公开(公告)号：CN106282354B

公开(公告)日：2021-03-12

申请号：CN201610747187.0

申请日：2016-08-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张慧敏 ,  樊永亮 ,  夏海磊 ,  喻佩 ,  毛永江 ,  杨章平

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供一种鲁氏不动杆菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为：TTATTTGATCAGGCGCAAAG和CGTTTCTTGCCATCCCATTTA；该检测方法包括：1)提取待测样品DNA；2)以该DNA为模板，使用上述引物，采用荧光定量PCR方法扩增鲁氏不动杆菌，且在55℃退火阶段收集荧光值Ct样品值；3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值，建立鲁氏不动杆菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线，并根据Ct样品值，在标准曲线上确定样品中的鲁氏不动杆菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高，其检测限可达到×102cfu/mL，检测方法快速准确、耗时短。

公开(公告)号：CN107523622A

公开(公告)日：2017-12-29

申请号：CN201710812437.9

申请日：2017-09-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张慧敏 ,  夏海磊 ,  毛永江 ,  杨章平

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/06 ,  C12N15/11 ,  C12R1/43

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明提供一种粘质沙雷氏菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为：TGCCTGGAAAGCGGCGATGG和CGCCAGCTCGTCGTTGTGGT；该检测方法包括：1)提取待测样品DNA；2)以该DNA为模板，使用上述引物，采用荧光定量PCR方法扩增粘质沙雷氏菌，且在61℃退火阶段收集荧光值Ct样品值；3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值，建立粘质沙雷氏菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线，并根据Ct样品值，在标准曲线上确定样品中的粘质沙雷氏菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高，其检测限可达到×102cfu/mL，检测方法快速准确、耗时短。

公开(公告)号：CN106282354A

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201610747187.0

申请日：2016-08-26

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张慧敏 ,  樊永亮 ,  夏海磊 ,  喻佩 ,  毛永江 ,  杨章平

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供一种鲁氏不动杆菌荧光定量PCR检测引物和方法。该引物核苷酸序列分别为：T T A T T T G A T C A G G C G C A A A G 和CGTTTCTTGCCATCCCATTTA；该检测方法包括：1)提取待测样品DNA；2)以该DNA为模板，使用上述引物，采用荧光定量PCR方法扩增鲁氏不动杆菌，且在55℃退火阶段收集荧光值Ct样品值；3)根据模式细菌浓度为×102、×103、×104、×105、×106、×107时对应的Ct标准值，建立鲁氏不动杆菌的细菌数lg标准与Ct标准值的标准曲线，并根据Ct样品值，在标准曲线上确定样品中的鲁氏不动杆菌的数量。本发明提供的引物特异性强、灵敏度高，其检测限可达到×102cfu/mL，检测方法快速准确、耗时短。