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公开(公告)号:CN1821391A
公开(公告)日:2006-08-23
申请号:CN200610038610.6
申请日:2006-03-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/06
Abstract: 一种鸡精原细胞分离纯化方法,涉及转基因、珍稀物种的保存和组织与细胞工程等领域。本发明先分离鸡精原细胞,然后进行Percoll分离、贴壁纯化,本发明首次对不同时期鸡胚的睾丸,比较以组合酶和Percoll介质梯度的分离方法,并依据睾丸细胞不同贴壁特性进行纯化,以探索合适的鸡精原细胞分离方法、时期、及精原细胞纯化的可能性。通过从鸡睾丸组织中分离出精原细胞,并经过Percoll梯度离心和贴壁纯化方法进一步对鸡精原细胞进行纯化,能制备出睾丸细胞数和存活率都较高的生精上皮细胞悬液,而且还能确保去除睾丸中其它体细胞成分。
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公开(公告)号:CN117683705A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311756853.3
申请日:2023-12-20
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明公开一种鸡多能干细胞体外培养方法,属于畜牧学和生物技术领域;通过添加FGF2、IWR‑1和XAV‑93,并以STO细胞为饲养层,建立FIX培养体系,从鸡新鲜种蛋EGK.X期分离胚盘明区细胞,在FIX培养体系中,采用5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱进行培养,每天更换培养液,每2‑3天传代一次,进行鸡多能干细胞PSCs体外培养;本发明提供的方法可以在短期内使鸡PSCs快速增殖,且维持其多能性和分化潜能;为研究鸡PSCs生物学特性提供了材料,为家禽的良种扩繁、基因修饰、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。
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公开(公告)号:CN116942357A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310951697.X
申请日:2023-07-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及基于内镜引导下的公鸡睾丸注射模型的建立方法和应用,包括以下步骤:将公鸡全身麻醉,术部选择最后肋骨的肋弓后缘与脊柱交界的凹陷处,术部消毒后,划开术部皮肤,直至腹腔,将内镜镜头操作鞘沿打开的切口深入腹腔,前斜式内镜插入操作鞘内并卡紧;打开膨宫加压器,使腹腔膨起,通过内镜显示器观察公鸡腹腔内结构,将内镜向脊柱侧缓慢移动,直至视野中出现睾丸组织;注射器在操作鞘上方与之平行方向进针,缓慢深入腹腔内;在内镜观察下,将注射器缓慢扎入公鸡睾丸内,边退针边推注。本发明方法采取新的手术通路,切口更小,对实验动物损伤小,成功率高,操作时间短,术后感染概率低,可提高动物术后的存活率。
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公开(公告)号:CN116656735A
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN202310721034.9
申请日:2023-06-19
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/55 , C12N15/53
Abstract: 本发明提供了一种鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统及其构建方法和应用,属于基因编辑技术领域。本发明的鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统,包括TRE‑CAS9‑rtTA‑Puro载体和sgRNA‑sy004载体。本发明将由TRE‑CAS9‑rtTA‑Puro载体和sgRNA‑sy004载体组成的鸡CYP19A1基因可诱导敲除系统转染入待敲除细胞中,能够在Dox的作用下,诱导CAS9表达,以此控制鸡CYP19A1基因敲除程度,避免基因过度敲除,无法控制激素水平,影响鸡体存活。
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公开(公告)号:CN115896175A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211650762.7
申请日:2022-12-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N9/00 , C12N15/52 , C12N15/12 , C07K14/465
