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公开(公告)号：CN109293747A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811126936.3
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位，其序列为SEQ ID No.2所示；本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力，用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN106318955A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201510391127.5
申请日：2015-07-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 中国食品药品检定研究院
IPC: C12N15/41 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达人肠道病毒71型衣壳蛋白的重组腺病毒、由其制备的疫苗和应用。本发明分别以融合有碱性蛋白酶裂解位点的口蹄疫病毒2A基因、口蹄疫病毒IRES元件为Linker构建得到两组含有EV71病毒衣壳蛋白P1基因和3CD基因的EV71亚基因组；本发明进一步将所述亚基因组重组至腺病毒表达载体中，经筛选分别获得一株复制能力好、遗传稳定且蛋白表达量高的重组腺病毒，其在感染的细胞中能够高效表达P1和3CD蛋白，同时3CD能够对P1进行正确切割；在小鼠体内能诱导高水平的EV71特异性广谱中和抗体，其诱导抗EV71特异性细胞免疫应答的能力显著优于灭活全病毒抗原，可应用于防治由EV71引起的人手足口病。
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公开(公告)号：CN105859842A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610183394.8
申请日：2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了A型口蹄疫病毒单克隆抗体识别的中和表位及其应用，属于口蹄疫的防治领域。所述中和表位的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示；其中，X1为任意一种氨基酸；X2为Pro、Ser、Ala、Gln、Val或Thr；X3为Leu、Val、Ala或Thr。所述中和表位与A型口蹄疫病毒抗体阳性血清的特异性反应试验表明其与A型FMDV的阳性血清呈现良好的反应能力，而与O型和Asia1型FMDV阳性血清以及A型FMDV阴性血清没有反应，试验结果证明该中和表位能够特异性区分A型FMDV的阴、阳性血清，在A型口蹄疫的诊断、预防和治疗等方面具有应用潜力。
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公开(公告)号：CN102747092B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201210030115.6
申请日：2012-02-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损腺病毒及其应用。本发明首先精确构建了编码O型口蹄疫病毒空衣壳的亚基因组或其突变体，其核苷酸序列分别为SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示；将其与腺病毒表达载体可操作性连接得到重组腺病毒穿梭表达载体，进而与腺病毒骨架载体质粒共转化大肠杆菌，获得了克隆化重组腺病毒基因组；将其线性化后转染细胞，获得两株重组复制缺损型腺病毒。本发明的重组缺损腺病毒滴度高，在复制过程中能够形成口蹄疫病毒空衣壳，并在病毒传代过程中稳定、高效地表达口蹄疫病毒空衣壳，所表达的空衣壳在小鼠体内可持续诱导高水平的中和抗体并可抵抗病毒的攻击，可作为预防或治疗口蹄疫的疫苗。
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公开(公告)号：CN102747092A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210030115.6
申请日：2012-02-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损腺病毒及其应用。本发明首先精确构建了编码O型口蹄疫病毒空衣壳的亚基因组或其突变体，其核苷酸序列分别为SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示；将其与腺病毒表达载体可操作性连接得到重组腺病毒穿梭表达载体，进而与腺病毒骨架载体质粒共转化大肠杆菌，获得了克隆化重组腺病毒基因组；将其线性化后转染细胞，获得两株重组复制缺损型腺病毒。本发明的重组缺损腺病毒滴度高，在复制过程中能够形成口蹄疫病毒空衣壳，并在病毒传代过程中稳定、高效地表达口蹄疫病毒空衣壳，所表达的空衣壳在小鼠体内可持续诱导高水平的中和抗体并可抵抗病毒的攻击，可作为预防或治疗口蹄疫的疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109295006B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109293748B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN111961654A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010780070.9
申请日：2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒，其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点，可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株，用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗，免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护；用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN107177558B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201710349810.1
申请日：2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.13841。本发明进一步公开了所述杂交瘤细胞系分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10。间接免疫荧光检测显示，单克隆抗体10B10为一株血清型共享性单抗，其与O、A和Asia1型口蹄疫病毒均呈特异性反应。以本发明所述单克隆抗体10B10作为检测抗体，能够用于A、O和Asia1型口蹄疫病毒抗原或抗体的特异性检测。本发明所述口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10及其杂交瘤细胞系在口蹄疫的诊断或防治中具有应用前景。
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公开(公告)号：CN106749646A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611199486.1
申请日：2016-12-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C07K14/09 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明所述口蹄疫病毒血清型共享性表位是七个血清型口蹄疫病毒的共享型表位。本发明利用筛选得到的与单克隆抗体3D9特异性结合的噬菌体克隆作为模拟抗原建立的间接ELISA方法，能够特异性的检测出口蹄疫病毒阳性血清。本发明所述单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位在口蹄疫的诊断或防治中具有应用价值。
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