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公开(公告)号：CN110846374A
公开(公告)日：2020-02-28
申请号：CN201910833470.9
申请日：2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种不同绵羊支原体菌株毒力比较分析方法。本发明比较分析绵羊支原体菌株毒力的方法是将经复苏的各待比较分析的绵羊支原体分别接种于不同鸡胚上，再将接种后的鸡胚置于恒温箱内培养，定时检测鸡胚状态及死亡情况，统计各个菌株的鸡胚致死率和接种7d死亡率，结合死亡鸡胚尿囊液绵羊肺炎支原体的鉴定结果，以此进行比较判定。本发明的方法成本低、实验动物SPF鸡胚容易获得、操作简单方便、试验周期短、重复性好等优点，克服了现有技术存在的实验动物价格较为昂贵、对实验动物要求高，动物饲养繁琐、试验周期长、重复性较差等缺点。
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公开(公告)号：CN110452855A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910832513.1
申请日：2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种无血清绵羊肺炎支原体抗原的制备方法，步骤如下：(1)鸡胚准备：准备7-8日龄的健康SPF鸡胚，鸡胚活力旺盛、血管清晰，孵化箱培养；(2)绵羊肺炎支原体接种液准备；(3)鸡胚接种、培养与收获：将绵羊肺炎支原体接种液接种步骤(1)的7-8日龄的健康SPF鸡胚，每枚鸡胚接种0.2ml，接种后，孵化箱继续培养5d，无菌收获死亡鸡胚尿囊液和/或5d后仍未死亡鸡胚尿囊液，得到无血清绵羊肺炎支原体抗原。本发明通过将绵羊肺炎支原体在鸡胚传代培养，收取鸡胚尿囊液，获得不含血清的绵羊肺炎支原体抗原。本发明方法不使用血清，可避免使用血清所存在的诸多问题。
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公开(公告)号：CN110452854A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910832505.7
申请日：2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供一种分离绵羊肺炎支原体的方法，包括以下步骤：(1)采集样品及样品处理，得到样品接种液；(2)鸡胚接种；(3)绵羊肺炎支原体的分离：收集接种后死亡鸡胚和/或9d后未死亡鸡胚，取鸡胚尿囊液进行绵羊肺炎支原体进行活菌检测，若收集鸡胚尿囊液绵羊肺炎支原体阳性，进行保存；若第1代鸡胚尿囊液均为阴性，则将收集鸡胚尿囊液盲传鸡胚，方法同上，若盲传3代仍为阴性，则判定样品为绵羊肺炎支原体阴性，弃去。本发明的方法操作简单，不需要配制成分复杂的绵羊肺炎支原体培养基，避免了现有技术分离培养基配制中常需要高压灭菌或配备大容量滤器等问题；本发明方法可获得不含动物血清的绵羊肺炎支原体。
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公开(公告)号：CN109680080A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811514580.0
申请日：2018-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12R1/35
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体的nfo-RPA检测方法及检测试剂盒。本发明通过以牛支原体的P80基因序列为模板，从P80基因克隆出包含R1序列的M.b序列，以该R1序列为目标设计探针M.b-specific-Probe；其中，所述M.b序列如SEQ ID NO：1所示。相应的，本发明的检测试剂盒，其成分除了商品化的Freeze-dried reaction，280mM MgAc，Rehydration buffer，Test device和PCRD Extraction buffer外，主要包括特别设计的牛支原体特异性的引物、探针及配套试剂：M.b-specific-Forward，M.b-specific-Reverse，M.b-specific-Probe，Nuclease-free water，阳性对照模板。本发明除了用于实验室常规检测牛支原体核酸外，特别适用于无实验室条件下(如基层兽医部门、养殖场等)的现场检测，具有高特异性和灵敏性，是一种快速、准确的牛支原体核酸检测试剂盒，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103484563B
公开(公告)日：2015-06-24
申请号：CN201310285113.6
申请日：2013-07-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 赵志荀 , 张强 , 范斌 , 吴国华 , 颜新敏 , 岳华 , 李应国 , 张光培 , 王远微 , 聂福平 , 周晓黎 , 李健 , 朱海霞 , 芦晓立 , 代雪玲 , 田波 , 孙晓林 , 刘发央
Abstract: 本发明公开一种用于检测绵羊痘病毒的试剂盒。本发明的用于检测绵羊痘病毒的试剂盒内至少包括有四条引物，分别是SEQ ID №1、SEQ ID №2、SEQ ID №3和SEQ ID №4，以及dNTP 、Tris-HCl、KCl、(NH4)2SO4、MgSO4、Tween 20和Bst 酶，以及模板DNA。本发明具有特异性高、检测操作相对简单、快速的优点，可在羊痘病毒流行病学研究中应用及疾病的防控中应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104267193A
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201410464519.5
申请日：2014-09-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N2333/145
Abstract: 本发明公开一种可用于检测水疱性口炎病毒的引物，由这些引物制成的检测试剂盒和制备方法。本发明的用于检测水疱性口炎型病毒的引物基因序列为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、和SEQ ID No.4。相关的实验表明，用本发明的引物序列可特异性快速扩增VSV的核酸，通过核酸电泳检测到特异性条带，同时具有特异性。本发明可在制备快速鉴别VSV的GeXP诊断试剂盒中应用，并在水疱性口炎流行病学研究中应用。
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公开(公告)号：CN102851293B
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201210314930.5
申请日：2011-10-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , A61K48/00 , A61P31/20 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的序列siRNA-165，以及这个序列的用途。
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公开(公告)号：CN102827842A
公开(公告)日：2012-12-19
申请号：CN201210314832.1
申请日：2011-10-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明公开一个可抑制羊痘病毒的siRNA-296序列，这个序列为gccatgatgaactagtaaaagttcaagagacttttactagttcatcatggctt。相关的实验提示本发明的这一序列可以抑制羊痘病毒P32基因的表达，可在制备抗羊痘病毒的疫苗中的应用，也可在制备抗羊痘病毒的药物中的应用，更进一步讲，本发明的序列可在培育具有抗羊痘病毒的羊品种中应用。
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公开(公告)号：CN102417907A
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN201110327949.9
申请日：2011-10-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/113 , A61K48/00 , A61K31/20 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的siRNA序列，以及这个序列的用途。本发明的四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的序列分别是基因序列为SEQ.NO.1的siRNA-61，基因序列为SEQ.NO.2的siRNA-70，基因序列为SEQ.NO.3的siRNA-165，基因序列为：SEQ.NO.4的siRNA-296。本发明公开的四个靶向抑制羊痘病毒ORF095基因的siRNA序列可在制备抗羊痘病毒的疫苗中的应用，也可在制备抗羊痘病毒的药物中的应用，或者在在培育具有抗羊痘病毒的羊品种中的应用。
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公开(公告)号：CN111349637B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202010178955.1
申请日：2020-03-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/31 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种山羊支原体山羊肺炎亚种特异性蛋白87.1及间接ELISA试剂盒，所述蛋白87.1具有如SEQ ID NO.1所示的核酸序列，所述山羊支原体山羊肺炎亚种特异性蛋白87.1制备的间接ELISA抗体检测试剂盒包括抗原蛋白87.1包被的酶标板、样品稀释液、阳性血清、阴性血清、洗涤液、封闭液、兔抗羊二抗、底物显色液、终止液。抗原蛋白87.1的包被量为625ng/孔，阳性血清和阴性血清的稀释度均为1/100。本发明提供的Mccp特异性蛋白87.1制备的间接ELISA试剂盒具有良好特异性，与Mccp阳性血清反应，且不与Mmc、Mcc阳性血清反应。
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