公开(公告)号：CN117568368A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311551771.5

申请日：2023-11-21

Applicant: 安徽大学

Inventor： 姚动邦 ,  冉杰 ,  方泽民 ,  刘娟娟 ,  张学成 ,  肖亚中

IPC: C12N15/57 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12N9/02 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种通过沉默灰盖鬼伞胞外蛋白酶高效表达漆酶Lcc5的方法，属于分子生物学和生物工程领域。本发明通过基因干扰技术，实现在丝状真菌灰盖鬼伞中干扰胞外金属蛋白酶的表达，继而提高灰盖鬼伞对漆酶Lcc5的表达。获得的金属蛋白酶干扰菌株经过摇瓶培养以及1‑L发酵罐培养过后，漆酶的表达提高70％左右。灰盖鬼伞金属蛋白酶经过干扰过后，该菌株的生物量发生明显的降低。同时，灰盖鬼伞胞外金属蛋白酶被干扰后，降低菌株生长以及孢子数量，但是，对于灰盖鬼伞表达漆酶的能力却得到提高，为丝状真菌灰盖鬼伞表达系统的发展提供了新的研究思路。

公开(公告)号：CN116814594A

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202310729760.5

申请日：2023-06-16

Applicant: 安徽大学

Inventor： 方泽民 ,  冉杰 ,  张学成 ,  姚动邦 ,  刘娟娟

IPC: C12N9/58 ,  C12N15/57 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12P21/06 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种灰盖鬼伞来源的蛋白酶基因的重组表达及其重组酶降解大豆渣的应用，属于分子生物学和基因工程领域。本发明实现了灰盖鬼伞来源的蛋白酶基因mpr的同源重组表达。获得的灰盖鬼伞重组菌株经摇瓶发酵后的胞外蛋白酶酶活可达41000U/L左右。纯化后的蛋白酶的比酶活为204.38U/mg。酶学性质分析结果表明，该蛋白酶的最适温度为50℃，且在30‑50℃范围内保持1h后该蛋白酶能保持70％以上的酶活；该蛋白酶的最适pH为8.0，在pH范围6.5‑9.0时，该蛋白酶的酶活效率能保持在70％以上，同时，该蛋白酶可有效将大豆渣蛋白水解成小分子肽。