Abstract: 本发明属于禽类生殖技术领域,特别是涉及基因C2EIP在促进PGCs形成中的应用和C2EIP蛋白介导的泛素化E3连接酶复合体。本发明提供了基因C2EIP在促进鸡原始生殖细胞形成中的应用,基因C2EIP表达得到的蛋白以及C2EIP蛋白介导的泛素化E3连接酶复合体在调控鸡原始生殖细胞形成过程中的应用。本发明提供的应用能够有效的提高体外鸡原始生殖细胞的形成效率,扩大鸡原始生殖细胞的形成数量,解决原始生殖细胞数量不足的问题,为进一步实现鸡原始生殖细胞在物种资源保护领域的应用提供细胞材料。
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公开(公告)号:CN115885975A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211589326.3
申请日:2022-12-12
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种高效的鸡胚组织块冻存复苏的方法,属于生物技术领域。本发明在鸡胚中分离组织块,加入组织块冷冻保护液后进行冻存,复苏组织块后游离出鸡成纤维细胞;本发明为稀缺物种(如地方畜禽品种)的细胞建库以进行大规模组织块冻存以及种质资源保存提供依据。
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公开(公告)号:CN115747140A
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202211487333.2
申请日:2022-11-25
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 一种诱导鸡胚胎干细胞分化生成原始生殖细胞的方法,属于生物技术领域。其特征是,鸡胚胎干细胞分离培养后,采用诱导培养基,至诱导分化后,收集细胞。本发明提供的方法和诱导培养基可以将鸡胚胎干细胞诱导分化为原始生殖细胞,质量稳定,安全性高,为研究鸡胚原始生殖细胞的发生机制提供理论基础,为组织工程、药物开发和细胞治疗提供大量的细胞来源,为基因修饰、基因打靶、基因敲除、基因转染及生产转基因动物奠定实验基础。
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公开(公告)号:CN111893091B
公开(公告)日:2022-10-28
申请号:CN202010861186.5
申请日:2020-08-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种诱导大鼠极小胚胎干细胞分化为心肌细胞的方法,包括以下步骤:(1)、通过流式细胞仪分选获得大鼠骨髓中CD45−Lin−CD106+细胞(极小胚胎干细胞);(2)、5‑氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化;(3)、通过qRT‑PCR,免疫荧光检测心肌蛋白相关基因,验证5‑氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化过程。通过本发明,旨在从大鼠骨髓组织中分离培养出极小胚胎干细胞,并采用5‑氮杂胞苷诱导分化,观察其生物学特性及定向分化特征,以期为临床缓慢性心律失常的细胞移植治疗寻找一种方便、快速的途径。验证结果合理准确,实验过程严密周谨。
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公开(公告)号:CN113186303A
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202110639335.8
申请日:2021-06-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明涉及一种鸡的品种鉴定方法,包括以下步骤:提取鸡基因组DNA;通过15对微卫星位点对鸡基因组DNA进行STR基因分型测序,统计出测得的等位基因,与该微卫星位点特有等位基因型进行比对,从而鸡品种的品种鉴定;本发明通过使用分子标记技术对纯种和杂交品种实行科学的品种特异性鉴定,操作简单且结果可靠,可以为地方鸡遗传资源保护和合理利用提供科学依据。
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公开(公告)号:CN112877332A
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN202110283164.X
申请日:2021-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/66 , C12N15/65 , C12Q1/66
Abstract: 本发明提供一种由双荧光素酶报告基因检测鸡RIPK2启动子活性的方法,包括以下步骤:步骤1)、鸡RIPK2基因启动子全长的克隆;步骤2)、鸡RIPK2启动子区系列缺失片段报告质粒的构建和鉴定;步骤3)、鸡RIPK2启动子活性定性分析;步骤4)、双荧光素酶报告基因检测鸡质粒RIPK2启动子的活性;步骤5)、鸡RIPK2核心启动子区的确定;步骤6)、鸡RIPK2核心启动子区转录因子的筛选;利用软件TRANSFAC和AliBaba 2.1对鸡RIPK2启动子区转录因子结合位点进行预测分析。通过本发明,便于对鸡RIPK2基因启动子的调控方式及调控元件进行研究。具有灵敏度高、准确性强、检测迅速、费用较低等特点,避免了转染效率对结果的影响。
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