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公开(公告)号：CN104388593B
公开(公告)日：2017-02-01
申请号：CN201410745685.2
申请日：2014-12-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于检测猪圆环病毒的Taqman Real-time PCR试剂盒，包含扩增预混液、阴性对照、阳性对照以及序列SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:2的扩增引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物。本发明在PCR的基础上，使用了探针法，只有当探针引物特异的结合到扩增靶序列上并且PCR上游引物在有效延伸时，报告荧光基团和猝灭荧光基团分离，从而荧光检测系统才能接收到荧光信号，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步；且该反应始终都是闭管的实时检测可以有效防止反应产物的污染，与普通PCR方法相比具有更高的准确性，有助于猪圆环病毒的防控和隐性带毒动物的剔除。
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公开(公告)号：CN106222131A
公开(公告)日：2016-12-14
申请号：CN201610674898.X
申请日：2016-08-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/071 , C12N7/00 , A61K39/275 , A61P31/20 , C12R1/93
CPC classification number: C12N5/061 , A61K39/12 , C12N7/00 , C12N2509/00 , C12N2710/24021 , C12N2710/24034
Abstract: 本发明公开了一种羔羊睾丸支持细胞自然传代细胞系及其在羊痘病毒分离培养和增殖中的用途。本发明的细胞系是通过对羔羊睾丸原代细胞进行分离和纯化得到羔羊睾丸支持细胞后，经过自然传代得到的一种羔羊睾丸支持自然传代细胞系。研究发现，该细胞系对于接种羊痘病毒较为敏感，用该细胞系所增殖的病毒滴度较新生羊睾丸原代细胞、Vero细胞以及BHK21细胞分别高约1.5、2.5以及2.3个病毒滴度。利用该细胞系分离羊痘病毒可保证病毒的均一、稳定，同时可防止因多次利用原代细胞而使所分离的病毒带有其他病原的风险。此外，利用该传代细胞系制备疫苗简化了生产工艺、缩短了生产周期，降低了生产成本，并且保证了疫苗质量稳定，对疫苗规模化生产具有一定的现实意义。
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公开(公告)号：CN106191304A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610537118.7
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 内蒙古河套农牧业技术研究院
Abstract: 本发明公开了一种检测小反刍兽疫病毒抗原的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV H蛋白IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT-PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT-PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN106086239A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610536855.5
申请日：2016-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于小反刍兽疫病毒抗原检测的免疫磁珠试剂盒及其用途，属于生物技术领域。本发明所述的试剂盒包括兔抗PPRV全病毒IgG偶联的免疫磁珠、以PPRVM基因片段为靶点检测小反刍兽疫病毒抗原的引物对，RT‑PCR反应混合液及RNA聚合酶。所述引物对的序列分别如SEQ ID NO.1以及SEQ ID NO.2所示。本发明的提出克服了小反刍兽疫病毒抗原检测过程中PPRV病原易降解，且病原RNA提取过程中使用的待检毒液体积有限导致所提取的RNA无法达到RT‑PCR检测的最低要求，而出现假阴性结果的问题，为小反刍兽疫病毒抗原的检测提供了一种有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN103893776B
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201410101828.6
申请日：2014-03-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K47/46
Abstract: 本发明公开了一种羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法和应用。本发明针对羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗的特性，制备得到了用于羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗的耐热冻干保护剂，所述的耐热冻干保护剂中含有海藻糖30～70g/L，脱脂奶粉10～30g/L，聚乙烯吡咯烷酮10～30g/L，明胶5～15g/L，精氨酸0.5～4g/L，维生素C1～5g/L，剩余成分为超纯水。本发明的耐热冻干保护剂可以使疫苗在2～8℃保存24个月，病毒效价不发生大的改变，疫苗产品冻干前后病毒损失率为0.3个滴度，在37℃条件下保存30d，病毒损失率仅为1.0个滴度。本发明解决了羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗仅能在-15℃条件下保存和运输的瓶颈技术，使疫苗的储存、运输更为方便。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104372110B
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201410745664.0
