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公开(公告)号:CN111961654B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN202010780070.9
申请日:2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒,其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点,可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株,用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗,免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护;用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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公开(公告)号:CN109295005B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811126187.4
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体2H1的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号是CGMCC NO.16212的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,与血清竞争性强,可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明进一步提供了采用该单抗为检测抗体所建立的阻断ELISA检测试剂盒,采用一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、竞争性强、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN107253979B
公开(公告)日:2020-09-29
申请号:CN201710349814.X
申请日:2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,是针对7个血清型口蹄疫病毒的一个高度保守的线性表位。抗体检测ELISA结果表明,单克隆抗体10B10识别的表位氨基酸序列及其系列突变体,能够特异性区分A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒的阴阳性血清。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在口蹄疫诊断以及口蹄疫病毒抗体检测中具有应用价值。
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公开(公告)号:CN105859842B
公开(公告)日:2019-09-24
申请号:CN201610183394.8
申请日:2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了A型口蹄疫病毒单克隆抗体识别的中和表位及其应用,属于口蹄疫的防治领域。所述中和表位的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示;其中,X1为任意一种氨基酸;X2为Pro、Ser、Ala、Gln、Val或Thr;X3为Leu、Val、Ala或Thr。所述中和表位与A型口蹄疫病毒抗体阳性血清的特异性反应试验表明其与A型FMDV的阳性血清呈现良好的反应能力,而与O型和Asia1型FMDV阳性血清以及A型FMDV阴性血清没有反应,试验结果证明该中和表位能够特异性区分A型FMDV的阴、阳性血清,在A型口蹄疫的诊断、预防和治疗等方面具有应用潜力。
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公开(公告)号:CN108085302A
公开(公告)日:2018-05-29
申请号:CN201711093774.3
申请日:2017-11-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现,FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株,该突变株具有高度的遗传稳定性,接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击,而且具有良好的安全性。本发明还发现,IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列,可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。
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公开(公告)号:CN107253979A
公开(公告)日:2017-10-17
申请号:CN201710349814.X
申请日:2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K16/10 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位,是针对7个血清型口蹄疫病毒的一个高度保守的线性表位。抗体检测ELISA结果表明,单克隆抗体10B10识别的表位氨基酸序列及其系列突变体,能够特异性区分A型、O型和Asia1型口蹄疫病毒的阴阳性血清。本发明所述单克隆抗体10B10识别的口蹄疫病毒血清型共享性抗原表位在口蹄疫诊断以及口蹄疫病毒抗体检测中具有应用价值。
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公开(公告)号:CN107177558A
公开(公告)日:2017-09-19
申请号:CN201710349810.1
申请日:2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系,其微生物保藏编号为CGMCC No.13841。本发明进一步公开了所述杂交瘤细胞系分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10。间接免疫荧光检测显示,单克隆抗体10B10为一株血清型共享性单抗,其与O、A和Asia1型口蹄疫病毒均呈特异性反应。以本发明所述单克隆抗体10B10作为检测抗体,能够用于A、O和Asia1型口蹄疫病毒抗原或抗体的特异性检测。本发明所述口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10及其杂交瘤细胞系在口蹄疫的诊断或防治中具有应用前景。
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公开(公告)号:CN103981192A
公开(公告)日:2014-08-13
申请号:CN201410148357.4
申请日:2014-04-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一株表达山羊α干扰素的重组腺病毒及其构建方法和应用。本发明首先提供了优化的山羊α干扰素基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示;本发明还提供一株稳定表达山羊α干扰素的重组腺病毒,其微生物保藏编号为:CGMCC No.8757。本发明进一步提供一种构建所述重组腺病毒的方法。本发明所构建的重组腺病毒能够稳定表达山羊α干扰素,病毒滴度高,抗病毒活性强;本发明重组腺病毒及其表达的山羊α干扰素在猪源细胞IBRS2、牛源细胞MDBK和原代羊皮肤细胞均具有抗病毒活性,能用于预防或治疗反刍动物病毒性传染病。
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公开(公告)号:CN101880646A
公开(公告)日:2010-11-10
申请号:CN201010197725.6
申请日:2010-06-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一株Leachii支原体中国分离株及其分离培养基和用途。本发明所分离的Leachii支原体中国分离株的微生物保藏号是:CGMCC No.3808。本发明还公开了适合于所述Leachii支原体中国分离株的分离或传代培养用的培养基。致病性试验结果表明,本发明支原体分离株的传代培养物关节内接种1~2月龄健康犊牛,可复制出典型的多发性关节炎,并能引起一定的死亡,死亡犊牛具有明显的全身症状,多组织器官具有明显的病理变化。结合临床发病和人工接种犊牛的临床症状和病理变化、疾病的流行特点、追踪性流行病学调查以及分离病原的特异性PCR鉴定和遗传进化分析,确证本发明所分离的支原体为Leachii支原体。
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公开(公告)号:CN101724636A
公开(公告)日:2010-06-09
申请号:CN200810171258.2
申请日:2008-10-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了Asial型江苏谱系口蹄疫病毒感染性cDNA及其构建方法和应用。所述感染性cDNA包含了保证合成转录本具有感染性所要求的poIy(A)序列和poIy(C)序列,所述poIy(A)尾具有19-22个A;所述poIy(C)结构具有14-20个聚合C;其5′末端具有T7RNA聚合酶启动子序列,3′末端具有单一的限制性酶切位点。所述感染性cDNA可以和表达T7RNA聚合酶的真核表达载体组成反向遗传操作系统。该感染性cDNA及其反向遗传操作系统可用于拯救口蹄疫病毒,为研究口蹄疫病毒基因的结构与功能、病毒的分子致病机理、开发口蹄疫病毒减毒疫苗株和新型口蹄疫疫苗等奠定了实验基础。
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