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公开(公告)号:CN112457382B
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202011462595.4
申请日:2020-12-14
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法及其应用。紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法,包括重组表达质粒、重组蛋白的表达和蛋白的纯化;重组表达质粒时,所用质粒为pET‑20b(+),将紫花苜蓿植物铁蛋白基因序列克隆至pET‑20b(+)质粒的NdeI和XhoI酶切位点之间,得含目的基因的重组质粒。本发明紫花苜蓿植物铁蛋白的表达纯化方法,得到的紫花苜蓿植物铁蛋白呈球形笼状结构,分子量约为28kDa,直径约为12±0.5nm,水溶性好、热力学稳定性高,分散均一。作为一种新型的植物铁蛋白,为生物活性物水溶性、稳定性和生物利用度等的提高,提供了一种新型纳米载体,在食品、医疗、保健等方面有良好的应用前景,具有很高的应用价值。
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公开(公告)号:CN110904134A
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201911292338.8
申请日:2019-12-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种表达芳樟醇合成酶的融合基因及其应用,涉及代谢工程菌技术领域,所述融合基因自5’端至3’端依次包括启动子-核糖体结合位点RBS-融合标签-芳樟醇合成酶基因bLIS。本发明利用所述融合基因构建了多种不同的重组表达载体,并转化具有GPP合成能力的大肠杆菌,构建工程菌。经验证,所述融合基因、重组表达载体可显著提高芳樟醇合成酶的表达量和可溶性表达,将改造的重组表达载体转入具有GPP合成能力的大肠杆菌重组菌,可有效提高生产菌的芳樟醇产量,在芳樟醇的生物合成过程中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN106518831B
公开(公告)日:2018-07-20
申请号:CN201610946727.8
申请日:2016-10-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07D311/62
Abstract: 本发明公开了一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法,将富含原花色素植物原料的乙醇水溶液提取物,经液‑液萃取后,过凝胶柱,再经FPLC或HSCCC分离,分别得到原花色素二聚体、三聚体成分。本发明的工艺适用于不同来源下的原花色素二聚体和三聚体的分离纯化,具有普适性。本发明的工艺方法得到的原花色素二聚体、三聚体纯度高,方法安全性强、操作简单、耗时短、生产成本低、环境友好、符合绿色化学标准,适用于工业化生产,具有极大的商业价值。
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公开(公告)号:CN106518831A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201610946727.8
申请日:2016-10-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07D311/62
CPC classification number: C07D311/62
Abstract: 本发明公开了一种植物原花色素二聚体、三聚体快速分离制备方法,将富含原花色素植物原料的乙醇水溶液提取物,经液-液萃取后,过凝胶柱,再经FPLC或HSCCC分离,分别得到原花色素二聚体、三聚体成分。本发明的工艺适用于不同来源下的原花色素二聚体和三聚体的分离纯化,具有普适性。本发明的工艺方法得到的原花色素二聚体、三聚体纯度高,方法安全性强、操作简单、耗时短、生产成本低、环境友好、符合绿色化学标准,适用于工业化生产,具有极大的商业价值。
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公开(公告)号:CN105062909A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510600813.9
申请日:2015-09-18
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: Y02E50/13
Abstract: 本发明公开了一种双脂肪酶细胞表面共展示工程菌及其构建方法和应用,该工程菌,为以酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p作为锚定蛋白,以米根霉脂肪酶和南极假丝酵母脂肪酶B为双脂肪酶靶蛋白,共同展示在毕赤酵母细胞表面,构建出的双脂肪酶细胞表面共展示重组酵母工程菌。本发明将米根霉脂肪酶与南极假丝酵母脂肪酶B共展示于毕赤酵母细胞壁表面,制备了米根霉脂肪酶与南极假丝酵母脂肪酶B细胞表面共展示型全细胞催化剂,该表面共展示型全细胞催化剂最高酶活为686U/g-细胞干重,分别是单独展示米根霉脂肪酶或南极假丝酵母脂肪酶B的酶活力的3倍和2倍,催化油脂转酯化反应甲酯得率达96%。
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公开(公告)号:CN103409397A
公开(公告)日:2013-11-27
申请号:CN201310391170.2
申请日:2013-09-02
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种耐高温酸性阿拉伯糖苷酶及其编码基因和应用,该耐高温阿拉伯糖苷酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。该耐高温阿拉伯糖苷酶具有极强的耐热性能和偏酸性pH条件下高活性的特性,在80℃、pH5.5的条件下酶活性最高;该蛋白酶在温度为60-95℃、pH为5.0-7.0的范围内,均具有较高的酶活。该阿拉伯糖苷酶的耐热性能极高,在75℃的反应体系中,保温2h酶活仍保持80%以上。上述特性使得本发明得到的阿拉伯糖苷酶比现有阿拉伯糖苷酶具有更大的优越性,适用于75℃以上高温、偏酸性pH条件下半纤维素的降解,具有潜在的工业应用价值。
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公开(公告)号:CN113105556B
公开(公告)日:2023-06-06
申请号:CN202110195094.2
申请日:2021-02-20
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K38/10 , A61K47/64 , A61K9/51 , A61K47/42 , A61P35/00 , C12R1/19 , A61K31/337
Abstract: 本发明公开了一种修饰ERK多肽抑制剂的铁蛋白纳米粒子及其制备方法和应用,属于抗肿瘤药物制备技术领域。本发明提供的ERK多肽抑制剂修饰的铁蛋白纳米粒子,是将氨基酸序列为MPKKKPTPIQLNP的ERK多肽抑制剂,通过连接序列LEHHHHHHGGGGSGGGGSGGGGS与铁蛋白C末端连接,通过实验证明,本发明的C端修饰ERK多肽抑制剂MPKKKPTPIQLNP的铁蛋白纳米粒子,具有较强的肿瘤细胞生长抑制作用,不仅能够靶向肿瘤细胞,也能抑制肿瘤细胞的增殖生长,所制得的抗肿瘤药物有着很强的细胞毒性,为后续药物靶向肿瘤细胞治疗提供了非常好的载体,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112094861B
公开(公告)日:2022-11-22
申请号:CN202011151848.6
申请日:2020-10-26
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/62 , C12P21/02 , C07K14/405 , C07K1/14 , C07K1/34 , C07K1/22 , C07K1/16 , A61K31/352 , A61K47/69
Abstract: 本发明公开了一种绿藻植物铁蛋白的表达纯化方法及其应用,绿藻植物铁蛋白的表达纯化方法,包括如下步骤:(1)重组蛋白表达工程菌的构建;(2)重组蛋白的表达和收获;(3)重组蛋白的分离纯化。本发明提供的绿藻植物铁蛋白安全,无毒副作用,还具有良好的补铁效果,在自然界中分布广泛;本发明所得的绿藻植物铁蛋白作为一种新的载体具有很好的应用前景,拓宽了铁蛋白的研究范围;将黄酮类化合物包封在蛋白质内部极大地提高了非水溶性生物活性物质的水溶性、稳定性、生物利用度,提高了生物活性物质在食品,医疗,保健等方面的应用。
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