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公开(公告)号:CN118956830A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411358848.1
申请日:2024-09-27
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体及其在水解丙二酰染料木苷中的应用。本发明以来自海洋未培养微生物的β‑葡萄糖苷酶为基础,通过同源建模和分子对接进行设计改造,获得了水解丙二酰染料木苷效率和稳定性提升的突变酶。在相同质量酶蛋白条件下,突变酶水解丙二酰染料木苷的比率较出发酶提高了1.5倍;30‑45℃条件下,突变酶的半衰期较出发酶提高了3.7倍。该突变体在水解大豆异黄酮生产苷元中具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号:CN117701538A
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202311746353.1
申请日:2023-12-19
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变酶、其编码基因、表达菌株及其应用。本发明以来自海洋未培养微生物的普鲁兰酶为出发酶,通过Funclib设计获得比酶活提升的普鲁兰酶突变酶。以普鲁糖为底物时,突变酶的比酶活提高了1.42倍,应用条件下的酶稳定性较出发酶提升了23.5%。该突变酶在与生淀粉水解酶共同作用水解生淀粉中具有潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN117660281A
公开(公告)日:2024-03-08
申请号:CN202311648356.1
申请日:2023-11-29
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种利用枯草芽孢杆菌高效表达蔗糖酶的方法,属于基因工程和生物工程领域。本发明的枯草芽孢杆菌重组菌以pBHSS4为载体骨架,以来源于解单端孢菌素微杆菌的蔗糖酶基因为目的基因,以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主,成功实现了InvDz13蔗糖酶的表达,并通过筛选得到最佳信号肽SPYomL、共表达伴侣蛋白复合物GrpE‑DnaK‑DnaJ以及共表达分泌途径元件SppA,进一步提高了蔗糖酶的表达水平。利用本发明枯草芽孢杆菌重组菌可高效表达蔗糖酶,以其为生产菌株,摇瓶发酵上清中蔗糖酶的酶活最高达到61.14U/mL,加快了蔗糖酶InvDz13工业化生产及应用的进程。
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公开(公告)号:CN117568368A
公开(公告)日:2024-02-20
申请号:CN202311551771.5
申请日:2023-11-21
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种通过沉默灰盖鬼伞胞外蛋白酶高效表达漆酶Lcc5的方法,属于分子生物学和生物工程领域。本发明通过基因干扰技术,实现在丝状真菌灰盖鬼伞中干扰胞外金属蛋白酶的表达,继而提高灰盖鬼伞对漆酶Lcc5的表达。获得的金属蛋白酶干扰菌株经过摇瓶培养以及1‑L发酵罐培养过后,漆酶的表达提高70%左右。灰盖鬼伞金属蛋白酶经过干扰过后,该菌株的生物量发生明显的降低。同时,灰盖鬼伞胞外金属蛋白酶被干扰后,降低菌株生长以及孢子数量,但是,对于灰盖鬼伞表达漆酶的能力却得到提高,为丝状真菌灰盖鬼伞表达系统的发展提供了新的研究思路。
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公开(公告)号:CN117187084A
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202310868057.2
申请日:2023-07-14
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种黑曲霉重组表达担子真菌漆酶的方法,属于微生物学和生物工程技术领域。本发明以黑曲霉MA70.15为实验菌株,系统探索了原生质体制备中的酶解液组成、菌丝培养方式、酶解时间、酶解温度和菌株培养时间对原生质体制备的影响,获得了一种高效制备黑曲霉原生质体的方法,使原生质体的数目提升了约5倍,数目达到2.2×106个/mL。在上述基础上,利用聚乙二醇介导法将质粒转入到黑曲霉原生质体中,转化子数目提升约4倍,实现了黑曲霉原生质体的高效遗传转化。通过启动子优化,实现了灰盖鬼伞漆酶Lcc9的有效表达,酶活约150U/L。本发明将进一步促进黑曲霉表达系统的发展。
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公开(公告)号:CN116200407A
公开(公告)日:2023-06-02
申请号:CN202310035238.7
申请日:2023-01-10
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种真菌漆酶的过表达基因、表达菌株、菌株的构建方法及漆酶的表达方法,真菌漆酶的过表达基因以egfp‑skn7过表达片段替换灰盖鬼伞菌株的lcc1编码区,获得所述真菌漆酶的过表达基因,以提高漆酶的酶活。改造后的灰盖鬼伞菌株具有真菌漆酶的过表达基因,可在与球托霉菌w5共培养0h漆酶总酶活达190U/L,是野生型菌株的30倍;共培养36h酶活达到最高点,较野生型菌株酶活48h达到最高点时间提前了12h,且最高酶活提高1.5倍;在kjakle培养基中培养,加1mMCu2+诱导,漆酶总酶活可达到8000U/L,是野生型菌株的5倍,该菌株具备高效表达漆酶的特点。
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公开(公告)号:CN114891757A
公开(公告)日:2022-08-12
申请号:CN202210661906.2
申请日:2022-06-13
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种漆酶定向进化方法及突变漆酶基因、表达载体、重组菌株及其脱毒黄曲霉毒素应用,所述漆酶的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示,所述SEQ ID No:1中第235位氨基酸由Ser变为Pro得到突变漆酶,所述突变漆酶的氨基酸序列如SEQ ID No:3所示。本发明的有益效果在于:本发明以在Pichiapastoris中异源表达的漆酶为基础,通过定点饱和突变,并在P.pastoris中异源表达突变漆酶基因,构建了一个“小而精”的饱和突变体文库;最终通过筛选获得了一株重组毕赤酵母突变菌株,其发酵产生的酶蛋白脱毒AFB1的效率提升至1.34倍,突变体蛋白可应用于生物乙醇制备过程中干酒糟及其可溶物(DDGS)中AFB1的同步脱毒。
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公开(公告)号:CN108546721A
公开(公告)日:2018-09-18
申请号:CN201810359565.7
申请日:2018-04-20
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物合成对羟基苯甲酸的方法,以一株土壤来源的真菌菌株Gongronella sp.w5为生产菌,从其发酵液中提取分离获得对羟基苯甲酸。与化学合成法相比,整个反应过程是在常温常压下进行的,污染小、能耗小,并且制备方法简单,不需要酚类物质作为原料;本发明目标产物纯度大于98%。
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公开(公告)号:CN103598998A
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201310596244.6
申请日:2013-11-21
Applicant: 安徽大学
Abstract: 本发明涉及一种来源于海洋微生物的细菌漆酶Lac15以及使角蛋白纤维具体为人发染色的组合物,该组合物含有细菌漆酶Lac15、至少一种氧化染料、至少一种表面活性剂。本发明也涉及它们在角蛋白纤维具体如人发染色中的应用方法。本发明组合物可以在至少一种氧化染料存在下配成待用式制剂,达到染色更均匀、强度更好、色度也更好的效果,既不会造成严重降解,也不会造成角蛋白纤维脱色,且选择性小,能更好地耐受头发可能受到的各种刺激。
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