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公开(公告)号:CN104087560B
公开(公告)日:2016-10-19
申请号:CN201310655726.4
申请日:2013-12-05
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌漆酶突变体蛋白,其特征在于,该突变体蛋白氨基酸序列由SEQ ID No.1所示的细菌漆酶氨基酸序列第323位甘氨酸至332位甘氨酸进行缺失突变获得。本发明通过基因工程改造方法获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白编码基因、其表达质粒及工程菌,并可在将工程菌大规模发酵及诱导表达后,获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白。本发明以海洋未培养微生物来源的细菌漆酶Lac15为基础,通过基因工程改造,获得突变基因;同时利用重组大肠杆菌进行高密度培养的方法,高效表达细菌漆酶突变体蛋白。本发明大幅提高了细菌漆酶的稳定性和产量。
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公开(公告)号:CN102220302B
公开(公告)日:2013-08-07
申请号:CN201110132525.7
申请日:2011-05-20
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明通过基因定点突变的方法获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶的基因、突变质粒、工程菌,并可在将工程菌诱导表达后,获得葡萄糖耐受浓度提高的β-葡萄糖苷酶。本发明以来自海洋未培养微生物来源的β-葡萄糖苷酶为基础,通过PCR定点突变,获得突变基因。相对野生型β-葡萄糖苷酶蛋白,获得的突变蛋白的葡萄糖耐受浓度提高了13倍,而其他酶学性质没有变化,在工业上具有应用价值,其可以改善木质纤维素的发酵工艺,并且可生产出高达20-30%浓度的果汁。
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公开(公告)号:CN101955922A
公开(公告)日:2011-01-26
申请号:CN201010248207.2
申请日:2010-08-02
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶及其表达,该葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶是具有SEQ ID No:2所示的氨基酸序列的多肽,其基因编码序列如SEQ ID No:1所示。本发明还公开了含有该葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶的表达菌株。本发明所述的β-葡萄糖苷酶来自海洋未培养微生物,具有较好的葡萄糖耐受性,可以改善木质纤维素的发酵工艺,并且可生产出高达20-30%浓度的果汁;其葡萄糖抑制常数为1000mM,本发明葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶在pH6-9范围内具有好的稳定性。
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公开(公告)号:CN1807607A
公开(公告)日:2006-07-26
申请号:CN200610037937.1
申请日:2006-01-20
Applicant: 安徽大学
Abstract: 一种真菌共培养发酵生产漆酶的方法,将栓菌AH28-2(Trametes sp.AH28-2)的菌悬液接种在发酵培养基中于22~37℃培养1~4天,然后加入木霉ZH1(Trichoderma sp.ZH1)的菌悬液继续培养5~10天,最后分离得到漆酶制剂,酶活达6,000U/L(愈创木酚法)。培养基为液体培养基,主要含一定量的碳源、氮源、钾与钠的磷酸盐、铜与铁的硫酸盐、腺嘌呤和维生素B等。本方法中不用芳香化合物和重金属离子诱导,安全、环保,酶活高且活力稳定。
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公开(公告)号:CN1807606A
公开(公告)日:2006-07-26
申请号:CN200610037655.1
申请日:2006-01-05
Applicant: 安徽大学
Abstract: 一种栓菌AH28-2固态发酵生产漆酶的方法,是将栓菌AH28-2菌株种液接种在经灭菌的固体培养基上于20~28℃条件下发酵培养20~30天。固体培养基由3~5份油料作物秸杆、1~3份粮食麸皮、1~2份花生壳粉和2~6倍质量的水组成,自然pH。发酵结束后加水浸提,经沉淀除杂、超滤浓缩和冻干得到块状漆酶,酶活在8000U/g(ABTS法)以上。
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公开(公告)号:CN116023461B
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202310111008.4
申请日:2023-02-14
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种高效安全的抗菌肽变体及其应用,以天然抗菌肽Uperin3.6序列(如序列SEQNO:1所示)为基础,通过用碱性氨基酸精氨酸替换其无序N端区段;重复两个淀粉样C端序列并在其两端各加上3个精氨酸;以及在重复的两个淀粉样C端序列之间插入四氨基酸序列DPDG(DPDG具有形成β‑turn结构的最大倾向性)并在其两端各加上3个精氨酸。本发明抗菌肽能够提升抗菌肽的活性和安全性,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有较好的抗菌性能,本发明的抗菌肽作为新型抗菌剂具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN116179501B
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202310318953.1
申请日:2023-03-29
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种漆酶突变体、其编码基因、表达菌株及其应用。本发明以粗毛栓菌(Trametessp.)的漆酶LacB为出发搜索同源序列、分析其进化关系、通过祖先序列重建,获得突变基因。含有突变基因的工程菌诱导表达后,获得比酶活提高且稳定性提升的漆酶突变体LacANC,突变体的比酶活提高了3.5倍。在比活力提高的同时,突变体的稳定性提升了20倍,该突变体在氧化转化黄曲霉毒素B1中具有潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN116064427B
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202211375350.7
申请日:2022-11-04
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种酰基辅酶A合成酶突变体、其编码基因、表达菌株及其应用,本发明以来自海洋未培养微生物来源的酰基辅酶A合成酶为基础,通过Funclib设计突变位点后全基因合成,获得突变基因。含有突变质粒的工程菌诱导表达后,获得比酶活提高且稳定性提升的酰基辅酶A合成酶。以棕榈酸为底物时,突变体的比酶活提高了4.4倍。在比活力提高的同时,突变体的稳定性也得到了提升,该突变体在酶法检测游离脂肪酸体外诊断试剂盒中具有潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN119286808A
公开(公告)日:2025-01-10
申请号:CN202411727401.7
申请日:2024-11-28
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种漆酶突变体及其在氧化转化黄曲霉毒素中的应用。本发明以灰盖鬼伞(Coprinopsis cinerea)的漆酶为出发酶,通过分子对接,分析构效关系,设计突变。含有突变基因的工程菌诱导表达后,筛选获得脱毒效率提升的突变体漆酶Lcc5‑T485E。在使用相同蛋白质量的酶时,突变体Lcc5‑T485E对AFB1的转化效率相较于Lcc5有明显提升,该突变酶在氧化转化黄曲霉毒素中具有潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN117660514A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311662930.9
申请日:2023-11-30
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌自诱导高效蛋白表达系统的构建及应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的枯草芽孢杆菌重组菌以费氏弧菌的LuxI/R系统为自诱导体系,以pBH‑amyZ1为载体骨架,以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主。通过对自诱导体系中诱导模块PluxI启动子的‑10区和‑35区进行改造,获得的重组菌经摇瓶发酵后胞外AmyZ1活性是对照的1.83倍,达到213.67U/mL。最后,以蔗糖酶InvDz13和果聚糖酶39为报告蛋白时,获得的重组菌发酵后的胞外InvDz13和39活性分别是原始对照菌的2和1.6倍,证明了本发明中所构建的枯草芽孢杆菌自诱导高效蛋白表达系统具有普适性。
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