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公开(公告)号：CN116790509B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202310770698.4
申请日：2023-06-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨国生生物科技股份有限公司 , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C12N15/02 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种分泌抗猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞株及其应用，属于生物医药领域。单克隆杂交瘤细胞株命名为312H‑C3，其已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.23018，保藏日期为2021年8月4日。所述杂交瘤细胞株能够稳定分泌特异性识别PRVgB蛋白的单克隆抗体，可用于制备阻断法抗体检测试剂盒，且酶标单抗最佳使用浓度可达1:4000，极大的节省了原材料。基于312H‑C3建立的抗体检测试剂盒操作简易、特异性好、对猪伪狂犬病病毒变异株gB抗体的检测敏感性优于进口试剂盒(56)对比文件赵微 等.猪伪狂犬病病毒HeN1 株gB 蛋白单克隆抗体的制备 及B 细胞线性表位鉴定《.中国预防兽医学报》.2018,第40卷(第9期),854-857.Panpan Zhang et al..Identification oflinear B cell epitope on gB, gC, and gEproteins of porcine pseudorabies virususing monoclonal antibodies《.VeterinaryMicrobiology》.2019,第234卷83-91.Zhenyang Guo et al..Preparation andIdentification of a Monoclonal Antibodyagainst the Pseudorabies Virus gEGlycoprotein through a Novel Strategy.《Veterinary Sciences》.2023,第10卷(第133期),1-12.赵静.猪伪狂犬病病毒gB抗体阻断ELISA检测方法的建立及初步应用《.中国优秀硕士学位论文全文数据库 基础科学辑》.2021,(第9期),A006-296.
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公开(公告)号：CN109295006B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN201811126938.2
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/68 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体3A10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明用口蹄疫非结构蛋白为抗原免疫鼠通过细胞融合技术筛选最终筛选获得一株微生物保藏编号为CGMCC NO.16213的稳定分泌口蹄疫病毒非结构蛋白单抗的杂交瘤细胞系，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，与血清竞争性强，可作为阻断ELISA检测方法中的检测抗体准确区分口蹄疫自然感染动物与免疫接种动物。本发明还提供了采用该单抗为检测抗体建立的阻断ELISA检测试剂盒，采用该一种该检测试剂盒即可检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN109293748B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126944.8
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10，其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力，并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定，其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示，位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN111961654A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010780070.9
申请日：2020-08-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/04 , A61K39/295 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了耐热表型稳定遗传、携带负标记的重组口蹄疫病毒无毒株及O/A型口蹄疫二价灭活疫苗。本发明构建FMDV病毒cDNA感染性克隆质粒，其携带有病毒衣壳耐热表型的分子决定因素、在体内失去复制能力的分子因素、3A和3B蛋白表位缺失的负标记因素及在P1编码区两侧引入Pst I酶切位点，可针对任何流行株替换其衣壳蛋白编码区快速构建并拯救热稳定而且被标记的口蹄疫病毒无毒株，用作口蹄疫灭活疫苗种子病毒。用该通用质粒针对当前两个优势流行株构建两株重组病毒并用其制备O/A型口蹄疫二价灭活疫苗，免疫动物诱导高水平中和抗体并产生免疫保护；用该疫苗接种动物进行抗体检测可实现疫苗接种动物与自然感染动物的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN107177558B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201710349810.1
申请日：2017-05-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系及其应用。本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10的杂交瘤细胞系，其微生物保藏编号为CGMCC No.13841。本发明进一步公开了所述杂交瘤细胞系分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10。间接免疫荧光检测显示，单克隆抗体10B10为一株血清型共享性单抗，其与O、A和Asia1型口蹄疫病毒均呈特异性反应。以本发明所述单克隆抗体10B10作为检测抗体，能够用于A、O和Asia1型口蹄疫病毒抗原或抗体的特异性检测。本发明所述口蹄疫病毒共享型单克隆抗体10B10及其杂交瘤细胞系在口蹄疫的诊断或防治中具有应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106749646A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611199486.1
申请日：2016-12-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C07K14/09 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明所述口蹄疫病毒血清型共享性表位是七个血清型口蹄疫病毒的共享型表位。本发明利用筛选得到的与单克隆抗体3D9特异性结合的噬菌体克隆作为模拟抗原建立的间接ELISA方法，能够特异性的检测出口蹄疫病毒阳性血清。本发明所述单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位在口蹄疫的诊断或防治中具有应用价值。
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公开(公告)号：CN105859880A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610183404.8
申请日：2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
CPC classification number: C07K16/1009 , C07K2317/10
Abstract: 本发明公开了抗A型口蹄疫病毒的单克隆抗体的制备和应用，属于口蹄疫的防治领域。本发明构建了分泌抗A型FMDV的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞系，其微生物保藏号是：CGMCC 12049，其分泌的单克隆抗体为A型FMDV血清型特异性单抗，有高强度的中和能力；用该单克隆抗体建立的A型FMDV抗体的检测方法，本发明单克隆抗体在A型FMDV抗体检测方法中与A型FMDV的强阳性、弱阳性和疑似血清呈现良好的竞争能力，而与O型和Asia1型FMDV强阳性血清以及FMDV阴性血清没有竞争性，能够特异性区分A型FMDV的阴阳性血清，在A型口蹄疫的诊断、预防或治疗等方面具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN116790509A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310770698.4
申请日：2023-06-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨国生生物科技股份有限公司 , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C12N15/02 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种分泌抗猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体的单克隆杂交瘤细胞株及其应用，属于生物医药领域。单克隆杂交瘤细胞株命名为312H‑C3，其已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.23018，保藏日期为2021年8月4日。所述杂交瘤细胞株能够稳定分泌特异性识别PRVgB蛋白的单克隆抗体，可用于制备阻断法抗体检测试剂盒，且酶标单抗最佳使用浓度可达1:4000，极大的节省了原材料。基于312H‑C3建立的抗体检测试剂盒操作简易、特异性好、对猪伪狂犬病病毒变异株gB抗体的检测敏感性优于进口试剂盒和国内其他试剂盒，可以更好地评价猪群免疫状况。
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公开(公告)号：CN109293747B
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN201811126936.3
申请日：2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1，其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强，并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位，其序列为SEQ ID No.2所示；本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力，用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清，并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清，跨越了种间屏障，具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号：CN108085302B
公开(公告)日：2020-02-14
申请号：CN201711093774.3
申请日：2017-11-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现，FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株，该突变株具有高度的遗传稳定性，接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击，而且具有良好的安全性。本发明还发现，IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列，可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。
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