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公开(公告)号:CN118356273A
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202410719341.8
申请日:2024-06-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及基于超声引导下的山羊子宫内膜炎模型的建立方法,所述方法包括以下步骤:将全身麻醉后的山羊清空直肠内粪便并消毒外阴后,将超声探头伸入直肠,使用阴道扩张器暴露子宫颈,在超声影像引导下,使输精管经阴道进入子宫角,撤阴道扩张器,采用输精管将大肠杆菌悬液推注于两侧子宫角内。该方法操作简单,全程可视,可实现在子宫角释放大肠杆菌,生理反应小,可重复性高。
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公开(公告)号:CN117363572A
公开(公告)日:2024-01-09
申请号:CN202310996935.9
申请日:2023-08-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型的建立方法和应用,包括以下步骤:将复苏与传代后的犬角膜上皮细胞按MOI=1:1加入对数生长期的伪中间葡萄球菌培养3h,加入庆大霉素和溶菌酶清除胞外菌,后添加低浓度的溶菌酶和庆大霉素进行维持培养3h,培养后使用细胞刮沿一个方向刮下细胞收集并离心,加入戊二醛溶液固定,乙醇梯度脱水,使用不含EDTA的胰酶消化细胞,采用流式细胞仪检测,以PI+/Caspase‑1+判定为Caspase‑1介导的细胞焦亡。该实验方法操作简单,可成功构建伪中间葡萄球菌诱导犬角膜上皮细胞焦亡模型,重复性高,不会导致细胞出现细胞坏死或凋亡。
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公开(公告)号:CN111134089B
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN202010106019.X
申请日:2020-02-20
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/027 , A61K35/74 , A61D1/00 , A61D7/00
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型的建立方法;实验犬麻醉后,使用聚维酮碘溶液冲洗角膜和结膜囊,使用乳酸钠林格溶液将残留的聚维酮碘溶液冲洗干净,开睑器开睑,实验犬右侧卧保定,调整显微镜焦距以及犬头部位置,确保眼球完全暴露在视野内;吸取伪中间葡萄球菌菌液,在显微镜观察下注射器针头从瞳孔正中央水平线右侧0.3mm处进针,穿过角膜上皮层,于正中角膜基质层注入菌液,按住进针点拔出注射器,按压片刻;取下开睑器,闭合上下眼睑。该方法实验设备简单,操作方法简便,可成功构建犬伪中间葡萄球菌性角膜溃疡模型,重复性好,不会导致实验犬并发感染和死亡等不理想情况的发生,适用范围广。
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公开(公告)号:CN112126627A
公开(公告)日:2020-12-25
申请号:CN202011055337.4
申请日:2020-09-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/37 , C12Q1/6851 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种犬角膜上皮细胞永生化细胞系的构建方法和应用,包括以下步骤:将实验犬麻醉后,采集角膜组织,收集角膜上皮组织,进行上皮细胞原代培养;将纯化后的原代犬角膜上皮细胞进行携带SV40T抗原基因的病毒转染,通过单克隆获得永生化犬角膜上皮细胞。本发明方法建立的细胞易于培养,增殖快,且具有血清依赖性,无肿瘤变,有利于进行角膜相关疾病致病机理、药物开发和疾病防治的体外研究,提供基础材料制备方法。
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公开(公告)号:CN118086446A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410130197.4
申请日:2024-01-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,提供一种奶牛乳腺铁死亡模型的建立方法与应用,所述方法包括以下步骤:挤奶后,将消毒后的乳头经乳导管在左后乳区注射含肺炎克雷伯菌的生理盐水,作为感染组,右后乳区注射无菌生理盐水作为对照组;感染一段时间后,将将奶牛麻醉后采集乳腺组织,立即将部分乳腺组织转移到甲醛溶液中,并收集剩余组织放入低温保存管中保存。本发明所述模型构建方法具有便利、快捷、成功率高,易重复等优点,能够实现铁死亡在个体水平的定性和定量,使奶牛乳腺组织能够成为便利的模型来研究铁死亡现象。
