一种提升枸杞多糖在奶牛肝细胞抗氧化能力的方法

    公开(公告)号:CN113832096A

    公开(公告)日:2021-12-24

    申请号:CN202111323158.9

    申请日:2021-11-02

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种提升枸杞多糖在奶牛肝细胞抗氧化能力的方法,其包括如下步骤:细胞培养、细胞处理。本发明提供的了一种在奶牛肝细胞抗氧化中使用枸杞多糖进行促进的作用,相比较于目前对于枸杞多糖的研究,本发明从细胞层面证明枸杞多糖能够提升奶牛肝细胞的抗氧化性。对于奶牛肝细胞相关研究提供一定的研究基础。

    奶牛气管抗菌肽基因乳腺特异性表达重组质粒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110643634A

    公开(公告)日:2020-01-03

    申请号:CN201911025737.8

    申请日:2019-10-25

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种奶牛气管抗菌肽基因(TAP)乳腺特异性表达质粒及其构建方法和应用。具体地,PCR扩增TAP基因的编码序列,将其插入到携带增强的绿色荧光蛋白基因的通用表达载体pEGFP-N1的多克隆位点中。通用表达载体pEGFP-N1经Ase I+Hind III双酶切,去除CMV启动子,克隆奶牛乳腺特异性表达β-乳球蛋白基因(BLG)启动子序列并取代Ase I和HindIII酶切位点,构建奶牛气管抗菌肽基因(TAP)乳腺特异性表达质粒。采用上述重组质粒转染奶牛乳腺上皮细胞,得到的细胞系可用于分泌具有生物活性的奶牛气管抗菌肽,用于奶牛乳腺组织免疫机制研究;该重组质粒还可应用于基因治疗奶牛乳房炎制剂的研发。

    一种秦川牛CFL1基因的SNP分子标记及其检测方法

    公开(公告)号:CN110564867A

    公开(公告)日:2019-12-13

    申请号:CN201910957607.1

    申请日:2019-10-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于分子遗传学领域,提供了一种秦川牛CFL1基因的SNP分子标记及其检测方法,以包含CFL1基因的待测秦川牛全基因组DNA为模板,以引物对P为引物,PCR扩增秦川牛CFL1基因;用限制性内切酶HinfI消化PCR扩增产物之后,再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定秦川牛CFL1基因第2052位的碱基多态性。由于这一突变位点与秦川牛肉用性状(体长,胸宽,胸深,体重)密切关联,且该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与秦川牛生长性状密切相关的分子遗传标记的方法,因此,可用于秦川牛的辅助选择和分子育种,以加快秦川牛良种繁育速度。

    褪黑素在增加机体金黄色葡萄球菌型乳房炎抗性中的应用

    公开(公告)号:CN110420207A

    公开(公告)日:2019-11-08

    申请号:CN201910743667.3

    申请日:2019-08-13

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及褪黑素在增加机体金黄色葡萄球菌型乳房炎抗性中的应用,本发明证明了褪黑素预处理的细胞可以极显著减少金葡菌侵染细胞造成的细胞凋亡。并且从透射电镜观察到褪黑素预处理的细胞较未处理细胞在金葡菌侵染三小时后拥有更多的自噬小体,说明褪黑素处理的细胞对金黄色葡萄球菌侵染的抗性增强。腹腔注射褪黑素的小鼠在发生乳腺炎时乳腺组织红肿较少,组织形态相比更正常且拥有更多的中性粒细胞的动员和炎性物质的渗出并且组织细胞的凋亡小于未注射褪黑素的小鼠。说明褪黑素可以显著提高小鼠的免疫能力从而减少组织的损伤。

    一种粘质沙雷氏菌的检测引物及荧光定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN107523622A

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201710812437.9

    申请日:2017-09-11

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/6851 C12Q2531/113 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明提供一种粘质沙雷氏菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为:TGCCTGGAAAGCGGCGATGG和CGCCAGCTCGTCGTTGTGGT;该检测方法包括:1)提取待测样品DNA;2)以该DNA为模板,使用上述引物,采用荧光定量PCR方法扩增粘质沙雷氏菌,且在61℃退火阶段收集荧光值Ct样品值;3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值,建立粘质沙雷氏菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线,并根据Ct样品值,在标准曲线上确定样品中的粘质沙雷氏菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高,其检测限可达到×102cfu/mL,检测方法快速准确、耗时短。

