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公开(公告)号：CN106282217B
公开(公告)日：2019-12-06
申请号：CN201610838951.5
申请日：2016-09-21
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体，按以下方法构建而成：(1)克隆β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA序列；(2)克隆光敏调控单元的DNA序列；(3)将切割得到的β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA酶切片段和光敏调控单元的DNA酶切片段连接至pET22b(+)载体上，即得所述β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体。本发明通过插入光敏调控单元构建得到可光诱导的表达载体，该表达载体可通过光照手段对β‑葡萄糖苷酶突变体蛋白进行诱导表达，与传统的诱导表达方法相比，光照诱导方法具有表达量高、无外源添加物的特点，此外光照诱导方法对蛋白的表达强度可通过光照强度进行控制，且不影响后续纯化步骤。
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公开(公告)号：CN104087560A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201310655726.4
申请日：2013-12-05
Applicant: 安徽大学
CPC classification number: C12N9/0061 , C12Y110/03002
Abstract: 本发明公开了一种细菌漆酶突变体蛋白，其特征在于，该突变体蛋白氨基酸序列由SEQ ID No.1所示的细菌漆酶氨基酸序列第323位甘氨酸至332位甘氨酸进行缺失突变获得。本发明通过基因工程改造方法获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白编码基因、其表达质粒及工程菌，并可在将工程菌大规模发酵及诱导表达后，获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白。本发明以海洋未培养微生物来源的细菌漆酶Lac15为基础，通过基因工程改造，获得突变基因；同时利用重组大肠杆菌进行高密度培养的方法，高效表达细菌漆酶突变体蛋白。本发明大幅提高了细菌漆酶的稳定性和产量。
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公开(公告)号：CN106282217A
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201610838951.5
申请日：2016-09-21
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体，按以下方法构建而成：(1)克隆β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA序列；(2)克隆光敏调控单元的DNA序列；(3)将切割得到的β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA酶切片段和光敏调控单元的DNA酶切片段连接至pET22b(+)载体上，即得所述β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体。本发明通过插入光敏调控单元构建得到可光诱导的表达载体，该表达载体可通过光照手段对β-葡萄糖苷酶突变体蛋白进行诱导表达，与传统的诱导表达方法相比，光照诱导方法具有表达量高、无外源添加物的特点，此外光照诱导方法对蛋白的表达强度可通过光照强度进行控制，且不影响后续纯化步骤。
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公开(公告)号：CN104087560B
公开(公告)日：2016-10-19
申请号：CN201310655726.4
申请日：2013-12-05
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌漆酶突变体蛋白，其特征在于，该突变体蛋白氨基酸序列由SEQ ID No.1所示的细菌漆酶氨基酸序列第323位甘氨酸至332位甘氨酸进行缺失突变获得。本发明通过基因工程改造方法获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白编码基因、其表达质粒及工程菌，并可在将工程菌大规模发酵及诱导表达后，获得稳定性提高的细菌漆酶蛋白。本发明以海洋未培养微生物来源的细菌漆酶Lac15为基础，通过基因工程改造，获得突变基因；同时利用重组大肠杆菌进行高密度培养的方法，高效表达细菌漆酶突变体蛋白。本发明大幅提高了细菌漆酶的稳定性和产量。
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