一种水稻空间诱变后代的种植及收获方法

    公开(公告)号:CN103329769B

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201310230125.9

    申请日:2013-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种水稻空间诱变后代的种植及收获方法,属农业技术领域。本发明针对传统的物理和化学诱变技术先收获诱变1代植株全部种子,然后从中随机选择形成诱变2代群体,导致工作量大、随机性强,且大量突变基因被遗弃的问题,提出一种水稻空间诱变后代种植及收获方法。本发明将经过空间诱变后的全部干种子浸种催芽后播种,利用密植控制分蘖,成熟期只收获稻穗特定部位种子形成诱变2代群体,提高诱变后代处理效率。与目前诱变后代处理技术相比,本发明减少了工作量、在一定程度上避免了部分突变基因型的遗弃,提高了诱变育种选择效率。

    一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记

    公开(公告)号:CN103333887A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310238711.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记开发,属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pita基因凝胶电泳的检测方法,提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pita与pita在编码区第918氨基酸的G/T变异(Pita为G,pita为T),设计功能标记Pita-G/T。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用Pita-G/T-out引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用Pita-G/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分Pita和pita序列差异,从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

    一种水稻Wx基因突变的鉴定方法及其应用

    公开(公告)号:CN110343781B

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201910718870.5

    申请日:2019-08-05

    Abstract: 本发明公开了一种水稻Wx基因突变的鉴定方法,包括:提取待测水稻植株基因组构建DNA混合池,同时提取对照水稻植株的基因组DNA;针对Wx基因设计4对巢式PCR引物;以待测水稻植株基因组构建的DNA混合池和对照水稻植株的基因组DNA为模板分别进行巢式PCR;对PCR产物进行HRM分析,确定疑似突变混合池;分别提取疑似突变混合池对应的单株DNA,将单株DNA与对照植株DNA混合进行巢式PCR,扩增产物进行HRM分析获得疑似突变单株,以其DNA为模板进行PCR并进行琼脂糖凝胶电泳鉴定。本发明将TILLING技术与HRM检测手段相结合应用于水稻Wx基因的突变筛选,为水稻诱变后代高效定向筛选提供了新思路。

    白叶枯病抗性相关基因OsPRX30的应用

    公开(公告)号:CN109182348A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811061798.5

    申请日:2018-09-12

    Abstract: 本发明公开一种白叶枯病抗性相关基因OsPRX30的应用,属于植物基因工程技术领域。该OsPRX30基因受白叶枯病病菌诱导后表达量增加。该基因受水稻白叶枯菌的诱导后上调表达,敲除后能提高白叶枯病抗性。将OsPRX30编辑位点序列与U3启动子连接后共同克隆到基因编辑载体pYLCRISPR/Cas9Pubi-H上转化水稻,结果该基因可以负调控水稻白叶枯病抗性。可利用本发明构建的基因编辑载体,应用于水稻抗白叶枯病育种中。本发明有助于更好地了解OsPRX30的作用机制,OsPRX30的克隆为进一步了解水稻-白叶枯病菌互作,抗病信号传导通路奠定基础,在育种中有较大的应用价值。

    一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法

    公开(公告)号:CN104131092B

    公开(公告)日:2016-08-17

    申请号:CN201410349635.2

    申请日:2014-07-22

    Abstract: 本发明属于农业生物技术领域,具体公开一种基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本发明针对目前SNP鉴定的局限性,将多重PCR、巢式PCR、等位特异性PCR相结合,提出基于高分辨率熔解曲线的多SNP鉴定方法。本方法利用多重PCR实现2~4个基因片段扩增,提高实验效率,降低实验成本;利用巢式PCR提高扩增片段特异性,获得高质量、浓度均一的DNA模板,提高HRM技术稳定性;利用等位特异性PCR,实现SNP位点判别,避免荧光标记的设定或繁琐的电泳及酶切操作;通过上述方法的综合运用,实现多个SNP的批量鉴定、降低实验成本。

    一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789655A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126951.8

    申请日:2015-03-23

    CPC classification number: C12Q1/6895

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种水稻稻瘟病抗性基因Pik的分子标记和应用,所述分子标记由一对外引物Pik-O-F、Pik-O-R和一对内引物Pik-T-F、Pik-C-R组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示;利用该标记鉴定水稻稻瘟病抗性基因Pik基因型,不需要经过测序,仅仅通过简单的PCR即可对水稻稻瘟病抗性基因进行基因分型,区分抗稻瘟病菌水稻品种和感病品种,实现了对水稻稻瘟病的分子标记辅助选择,本发明所述分子标记可提高Pik基因的检测效率,适合用于水稻改良分离群体的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

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