母W303-1A,获得了β-淀粉酶在酵母表面锚定的酿酒酵母,进一步大规模培养此重组酵母细胞,收获细胞,用化学、物理方法稳定和交联此重组酵母,获得固定化β-淀粉酶,该酶活为50~250DPo/g。运用该固定化β-淀粉酶可从液化淀粉直接生产出55%~65%的高麦芽糖浆;此固定化β-淀粉酶反复使用10次,酶活丢失率小于20%。
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公开(公告)号:CN102676438A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210189014.3
申请日:2012-06-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法,属于微生物基因工程技术领域。本重组菌命名为大肠杆菌(Escherichiacoli)B0013-090A,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCCNO:M2012173,该菌株由大肠杆菌(Escherichiacoli)B0013-070B(保藏编号CCTCCNO:M2012071)经基因工程改造获得。用其动态调控发酵生产α-酮戊二酸,发酵36~48h产α-酮戊二酸水平达到9%,且所产α-酮戊二酸化学纯度达到95%以上。该工艺以葡萄糖或淀粉、糖蜜或生物柴油副产甘油为原料,工业化生产α-酮戊二酸,其使用价值非常巨大。本发明发酵培养基简单清洁,既有利于降低生产成本,也有利于简化后提取步骤获得高品质产品。操作工艺简单易行,有利于在工业化规模生产中推广使用。
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公开(公告)号:CN102618478A
公开(公告)日:2012-08-01
申请号:CN201210102731.8
申请日:2012-04-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产D-乳酸动态调控重组菌及用其制备D-乳酸的方法,属于微生物基因工程技术领域。本重组菌命名为大肠杆菌(Escherichiacoli)B0013-070B,已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCCNO:M2012071。该菌株其基因组中乳酸脱氢酶基因启动子ldhAp被替换为培养环境/营养因素控制型启动子。利用该重组菌,在25~50℃条件下分阶段发酵28~40h,产D-乳酸水平达12.5%;光学纯度达99.9%,化学纯度达98.4%。本发明对D-乳酸高产菌B0013-070染色体上的D-乳酸脱氢酶编码基因的表达进行动态调控,使得D-乳酸的生产过程仅需改变发酵温度即可控制,达到以葡萄糖为原料高效合成D-乳酸的目的。本发明经简单修改后,可用于其它工业上重要的微生物代谢产物的生产。
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公开(公告)号:CN101974543A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010256287.6
申请日:2010-08-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种来源于芽孢杆菌的胞外普鲁兰酶编码基因及其应用,属于微生物、酶工程技术领域。本发明筛选到一株具有普鲁兰分解能力的芽孢杆菌Bacillus sp.042,利用反向PCR技术克隆了普鲁兰酶编码基因pulA042编码区完整序列,序列分析显示该基因编码区全长2571碱基,编码一856个氨基酸残基的多肽链,多肽链N端32个氨基酸残基组成一典型的信号肽,因此基因pulA042编码一种胞外普鲁兰酶。Bacillus sp.042普鲁兰酶基因pulA042的表达产物具有分解普鲁兰和红色普鲁兰的活性,能降解淀粉中α-1,6糖苷键,不降解α-1,4糖苷键,是一种I型普鲁兰酶。利用基因pulA042生产的重组酶在淀粉加工中用于分解淀粉或糊精分子中α-1,6糖苷键。
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公开(公告)号:CN118421546A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410589980.7
申请日:2024-05-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了纤维二糖差向异构酶在枯草芽孢杆菌中高效表达及其胞外生产的动态调控方法,属于生物技术及酶工程领域。本发明构建了重组质粒pMA5‑PHpaII‑P43‑CS‑CE,并将重组质粒转化枯草芽孢杆菌中构建重组枯草芽孢杆菌,提高了纤维二糖差向异构酶的产量。本发明还在重组质粒pMA5‑PHpaII‑CS‑CE基础上连接温敏型启动子和细胞壁水解基因,实现动态调控发酵生产纤维二糖差向异构酶。发酵至第32h时,纤维二糖差向异构酶的胞外酶占比达62.5%,显著高于对照菌株。
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公开(公告)号:CN117821491A
公开(公告)日:2024-04-05
申请号:CN202311766840.4
申请日:2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产β‑紫罗兰酮的热带假丝酵母工程菌的构建方法与应用,属于基因工程和发酵工程领域。本发明结合了细胞质工程和亚细胞器工程,利用区室化策略提高细胞内酶的局部浓度,通过区室组合策略提高类胡萝卜素裂解双加氧酶的底物可及度、增强代谢通量,从而增加β‑紫罗兰酮产量。本发明所构建的工程菌两相发酵96h,β‑紫罗兰酮产量可达152.4±1.4mg/L(4.6±0.09mg/g DCW)。本发明所构建的热带假丝酵母β‑紫罗兰酮工程菌可以利用简单碳源葡萄糖进行发酵生产β‑紫罗兰酮,发酵过程中无需添加抗生素,具有很大的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN116769609A
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202310457493.0
申请日:2023-04-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高耐硒树舌突变体菌株及其应用,属于真菌育种技术领域。其公开了一株高耐硒富硒树舌突变体菌株YL108,已保藏于中国典型培养物保藏中心CCTCC,地址中国武汉武汉大学,分类命名为树舌灵芝YL108Ganoderma applanatum YL108,保藏编号CCTCC NO:M 20221347,保藏日期为2022年8月29日。该菌株可以在硒含量90mg/L的培养液中维持正常生长,所获得的菌丝体没有红硒现象,菌丝体蛋白中氨基酸形态硒含量达511mg/kg,占总蛋白硒的55%左右。上述高耐硒树舌突变体菌株Ganoderma applanatum YL108更适合在高硒含量培养基中培养,并获得高含氨基酸形态硒的优质含硒蛋白,是制备真菌富硒产品的优质种质资源。
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