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公开(公告)号：CN118028201A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410164562.3
申请日：2024-02-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高硫酸软骨素6‑O‑磺基转移酶可溶性表达及酶活的方法，属于生物工程技术领域。本发明首次实现了海洋生物来源的CHST15在原核宿主中异源表达，并通过与促溶标签共表达的策略提高了CHST15可溶性表达量，可使CHST15的胞内酶活提高了2.8倍，达到125.1U/mL。本发明还优化了重组菌的表达条件，将磺基转移酶可溶性表达量进一步提高至134.8U/mL。本方法只通过共表达的方式就实现了磺基转移酶酶活的大幅度提高，并且不影响酶的结构与后续纯化，为酶法生产硫酸软骨素E提供了有效方法。
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公开(公告)号：CN113957029B
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202111257582.8
申请日：2021-10-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控生物被膜杂合系统改善苹果酸生产性能的策略，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段，利用生物被膜，结合苯酚功能化修饰CdS纳米材料，达到提高电子传输。通过引入靶向生物被膜杂合系统，构建得到含有CdS‑生物杂合系统的菌株，显著提高了CdS纳米材料与大肠杆菌的接触面积，提高了NADH浓度，进而改善苹果酸生产。在光照条件下，L‑苹果酸浓度和生产强度分别提高到9.84g/L和0.14g/L/h。5L发酵罐发酵生产该菌株，苹果酸产量达到45.93g/L，具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN114107154B
公开(公告)日：2022-07-15
申请号：CN202111425348.1
申请日：2021-11-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种生产莽草酸的重组菌，表达调控细胞不对称分裂的靶点基因和调控莽草酸生产的靶点基因；调控细胞不对称分裂的靶点基因包括编码细胞骨架蛋白PopZ的基因popZ，调控莽草酸生产的靶点基因包括编码DAHP合成酶的基因aroG，编码3‑脱氢奎宁酸合酶的基因aroB和编码转酮醇酶的基因tktA。本发明的重组菌实现了从头合成莽草酸，底物为葡萄糖，价格低廉，且该菌株在7.5L发酵罐发酵后，莽草酸最高产量为88.1g/L，得率为0.33g/g，生产强度为1.1g/L/h。
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公开(公告)号：CN113929787A
公开(公告)日：2022-01-14
申请号：CN202111255656.4
申请日：2021-10-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种调控生物被膜改善莽草酸生产性能的策略，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段，利用生物被膜自组装系统，将异源目的蛋白固定在细胞生物被膜上来改善接触面积，提高目的蛋白的表达，有效提高底物淀粉的利用效率，使得发酵体系中莽草酸浓度提高。该方法设计简单，系统元件少，菌株生长负荷低，对菌株的生长情况和存活率没有显著影响。利用本发明构建的莽草酸生产菌株为发酵菌株，以淀粉为底物进行发酵生产，莽草酸产量和生产强度分别提高到47.5g/L和0.66g/L/h，具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN113637654A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202111145733.0
申请日：2021-09-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组磷脂酶D突变体及其在合成磷脂酰丝氨酸中的应用，属于生物工程技术领域。本发明先通过构建重组磷脂酶，所述重组磷脂酶是在来源于穗产色链霉菌的磷脂酶的基础上，在PLD的C端去掉信号肽并通过连接肽加上标签MBP获得的，所述重组磷脂酶突变体，是将重组磷脂酶的第379位、第169位、第185位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到的。本发明的重组磷脂酶突变体表现出较高的转磷脂酰活性，磷脂酰胆碱的转化率可达85.8％，磷脂酰丝氨酸产率可达72.12％，磷脂酰丝氨酸的产量可以达到57.69g/L。采用本发明的方法，提高了单位催化剂的生产能力和催化剂的反应效率，降低了反应的成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105400711A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201511018190.0
申请日：2015-12-30
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/93 , C07K14/38 , C12N9/0006 , C12P7/46 , C12Y101/01037 , C12Y604/01001
Abstract: 本发明的公开了一株产L-苹果酸的酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于发酵工程领域。本发明在高产丙酮酸的菌株S.cerevisiae tTAMΔura3Δtrp1中过量游离表达源于Aspergillus flavus ATCC13697的丙酮酸羧化酶(Afpyc)、苹果酸脱氢酶(Afmdh)和苹果酸转运蛋白(Afmae)基因，构建了苹果酸积累路径，获得菌株W1101。上述菌株用于发酵生产L-苹果酸，发酵84h，其苹果酸产量为27.3g/L，而原始出发菌株不积累苹果酸，这将高产L-苹果酸菌株黄曲霉的代谢路径成功应用于酿酒酵母，为高产L-苹果酸菌株的构建提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN118546968A
公开(公告)日：2024-08-27
申请号：CN202410746843.X
申请日：2024-06-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了用于大肠杆菌快速诱变和响应对羟基苯甲酸浓度的质粒，属于生物化工技术领域。本发明通过向质粒中引入脱氨酶、E.coli RNA聚合酶的α亚基以及来源于枯草芽孢杆菌噬菌体的尿嘧啶‑DNA糖基化酶抑制剂，获得了具有快速诱变能力的重组质粒。在此基础上，本发明进一步引入能有效响应对羟基苯甲酸浓度的表达元件，可用于对羟基苯甲酸高产菌株的筛选。
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公开(公告)号：CN118421492A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410675664.1
申请日：2024-05-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，特别是涉及一种基于中介体工程提升酿酒酵母高渗胁迫耐受能力的方法，本发明提供的工程菌BY4741‑Yeplac181‑med3不影响菌株的正常生产，并且可以耐受1.2M NaCl，能够使得在该浓度下的生物量较野生型菌株显著增加11.8％，并且能够使高渗胁迫下酵母的生长速率较野生型菌株显著增加32％，有利于提高酵母发酵产品的产量。
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公开(公告)号：CN118086161A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410218323.1
申请日：2024-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株产L‑酪氨酸的大肠杆菌及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过理性代谢工程改造获得L‑酪氨酸的重组菌株，在E.coli SA07基础上，通过回补表达aroK、aroL和tyrAfbr(M53I/A354V)，敲除全局调节因子基因tyrR，pheA，trpD，tyrP，发酵罐发酵L‑酪氨酸产量达到45.8g/L；利用中等强度启动子过表达DNA结合转录双调节因子基因marA提高了菌株的存活率，经过5L发酵罐发酵48h，酪氨酸产量可以达到65.9g/L，葡萄糖得率为21.9％，死亡率降低至43.5％。本发明发酵生产酪氨酸的方法工艺操作简单易行、性能稳定，适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN117844838A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202410068573.1
申请日：2024-01-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株高产L‑苯丙氨酸的菌株构建及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过分子改造获得耐受高浓度L‑苯丙氨酸的重组菌株E.coli PHE，通过向菌株E.coli JNYPQ导入两个重组质粒：pEM‑marA‑aroA‑aroD‑tyrB和pACYC177‑CI‑aroF‑pheAfbr‑yddG，既提高了L‑苯丙氨酸的产量又增强了菌体活性。经过5L发酵罐发酵48h，L‑苯丙氨酸产量可以达到89g/L，发酵终点死亡率为32％，本发明所得菌株产L‑苯丙氨酸潜力巨大，且发酵生产L‑苯丙氨酸的方法工艺操作简单易行、培养基成本低廉，适用于工业化生产。
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