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公开(公告)号:CN111454872A
公开(公告)日:2020-07-28
申请号:CN202010180295.0
申请日:2020-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种禽致病性大肠杆菌VI型分泌系统clpV基因缺失株及其构建方法和应用,用于禽致病性大肠杆菌的致病机理的研究和防控。利用Red同源重组系统成功构建APEC TW-XM菌株的clpV基因缺失株,获得缺失株TW-XM△clpV。将clpV基因克隆到表达载体pBR322中,转化入缺失株TW-XM△clpV,获得相应的基因回补株TW-XMC△clpV。本发明通过腹腔注射大肠杆菌构建小鼠感染动物模型,检测发现脑、血、肺组织载菌量以及脑组织中脑膜炎相关炎症因子mRNA的表达均显著下降。证明clpV与APEC致病力密切相关。
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公开(公告)号:CN118207153A
公开(公告)日:2024-06-18
申请号:CN202410272313.6
申请日:2024-03-11
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种肺炎克雷伯菌诱导奶牛乳腺上皮细胞铁死亡模型的构建方法与应用,包括以下步骤:采用肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae)侵染奶牛乳腺上皮细胞,以未感染的奶牛乳腺上皮细胞作为对照组;所述奶牛乳腺上皮细胞为无菌采集于泌乳高峰期的奶牛乳腺组织,并经过Ⅱ型胶原酶消化和纯化处理。本发明具有便利、快捷、成功率高,易重复等优点,能够实现铁死亡在细胞水平的定性和定量,使奶牛乳腺上皮细胞能够成为便利的模型来研究铁死亡现象。
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公开(公告)号:CN118078796A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410119826.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 扬州大学
IPC: A61K31/225 , A61P27/02 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及富马酸二甲酯在制备治疗犬伪中间葡萄球菌性角膜炎药物中的应用。本发明首次将DMF作为临床细菌性角膜炎治疗的新型药物进行研究,发现并证实了其有效的抗炎抗菌效果。本研究中首次发现,200μM/L的DMF应用后,可有效抑制胞内、胞外细菌数,并表现出优于DMF在浓度为20μM/L时的抗炎效果。本研究中首次发现,DMF以浓度依赖性抑制伪中间葡萄球菌的生长和生物被膜的形成。
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公开(公告)号:CN116942357A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310951697.X
申请日:2023-07-31
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及基于内镜引导下的公鸡睾丸注射模型的建立方法和应用,包括以下步骤:将公鸡全身麻醉,术部选择最后肋骨的肋弓后缘与脊柱交界的凹陷处,术部消毒后,划开术部皮肤,直至腹腔,将内镜镜头操作鞘沿打开的切口深入腹腔,前斜式内镜插入操作鞘内并卡紧;打开膨宫加压器,使腹腔膨起,通过内镜显示器观察公鸡腹腔内结构,将内镜向脊柱侧缓慢移动,直至视野中出现睾丸组织;注射器在操作鞘上方与之平行方向进针,缓慢深入腹腔内;在内镜观察下,将注射器缓慢扎入公鸡睾丸内,边退针边推注。本发明方法采取新的手术通路,切口更小,对实验动物损伤小,成功率高,操作时间短,术后感染概率低,可提高动物术后的存活率。
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公开(公告)号:CN111564219A
公开(公告)日:2020-08-21
申请号:CN202010274141.8
申请日:2020-04-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G16H50/50 , G16B5/00 , C12Q1/6851 , C12N1/20 , A01K67/02
Abstract: 本专利设计一种大肠杆菌感染山羊的构建方法,并利用该动物模型进行了细菌感染检测研究和益生菌辅助治疗研究。该模型的构建方法包括:细菌接种,益生菌(屎肠球菌)干预,血液学检查,肠道病理组织学分析和肠道炎症相关基因表达分析。该方法具有简便、快速、高效、经济等优点,可以用于反刍动物肠炎的研究提供模型,益生菌和药物筛选等。该技术发明对于研究反刍动物消化系统感染机制和防控治疗研究具有重大意义。
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