抗A型口蹄疫病毒中和性单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN105859880B

    公开(公告)日:2019-07-23

    申请号:CN201610183404.8

    申请日:2016-03-28

    Abstract: 本发明公开了抗A型口蹄疫病毒的单克隆抗体的制备和应用,属于口蹄疫的防治领域。本发明构建了分泌抗A型FMDV的中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞系,其微生物保藏号是:CGMCC 12049,其分泌的单克隆抗体为A型FMDV血清型特异性单抗,有高强度的中和能力;用该单克隆抗体建立的A型FMDV抗体的检测方法,本发明单克隆抗体在A型FMDV抗体检测方法中与A型FMDV的强阳性、弱阳性和疑似血清呈现良好的竞争能力,而与O型和Asia1型FMDV强阳性血清以及FMDV阴性血清没有竞争性,能够特异性区分A型FMDV的阴阳性血清,在A型口蹄疫的诊断、预防或治疗等方面具有重要的应用前景。

    口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用

    公开(公告)号:CN109293748A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811126944.8

    申请日:2018-09-26

    Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3A抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系3A10,其分泌的单抗具有广谱性及高亲和力,并且与血清竞争性强。本发明进一步对单抗3A10所识别的抗原表位进行了精确鉴定,其氨基酸序列为SEQ ID No.2所示,位于口蹄疫病毒非结构蛋白3A蛋白。本发明进一步对该抗原表位肽进行突变得到一系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体作为包被抗原建立的口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒能够特异性区分FMDV感染血清与抗原免疫血清,采用一种该检测试剂盒即能准确检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测快捷方便等优点。

    表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN104388437B

    公开(公告)日:2017-12-19

    申请号:CN201410587130.X

    申请日:2014-10-28

    Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用。本发明在保证3C蛋白酶对口蹄疫病毒衣壳蛋白的剪切及正确组装和形成的前提下,对O型FMDV的3C基因进行改造或突变,构建3C蛋白酶活性改变的表达O型FMDV P1、2A和3C亚基因组或其突变体的重组腺病毒表达载体,将其转染293细胞筛选获得两株稳定表达O型或O型突变株亚基因组且能正确形成空衣壳的重组腺病毒。两株重组腺病毒的3C蛋白酶活性呈明显下调,对细胞的毒力得以显著降低,有效提升了在动物体内的免疫原性和免疫保护效力的指标。本发明构建的两株重组腺病毒还可组合作为二价口蹄疫候选疫苗覆盖当前中国O型FMDV流行株的抗原谱。

    表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN104388437A

    公开(公告)日:2015-03-04

    申请号:CN201410587130.X

    申请日:2014-10-28

    Abstract: 本发明公开了表达O型口蹄疫病毒空衣壳的重组缺损型腺病毒及其构建方法和应用。本发明在保证3C蛋白酶对口蹄疫病毒衣壳蛋白的剪切及正确组装和形成的前提下,对O型FMDV的3C基因进行改造或突变,构建3C蛋白酶活性改变的表达O型FMDV P1、2A和3C亚基因组或其突变体的重组腺病毒表达载体,将其转染293细胞筛选获得两株稳定表达O型或O型突变株亚基因组且能正确形成空衣壳的重组腺病毒。两株重组腺病毒的3C蛋白酶活性呈明显下调,对细胞的毒力得以显著降低,有效提升了在动物体内的免疫原性和免疫保护效力的指标。本发明构建的两株重组腺病毒还可组合作为二价口蹄疫候选疫苗覆盖当前中国O型FMDV流行株的抗原谱。

    Asia1型口蹄疫病毒感染性cDNA及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN101724636B

    公开(公告)日:2012-09-05

    申请号:CN200810171258.2

    申请日:2008-10-30

    Abstract: 本发明公开了Asial型江苏谱系口蹄疫病毒感染性cDNA及其构建方法和应用。所述感染性cDNA包含了保证合成转录本具有感染性所要求的poIy(A)序列和poIy(C)序列,所述poIy(A)尾具有19-22个A;所述poIy(C)结构具有14-20个聚合C;其5’末端具有T7RNA聚合酶启动子序列,3’末端具有单一的限制性酶切位点。所述感染性cDNA可以和表达T7RNA聚合酶的真核表达载体组成反向遗传操作系统。该感染性cDNA及其反向遗传操作系统可用于拯救口蹄疫病毒,为研究口蹄疫病毒基因的结构与功能、病毒的分子致病机理、开发口蹄疫病毒减毒疫苗株和新型口蹄疫疫苗等奠定了实验基础。

    口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用

    公开(公告)号:CN109293747B

    公开(公告)日:2021-04-23

    申请号:CN201811126936.3

    申请日:2018-09-26

    Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒非结构蛋白3B抗原表位肽及其应用。本发明通过细胞融合技术筛选获得一株杂交瘤细胞系2H1,其分泌的单抗广谱性好、保守性高、亲和力强,并且与检测血清有强竞争性。本发明准确鉴定了单抗2H1所识别的抗原表位,其序列为SEQ ID No.2所示;本发明对该抗原表位肽突变得到系列突变体。本发明提供的抗原表位肽及其突变体与口蹄疫感染猪、牛、羊的FMDV抗体阳性血清呈现良好反应能力,用其作为包被抗原建立的抗体ELISA试剂盒能准确区分FMDV感染血清与抗原免疫血清,并且用一种该检测试剂盒就能检测任何动物种属的血清,跨越了种间屏障,具有可靠性高、应用性宽、广谱性好、检测更为快捷方便等优点。

    口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途

    公开(公告)号:CN108085302B

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201711093774.3

    申请日:2017-11-08

    Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒温度敏感减毒株及其构建方法和用途。本发明发现,FMDV IRES结构域4的K区环上的一个胞嘧啶突变为鸟嘌呤或腺嘌呤可获得温度敏感减毒株,该突变株具有高度的遗传稳定性,接种猪能够诱导产生高水平的O型FMDV中和抗体、并能够完全抵抗当前优势流行的O型不同基因型FMDV异源毒株的攻击,而且具有良好的安全性。本发明还发现,IRES C351是所有血清型FMDV毒株温度敏感减毒表型的分子决定因素。本发明提供的口蹄疫病毒温度敏感减毒突变株及其全长cDNA感染性克隆、IRES突变体或嵌合IRES序列,可用于制备口蹄疫减毒活疫苗、作为口蹄疫灭活疫苗生产用种毒、或用于制备口蹄疫RNA疫苗。

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