申请日：2014-12-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于检测小反刍兽疫病毒的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒，包含扩增预混液、阴性对照、阳性对照以及序列SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.2的扩增引物及SEQ ID NO.3的探针引物的混合物。本发明的有益效果在于：利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析，用来检测小反刍兽疫病毒的试剂盒，使得该试剂盒特异性高、稳定性好、操作简便；并且比普通PCR的灵敏度高，能够用于检测低微含量样品的小反刍兽疫病毒；不仅适用于科研单位定量分析，而且适合于各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等的病原检测分析，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN104800842A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201510172159.6
申请日：2015-04-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/275 , A61K47/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供一种山羊痘、绵羊痘二价细胞弱毒疫苗，有效成分包括山羊痘病毒细胞传代致弱毒以及绵羊痘病毒细胞传代致弱毒；其中，山羊痘病毒细胞传代致弱毒为山羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Goatpox Virus HN-XY2010F43株CCTCC V201503，绵羊痘病毒细胞传代致弱毒为绵羊痘病毒细胞传代致弱疫苗株Sheeppox Virus GS-WW 2010 F44株CCTCC V201504。本发明的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗安全，且能够产生有效的免疫保护力。本发明对于研制安全高效的弱毒疫苗以及用本发明公开的弱毒株规模化生产山羊痘、绵羊痘病毒二价细胞弱毒疫苗来防控山羊痘和绵羊痘具有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN104758928A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510030082.9
申请日：2015-01-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K39/275 , A61K47/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗及其制备方法和用途。本发明的一种山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗，其有效成分为本发明发明人自行分离且经传代致弱培养后获得的山羊痘、羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒或其传代毒，其中山羊痘病毒细胞传代致弱毒为Goatpox Virus HN-XY2010F43株，保藏编号为CCTCC NO：V201503；羊传染性脓疱病毒细胞传代致弱毒为Orf Virus HB-TS09F65株，保藏编号为CCTCC NO：V201406。攻毒保护试验结果显示，本发明所制备的山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗安全，且能够产生有效的免疫保护力。本发明对于研制安全高效的弱毒疫苗以及用本发明公开的弱毒株规模化生产山羊痘、羊口疮病毒二联细胞弱毒疫苗来防控羊痘和羊口疮具有重要的现实意义。
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公开(公告)号：CN103952377A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410161991.1
申请日：2014-04-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/00 , C12N5/071 , A61K39/275 , A61P31/20 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种用于羊传染性脓疱病毒分离培养和增殖的细胞系及其制备方法和应用。本发明的一种细胞系是通过对新生牛睾丸原代细胞进行分离和纯化后得到的一种新生牛睾丸支持细胞系。研究结果发现，该细胞系对于接种羊传染性脓疱病毒较为敏感，用该细胞系所增殖的病毒滴度较新生牛睾丸原代细胞高约1个病毒滴度，比MDBK细胞系高1.9个病毒滴度。利用该细胞系分离ORFV病毒可以保证病毒的均一、稳定，同时可以防止因多次利用原代细胞而使所分离的病毒带有其他病原的风险。此外，利用该传代细胞系制备疫苗简化了疫苗的生产工艺、缩短了生产周期，降低了生产成本，同时还保证了制备得到的疫苗质量稳定，因此，对疫苗规模化生产具有一定的现实意义。
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公开(公告)号：CN103255234A
公开(公告)日：2013-08-21
申请号：CN201310199211.8
申请日：2013-05-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供了一种用于检测羊传染性脓疱皮炎病毒的检测方法，通过设计一对引物和一条探针对样品的DNA模板进行实时荧光定量PCR检测，本发明还提供了利用上述检测方法检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒。本发明针对ORFV的保守区域H2L基因建立的实时定量方法特异性高，稳定性好；本发明用来检测羊传染性脓疱皮炎病毒的试剂盒，操作简便，用户只需将待检样品的DNA加入反应管中，根据扩增曲线即可得出检测结果，省时省力，成本较低，时间由原来的3-4小时缩短到1-2小时；并且比普通PCR的灵敏度高，可用于检测低微含量的羊传染性脓包皮炎病毒，可适用于我国各级防控单位，基层兽医站，大中型养殖场等，具有较好的应用前景。
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