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公开(公告)号:CN113321712A
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN202110819705.6
申请日:2021-07-20
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/08 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 一组猪繁殖与呼吸综合征病毒的抗原多肽及其应用,它涉及生物检测技术领域,本发明要解决在血清学上无法有效区分疫苗免疫和野毒感染的PRRS基因工程标记弱毒疫苗的问题,本发明的抗原肽是由序列表中SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2中的一种或者两种所示的多肽组成的组合物。它用于制备ELISA诊断试剂盒。本发明筛选可用于鉴别诊断的蛋白多肽,并建立相应的间接ELISA检测方法。为今后PRRS基因工程标记弱毒疫苗株提供候选标签蛋白,为PRRS疫苗株和野毒株的鉴别诊断提供技术支持。本发明应用于猪用疫苗及诊断领域。
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公开(公告)号:CN106749646B
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN201611199486.1
申请日:2016-12-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C07K14/09 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位及其应用。本发明首先公开了单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位,其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明所述口蹄疫病毒血清型共享性表位是七个血清型口蹄疫病毒的共享型表位。本发明利用筛选得到的与单克隆抗体3D9特异性结合的噬菌体克隆作为模拟抗原建立的间接ELISA方法,能够特异性的检测出口蹄疫病毒阳性血清。本发明所述单克隆抗体3D9识别的口蹄疫病毒血清型共享性表位在口蹄疫的诊断或防治中具有应用价值。
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公开(公告)号:CN105859880B
公开(公告)日:2019-07-23
申请号:CN201610183404.8
申请日:2016-03-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了抗A型口蹄疫病毒的单克隆抗体的制备和应用,属于口蹄疫的防治领域。本发明构建了分泌抗A型FMDV的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,其微生物保藏号是:CGMCC 12049,其分泌的单克隆抗体为A型FMDV血清型特异性单抗,有高强度的中和能力;用该单克隆抗体建立的A型FMDV抗体的检测方法,本发明单克隆抗体在A型FMDV抗体检测方法中与A型FMDV的强阳性、弱阳性和疑似血清呈现良好的竞争能力,而与O型和Asia1型FMDV强阳性血清以及FMDV阴性血清没有竞争性,能够特异性区分A型FMDV的阴阳性血清,在A型口蹄疫的诊断、预防或治疗等方面具有重要的应用前景。
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公开(公告)号:CN109293748A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201811126944.8
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10,其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力,并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定,其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清,采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN104388437B
公开(公告)日:2017-12-19
申请号:CN201410587130.X
申请日:2014-10-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用。本发明在保证3C蛋白酶对口蹄疫病毒衣壳蛋白的剪切及正确组装和形成的前提下,对O型FMDV的3C基因进行改造或突变,构建3C蛋白酶活性改变的表达O型FMDV P1、2A和3C亚基因组或其突变体的重组腺病毒表达载体,将其转染293细胞筛选获得两株稳定表达O型或O型突变株亚基因组且能正确形成空衣壳的重组腺病毒。两株重组腺病毒的3C蛋白酶活性呈明显下调,对细胞的毒力得以显著降低,有效提升了在动物体内的免疫原性和免疫保护效力的指标。本发明构建的两株重组腺病毒还可组合作为二价口蹄疫候选疫苗覆盖当前中国O型FMDV流行株的抗原谱。
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公开(公告)号:CN106754738A
公开(公告)日:2017-05-31
申请号:CN201611201113.3
申请日:2016-12-22
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/577 , G01N33/569
CPC classification number: C07K16/1009 , A61K39/00
Abstract: 本发明公开了分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体3D9的杂交瘤细胞系及其应用。本发明首先公开了一株分泌口蹄疫病毒共享型单克隆抗体3D9的杂交瘤细胞系,其微生物保藏编号为CGMCC No.13293。本发明还公开了由所述杂交瘤细胞系分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体3D9。IFA特异性鉴定表明,单克隆抗体3D9为一株血清型共享性单抗,其与O型、A型和Asia1型口蹄疫病毒抗原均有反应。本发明以单克隆抗体3D9作为检测抗体,能应用于A、O和Asia1三种血清型口蹄疫病毒抗原或抗体的特异性检测。本发明所述杂交瘤细胞系及其分泌的口蹄疫病毒共享型单克隆抗体3D9在制备诊断或防治口蹄疫的试剂或药物中具有应用前景。
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公开(公告)号:CN104388437A
公开(公告)日:2015-03-04
申请号:CN201410587130.X
申请日:2014-10-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N15/42 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用。本发明在保证3C蛋白酶对口蹄疫病毒衣壳蛋白的剪切及正确组装和形成的前提下,对O型FMDV的3C基因进行改造或突变,构建3C蛋白酶活性改变的表达O型FMDV P1、2A和3C亚基因组或其突变体的重组腺病毒表达载体,将其转染293细胞筛选获得两株稳定表达O型或O型突变株亚基因组且能正确形成空衣壳的重组腺病毒。两株重组腺病毒的3C蛋白酶活性呈明显下调,对细胞的毒力得以显著降低,有效提升了在动物体内的免疫原性和免疫保护效力的指标。本发明构建的两株重组腺病毒还可组合作为二价口蹄疫候选疫苗覆盖当前中国O型FMDV流行株的抗原谱。
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公开(公告)号:CN101724636B
公开(公告)日:2012-09-05
申请号:CN200810171258.2
申请日:2008-10-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了Asial型江苏谱系口蹄疫病毒感染性cDNA及其构建方法和应用。所述感染性cDNA包含了保证合成转录本具有感染性所要求的poIy(A)序列和poIy(C)序列,所述poIy(A)尾具有19-22个A;所述poIy(C)结构具有14-20个聚合C;其5’末端具有T7RNA聚合酶启动子序列,3’末端具有单一的限制性酶切位点。所述感染性cDNA可以和表达T7RNA聚合酶的真核表达载体组成反向遗传操作系统。该感染性cDNA及其反向遗传操作系统可用于拯救口蹄疫病毒,为研究口蹄疫病毒基因的结构与功能、病毒的分子致病机理、开发口蹄疫病毒减毒疫苗株和新型口蹄疫疫苗等奠定了实验基础。
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公开(公告)号:CN109293747B
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN201811126936.3
申请日:2018-09-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/09 , C12N15/42 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位,其序列为SEQ ID No.2所示;本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力,用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清,并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。
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公开(公告)号:CN108085302B
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201711093774.3
申请日:2017-11-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/04 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现,FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株,该突变株具有高度的遗传稳定性,接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击,而且具有良好的安全性。本发明还发现,IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列,可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。
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