基于引物的核酸的多重扩增的方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN1898395A

    公开(公告)日:2007-01-17

    申请号:CN200480037162.7

    申请日:2004-10-13

    发明人: 韩健

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种诊断或鉴别诊断疾病病原体和第二疾病病原体的新方法。所述公开的方法使用新的被称为TemPCR的扩增策略来容许从任何已知其核酸序列的疾病病原体和/或第二疾病病原体的灵敏性和特异性扩增靶序列。该TemPCR方法使用至少一组特异于待检测的疾病病原体或第二疾病病原体的靶序列富集引物(以低浓度存在)和至少一对共用靶序列扩增引物(以高浓度存在)。至少一对所述靶序列富集引物包括对于靶序列扩增引物的结合序列。因此,使用TemPCR方法容许进行多重扩增反应而不需要以经验优化多重扩增参数。还公开了与TemPCR方法一起使用的核酸分离和靶序列检测的方法。

    一种不对称PCR扩增方法及其应用

    公开(公告)号:CN1280422C

    公开(公告)日:2006-10-18

    申请号:CN200410056866.0

    申请日:2004-08-26

    IPC分类号: C12P19/34 C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种不对称PCR扩增方法及其应用,目的是提供一种能简单、高效的制备单链扩增产物的PCR扩增方法。本发明所提供的不对称PCR引物,包括若干对PCR引物对,其特征在于:每对所述引物对中的一条引物的5′末端均加有一段与待扩增靶序列无关的寡核苷酸尾。所提供的不对称PCR扩增方法,包括如下步骤:1)预变性;2)包括若干变性、引物退火和引物延伸循环的第一部分PCR扩增;3)若干个变性,引物退火和引物延伸循环的第二部分PCR扩增;所述引物延伸中所用PCR引物对中的一条引物的5′末端均加有一段与待扩增靶序列无关的寡核苷酸尾。本发明的不对称PCR扩增方法单链产率高,可进行单重或多重PCR扩增,在核酸检测中可以得到广泛应用。