公开(公告)号：CN112481200A

公开(公告)日：2021-03-12

申请号：CN202011555174.6

申请日：2020-12-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙小林 ,  顾翔 ,  徐佩 ,  李红校 ,  朱业 ,  左其生 ,  李碧春

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/10 ,  C12N5/0775 ,  C12N15/867

Abstract: 本发明涉及一种提升大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞效率的方法，包括以下步骤：（1）构建慢病毒干扰载体G9a‑shRNA，将G9a‑shRNA转染至大鼠骨髓间充质干细胞；（2）通过5‑氮杂胞苷诱导转染干扰载体后的骨髓间充质干细胞，在第21天的时候流式细胞检测肌钙蛋白阳性细胞的阳性率。通过本发明，在5‑氮杂胞苷诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞过程中，敲低H3K9me2甲基化酶G9a，观察其最终诱导效率，以期为骨髓间充质干细胞分化心肌细胞过程中寻找一种方便、快速的途径。采用FuGENE（Promega）脂质体介导G9a‑shRNA慢病毒重组质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞，以减低H3K9me2的表达的方法，从而增加诱导效率，验证结果合理准确，实验过程严密周谨。

公开(公告)号：CN111893091A

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN202010861186.5

申请日：2020-08-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙小林 ,  顾翔 ,  徐佩 ,  李红校 ,  朱业 ,  左其生 ,  李碧春 ,  姜江 ,  董晓娜 ,  韦玮

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/074

Abstract: 本发明涉及一种诱导大鼠极小胚胎干细胞分化为心肌细胞的方法，包括以下步骤：（1）、通过流式细胞仪分选获得大鼠骨髓中CD45−Lin−CD106+细胞(极小胚胎干细胞)；（2）、5-氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化；（3）、通过qRT-PCR，免疫荧光检测心肌蛋白相关基因，验证5-氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化过程。通过本发明，旨在从大鼠骨髓组织中分离培养出极小胚胎干细胞，并采用5-氮杂胞苷诱导分化，观察其生物学特性及定向分化特征，以期为临床缓慢性心律失常的细胞移植治疗寻找一种方便、快速的途径。验证结果合理准确，实验过程严密周谨。

公开(公告)号：CN111893091B

公开(公告)日：2022-10-28

申请号：CN202010861186.5

申请日：2020-08-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 孙小林 ,  顾翔 ,  徐佩 ,  李红校 ,  朱业 ,  左其生 ,  李碧春 ,  姜江 ,  董晓娜 ,  韦玮

IPC: C12N5/077 ,  C12N5/074

Abstract: 本发明涉及一种诱导大鼠极小胚胎干细胞分化为心肌细胞的方法，包括以下步骤：（1）、通过流式细胞仪分选获得大鼠骨髓中CD45−Lin−CD106+细胞(极小胚胎干细胞)；（2）、5‑氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化；（3）、通过qRT‑PCR，免疫荧光检测心肌蛋白相关基因，验证5‑氮杂胞苷诱导极小胚胎干细胞分化过程。通过本发明，旨在从大鼠骨髓组织中分离培养出极小胚胎干细胞，并采用5‑氮杂胞苷诱导分化，观察其生物学特性及定向分化特征，以期为临床缓慢性心律失常的细胞移植治疗寻找一种方便、快速的途径。验证结果合理准确，实验过程严密周谨。