鸡mtDNAD-loop区全序列扩增及测序方法和专用引物

    公开(公告)号:CN105039502A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201410836929.8

    申请日:2014-12-29

    Abstract: 本发明公开了一种鸡mtDNA D-loop区全序列扩增及测序方法和专用引物,属于鸡线粒体基因组研究领域。鸡mtDNA D-loop区全序列扩增及测序用引物,见序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3。扩增及测序方法,包括以下步骤:(1)提取鸡羽毛中的DNA,并检测质量;(2)在鸡mtDNA D-loop区上下游保守区域设计一对PCR引物(见序列表SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2),通过PCR反应扩增包含Cytb基因的片段,经琼脂糖电泳检测;(3)设计测序引物(见序列表SEQ ID NO.3)对PCR产物进行测序;(4)对测序序列进行拼接。本发明的检测方法具有速度快、成本低、易掌握等优点,所获得的mtDNA D-loop区全序列可以应用于鸡遗传资源多样性评估、母系起源、系统进化分析和种质资源鉴定与保护等多个领域。

    基于16SrRNA鹌鹑肉源成分PCR扩增鉴定方法和专用引物

    公开(公告)号:CN107345250B

    公开(公告)日:2020-08-21

    申请号:CN201710503231.8

    申请日:2017-06-27

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测食品中鹌鹑源性成分的方法及专用引物。专用引物见序列表SEQ ID NO 1‑2。针对以鹌鹑肉源DNA为阳性模板,牛、羊、猪、兔、鸽、鸡、鸭和鹅8个物种的DNA为干扰模板的混合模板,分别进行PCR和qPCR反应。其中PCR方法的结果以琼脂糖凝胶电泳图谱中电泳条带为阳性结果,而qPCR方法中以扩增曲线的Ct值小于34的扩增作为阳性结果,检测灵敏度达皮克级DNA。该方法首次利用16S rRNA为目标基因对深加工鹌鹑肉进行检测,所设计引物同时适用于PCR和qPCR方法中,不仅具有良好的特异性,且高度的灵敏性为食品中动物源性成分的鉴定探索了新的途径,具有操作便捷,稳定准确等有益结果。

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