一种葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶及其表达

    公开(公告)号:CN101955922A

    公开(公告)日:2011-01-26

    申请号:CN201010248207.2

    申请日:2010-08-02

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶及其表达,该葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶是具有SEQ ID No:2所示的氨基酸序列的多肽,其基因编码序列如SEQ ID No:1所示。本发明还公开了含有该葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶的表达菌株。本发明所述的β-葡萄糖苷酶来自海洋未培养微生物,具有较好的葡萄糖耐受性,可以改善木质纤维素的发酵工艺,并且可生产出高达20-30%浓度的果汁;其葡萄糖抑制常数为1000mM,本发明葡萄糖耐受的β-葡萄糖苷酶在pH6-9范围内具有好的稳定性。

    一种真菌共培养发酵生产漆酶的方法

    公开(公告)号:CN1807607A

    公开(公告)日:2006-07-26

    申请号:CN200610037937.1

    申请日:2006-01-20

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种真菌共培养发酵生产漆酶的方法,将栓菌AH28-2(Trametes sp.AH28-2)的菌悬液接种在发酵培养基中于22~37℃培养1~4天,然后加入木霉ZH1(Trichoderma sp.ZH1)的菌悬液继续培养5~10天,最后分离得到漆酶制剂,酶活达6,000U/L(愈创木酚法)。培养基为液体培养基,主要含一定量的碳源、氮源、钾与钠的磷酸盐、铜与铁的硫酸盐、腺嘌呤和维生素B等。本方法中不用芳香化合物和重金属离子诱导,安全、环保,酶活高且活力稳定。

    栓菌AH28-2固态发酵生产漆酶的方法

    公开(公告)号:CN1807606A

    公开(公告)日:2006-07-26

    申请号:CN200610037655.1

    申请日:2006-01-05

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种栓菌AH28-2固态发酵生产漆酶的方法,是将栓菌AH28-2菌株种液接种在经灭菌的固体培养基上于20~28℃条件下发酵培养20~30天。固体培养基由3~5份油料作物秸杆、1~3份粮食麸皮、1~2份花生壳粉和2~6倍质量的水组成,自然pH。发酵结束后加水浸提,经沉淀除杂、超滤浓缩和冻干得到块状漆酶,酶活在8000U/g(ABTS法)以上。

    一种漆酶突变体LacF-25及其表达菌株和应用

    公开(公告)号:CN119709663A

    公开(公告)日:2025-03-28

    申请号:CN202510011486.7

    申请日:2025-01-04

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种漆酶突变体LacF‑25及其表达菌株和应用。本发明以毛栓菌(Trametes hirsuta)AH28‑2漆酶为出发酶通过分子对接,分析位置结构,获得突变基因。含有突变基因的工程菌诱导表达后,获得氧化转化毒素能力提升的漆酶突变酶LacF‑25。突变体LacF‑25在pH 7,50℃条件下,对AFB1的氧化转化能力提升至出发酶的1.14倍。以ABTS为底物时,突变酶LacF‑25在35‑50℃条件下,稳定提升至出发酶的5‑9倍,该突变酶在氧化转化黄曲霉毒素中具有潜在应用价值。

    一种生淀粉水解酶突变体及其表达菌株和应用

    公开(公告)号:CN119242617A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411731468.8

    申请日:2024-11-29

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种生淀粉水解酶突变体及其表达菌株和应用。本发明以来自Pontibacillussp.ZY的α‑淀粉酶AmyZ1为出发酶,通过分子对接确定底物结合亚位点,对+1位点199位残基进行定点突变,获得葡萄糖产量更高的突变酶L199F。该突变酶用在工业制糖工艺时,以玉米生淀粉为底物,液化2h后的DE值可达35%,是出发酶的1.44倍;糖化18h后DE值即可达到99%,较出发酶提前5小时。因此,该突变酶在以玉米生淀粉为底物的制糖工业领域具有较高的潜在应用价值。

    一种β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体及表达工程菌和表达方法

    公开(公告)号:CN106282217A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201610838951.5

    申请日:2016-09-21

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体,按以下方法构建而成:(1)克隆β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA序列;(2)克隆光敏调控单元的DNA序列;(3)将切割得到的β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的DNA酶切片段和光敏调控单元的DNA酶切片段连接至pET22b(+)载体上,即得所述β-葡萄糖苷酶突变体蛋白的表达载体。本发明通过插入光敏调控单元构建得到可光诱导的表达载体,该表达载体可通过光照手段对β-葡萄糖苷酶突变体蛋白进行诱导表达,与传统的诱导表达方法相比,光照诱导方法具有表达量高、无外源添加物的特点,此外光照诱导方法对蛋白的表达强度可通过光照强度进行控制,且不影响后续纯化步骤。

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