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公开(公告)号:CN117802275A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202410231350.2
申请日:2024-03-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种犊牛腹泻主要病原三重荧光定量PCR检测方法及其应用,属于分子生物学检测技术领域。本发明解决了常规PCR在灵敏度、效率和病原含量测定等方面存在不足的问题。所述检测方法以待检测样品的RNA或DNA为模板,选择BCoV的N基因、BRV的NSP5基因、大肠杆菌K99基因为检测靶基因,然后比对靶基因序列,确定拟扩增的基因序列候选区域,然后根据确定的基因序列设计定量PCR扩增引物,并于所设计的扩增引物中间设计探针,进行荧光定量PCR检测,最后对荧光定量PCR扩增曲线及Ct值进行分析,获得检测结果。所述检测方法及引物、探针可应用于所述三种病毒或细菌相关检测试剂盒中,适用于牛轮状病毒、牛冠状病毒和大肠杆菌K99的检测领域。
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公开(公告)号:CN116785420A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202311047976.X
申请日:2023-08-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 北京荷牧生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种牛病毒性腹泻病毒的mRNA疫苗及其应用,属于核酸疫苗技术领域。为了提高牛病毒性腹泻病毒mRNA疫苗的免疫保护作用。本发明提供一种牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea Virus)的mRNA疫苗,所述mRNA疫苗编码牛病毒性腹泻病毒的E2蛋白或牛病毒性腹泻病毒截短E2蛋白。实现了对牛病毒性腹泻病毒的免疫效果的提升。
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公开(公告)号:CN104560780B
公开(公告)日:2017-04-12
申请号:CN201410707351.6
申请日:2014-11-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体及其应用。本发明将野生型产气荚膜梭菌ε毒素成熟毒素的第71位酪氨酸突变为非芳香族氨基酸,获得了对于细胞或动物体减毒的ε毒素突变体。本发明进一步公开了含有所述产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体编码基因的重组表达载体和重组宿主细胞。本发明重组表达的产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体在体外以及小鼠体内均实现完全减毒且在小鼠模型中呈现良好的免疫原性和免疫保护性。本发明的产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体或其编码基因能够应用于制备预防产气荚膜梭菌病的ε毒素亚单位疫苗或多价梭菌毒素亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN102776155B
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201110120089.1
申请日:2011-05-10
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N7/00 , A61K35/76 , A61K39/125 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12Q1/70 , C12N15/41 , C07K14/085 , C12N15/66 , C12N15/63 , C12R1/93
Abstract: 牛肠道病毒中国分离株及其感染性cDNA克隆的构建和应用。本发明在牛腹泻粪便样品中分离出能够在MA104细胞上稳定产生CPE的牛肠道病毒分离株,其微生物保藏号是:CGMCC?No.4782。本发明用该分离株构建了全长感染性cDNA克隆,将其体外转录后转染细胞获得B族基因2型牛肠道拯救病毒。本发明分离的牛肠道病毒毒株、所构建的全长感染性cDNA克隆及其拯救病毒可应用于牛肠道病毒基因结构与功能的研究、作为牛肠道病毒疫苗载体或制备成预防或治疗牛肠道病毒的疫苗或试剂。
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公开(公告)号:CN120060520A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510417309.9
申请日:2025-04-03
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开一种检测海藻糖比伯斯坦杆菌的引物对和试剂盒,属于病原微生物检测技术领域。本发明的目的是为了提高检测海藻糖比伯斯坦杆菌的灵敏度、特异性的技术问题。本发明提供一种检测海藻糖比伯斯坦杆菌(Bibersteinia trehalosi)的引物对,所述引物对为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明的检测方法批间重复和批内重复都很稳定,适用于临床大规模检测。
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公开(公告)号:CN116785421B
公开(公告)日:2024-01-09
申请号:CN202311047978.9
申请日:2023-08-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 北京荷牧生物科技有限公司
IPC: A61K39/155 , A61P31/14 , C12N15/45 , C07K14/135 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开一种牛呼吸道合胞体病毒的mRNA疫苗及其应用,属于核酸疫苗技术领域。为了提高牛呼吸道合胞体病毒mRNA疫苗的免疫保护作用。本发明提供一种牛呼吸道合胞体病毒的mRNA疫苗,所述mRNA疫苗编码呼吸道合胞体病毒的F蛋白突变体,呼吸道合胞体病毒的F蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。实现了对牛呼吸道合胞体病毒的免疫效果的提升。
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公开(公告)号:CN116785421A
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202311047978.9
申请日:2023-08-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 北京荷牧生物科技有限公司
IPC: A61K39/155 , A61P31/14 , C12N15/45 , C07K14/135 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开一种牛呼吸道合胞体病毒的mRNA疫苗及其应用,属于核酸疫苗技术领域。为了提高牛呼吸道合胞体病毒mRNA疫苗的免疫保护作用。本发明提供一种牛呼吸道合胞体病毒的mRNA疫苗,所述mRNA疫苗编码呼吸道合胞体病毒的F蛋白突变体,呼吸道合胞体病毒的F蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示。实现了对牛呼吸道合胞体病毒的免疫效果的提升。
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公开(公告)号:CN116694578A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202310482267.8
申请日:2023-04-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了稳定表达T7聚合酶细胞系、轮状病毒反向遗传系统及其构建方法和应用。本发明从新生犊牛腹泻粪便中分离获得两株牛轮状病毒分离株并进一步构建稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系,其微生物保藏编号是:CGMCC No.45342;在此基础上建立了轮状病毒的反向遗传操作系统并拯救了牛轮状病毒分离株、疫苗株BLR株以及表达ZsGreen的报告病毒株,仅需构建牛轮状病毒株的全基因组的11质粒、不依赖辅助质粒即高效拯救病毒,拯救效率达100%。本发明应用所构建反向遗传操作系统对猴轮状病毒株、猪轮状病毒株和人轮状病毒株进行拯救,均能拯救获得相应的病毒,表明本发明建立的轮状病毒反向遗传系统具有毒株广谱性。
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公开(公告)号:CN104560780A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410707351.6
申请日:2014-11-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体及其应用。本发明将野生型产气荚膜梭菌ε毒素成熟毒素的第71位酪氨酸突变为非芳香族氨基酸,获得了对于细胞或动物体减毒的ε毒素突变体。本发明进一步公开了含有所述产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体编码基因的重组表达载体和重组宿主细胞。本发明重组表达的产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体在体外以及小鼠体内均实现完全减毒且在小鼠模型中呈现良好的免疫原性和免疫保护性。本发明的产气荚膜梭菌ε毒素减毒突变体或其编码基因能够应用于制备预防产气荚膜梭菌病的ε毒素亚单位疫苗或多价梭菌毒素亚单位疫苗。
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公开(公告)号:CN102344892A
公开(公告)日:2012-02-08
申请号:CN201110153831.9
申请日:2011-06-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一株Leachii支原体中国分离株及其分离培养基和用途。本发明所分离Leachii支原体中国分离株的微生物保藏号是:CGMCC No.3808。本发明还公开了适合于所述Leachii支原体中国分离株的分离或传代培养用的培养基。致病性试验结果表明,本发明支原体分离株的传代培养物关节内接种1~2月龄健康犊牛,可复制出典型的多发性关节炎,并能引起一定的死亡,死亡犊牛具有明显的全身症状,多组织器官具有明显的病理变化。结合临床发病和人工接种犊牛的临床症状和病理变化、疾病的流行特点、追踪性流行病学调查以及分离病原的特异性PCR鉴定和遗传进化分析,确证本发明所分离的支原体为Leachii支原体。
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