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公开(公告)号：CN108085302B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201711093774.3
申请日：2017-11-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现，FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株，该突变株具有高度的遗传稳定性，接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击，而且具有良好的安全性。本发明还发现，IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列，可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。
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公开(公告)号：CN109295006A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109295005A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126187.4
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN104560780B
公开(公告)日：2017-04-12
申请号：CN201410707351.6
申请日：2014-11-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体及其应用。本发明将野生型产气荚膜梭菌ε毒素成熟毒素的第71位酪氨酸突变为非芳香族氨基酸，获得了对于细胞或动物体减毒的ε毒素突变体。本发明进一步公开了含有所述产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体编码基因的重组表达载体和重组宿主细胞。本发明重组表达的产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体在体外以及小鼠体内均实现完全减毒且在小鼠模型中呈现良好的免疫原性和免疫保护性。本发明的产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体或其编码基因能够应用于制备预防产气荚膜梭菌病的ε毒素亚单位疫苗或多价梭菌毒素亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN102776155B
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201110120089.1
申请日：2011-05-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/00 , A61K35/76 , A61K39/125 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12Q1/70 , C12N15/41 , C07K14/085 , C12N15/66 , C12N15/63 , C12R1/93
Abstract: 牛肠道病毒中国分离株及其感染性cDNA克隆的构建和应用。本发明在牛腹泻粪便样品中分离出能够在MA104细胞上稳定产生CPE的牛肠道病毒分离株，其微生物保藏号是：CGMCC？No.4782。本发明用该分离株构建了全长感染性cDNA克隆，将其体外转录后转染细胞获得B族基因2型牛肠道拯救病毒。本发明分离的牛肠道病毒毒株、所构建的全长感染性cDNA克隆及其拯救病毒可应用于牛肠道病毒基因结构与功能的研究、作为牛肠道病毒疫苗载体或制备成预防或治疗牛肠道病毒的疫苗或试剂。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101838658B
公开(公告)日：2012-02-08
申请号：CN201010160669.9
申请日：2010-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N7/00 , C12N15/63 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/10 , C07K14/09 , C07K7/08 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了O型口蹄疫病毒变异株及其编码基因和应用。本发明首先分离到一株O型泛亚谱系口蹄疫病毒O/YS/CHA/05株，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。VP1氨基酸序列比对发现本发明毒株有7个变异位点，其中5个变异位点集中在G-H环内。这些位点的突变使本发明病毒变异株具备了逃逸宿主免疫的能力，使其有优势成为主要流行毒株。因此，可利用本发明变异株制备防治该变异株及相关毒株的灭活疫苗，利用本变异株的优势抗原表位制备合成肽疫苗，以及用其研制O型口蹄疫新型疫苗如VLP疫苗等，这对于控制O/YS/CHA/05及相关变异毒株的流行具有重要价值。
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公开(公告)号：CN101818163A
公开(公告)日：2010-09-01
申请号：CN201010114532.X
申请日：2010-02-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/62 , C12N7/01 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达亚洲1型口蹄疫病毒VLP的重组腺病毒及其应用。本发明将FMDV衣壳蛋白前体P1-2A基因和3C基因拼接在一起而得到一种融合基因，其碱基序列为SEQ ID NO：1所示。将SEQ ID NO：1所示的碱基序列与腺病毒穿梭载体相连接，得到重组腺病毒穿梭载体；将重组腺病毒穿梭载体重组进入人缺损腺病毒5型，筛选，鉴定，得到一种高效表达亚洲1型口蹄疫病毒VLP的重组腺病毒，其微生物保藏号是：CGMCC No.3467。本发明所构建的用缺损腺病毒表达的亚洲1型口蹄疫病毒VLP，在小鼠体内可持续诱导高水平的中和抗体，可作为预防Asia1型口蹄疫的疫苗。
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公开(公告)号：CN109295006B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109293748B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN111961654A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010780070.9
申请日：2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒，其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点，可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株，用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗，免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护；用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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