    一种鲁氏不动杆菌的检测引物及荧光定量PCR检测方法

    公开(公告)号:CN106282354A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610747187.0

    申请日:2016-08-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供一种鲁氏不动杆菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为:T T A T T T G A T C A G G C G C A A A G 和CGTTTCTTGCCATCCCATTTA;该检测方法包括:1)提取待测样品DNA;2)以该DNA为模板,使用上述引物,采用荧光定量PCR方法扩增鲁氏不动杆菌,且在55℃退火阶段收集荧光值Ct样品值;3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值,建立鲁氏不动杆菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线,并根据Ct样品值,在标准曲线上确定样品中的鲁氏不动杆菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高,其检测限可达到×102cfu/mL,检测方法快速准确、耗时短。

    一种检测奶牛乳腺组织lncRNA基因芯片的设计方法

    公开(公告)号:CN104561261A

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201410629821.1

    申请日:2014-11-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种检测奶牛乳腺组织lncRNA基因芯片的设计方法,以1头正常泌乳奶牛和1头患有乳房炎奶牛为样本,取其乳腺组织,提取其总RNA,并混合;去核糖体RNA,再去含polyA的RNA;得到的mRNA随机打断成为短片段,合成cDNA第一链、cDNA第二链,洗脱经末端修复、加碱基A,加测序接头,降解第二条链;进行片段大小选择,PCR扩增,构建文库;建好的测序文库进行测序;然后获取Clean reads、Cufflinks重构转录本、non-coding RNA库注释,进行蛋白库比对,过滤和去除mRNA,经CPC预测,得到Long Chain Non-Coding RNA预测序列结果文件;根据牛编码蛋白质的基因序列和lncRNA序列,开发并设计同时检测奶牛乳腺组织lncRNA和mRNA的芯片。可以满足有关牛乳腺组织lncRNA的研究,对牛其它组织器官lncRNA表达、功能等方面的研究也有借鉴作用。

    水牛属产品分子诊断试剂盒

    公开(公告)号:CN101215603A

    公开(公告)日:2008-07-09

    申请号:CN200710192372.9

    申请日:2007-12-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种水牛属产品分子诊断试剂盒,包括盒体,其特征是盒体内设有以水牛属特异性基因位点为基础设计的水牛属特异性引物对和PCR体系。原理是通过测序和比对分析,获得属间物种特异性基因位点,采用PCR扩增和电泳检测方法解决了牛亚科内水牛属与其它属间物种产(制)品的鉴别难题。试剂盒所采用的分子生物学试剂均为商品化产品,对水牛属产(制)品鉴别检出率很高,假阳性率低,结果稳定,重复性好,可应用于食品检验技术领域和畜牧技术领域。

    一种纳米壳聚糖抑菌增效剂的制备方法

    公开(公告)号:CN119587577A

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN202411174519.1

    申请日:2024-08-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种纳米壳聚糖抑菌增效剂的制备方法,包括,将壳聚糖溶解于乙酸中,待溶解后静置隔夜至无明显颗粒,得到壳聚糖溶液;向壳聚糖溶液中加入抑菌药物进行磁力搅拌,再加入交联剂得到纳米壳聚糖抑菌增效剂。首次使用了纳米壳聚糖共轭青霉素,在临床耐药大肠杆菌上得到了效果验证,为减少临床药物的使用及药物残留提供了应用可能,相较于目前相较于目前常用的抗生素治疗方法,本发明具有提高抑菌效果、降低药物使用量、减少药物残留、应对耐药问题和制备方法简便等优势。本研究以耐药大肠杆菌为基础,通过添加不同浓度的纳米壳聚糖抑菌增效剂,评价其对耐药大肠杆菌的抑菌效果。以期为临床用药提供一定的理论和实验基础。

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