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公开(公告)号:CN119639709A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311195956.7
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT v6突变体,该逆转录酶UCRT v6突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型逆转录酶UCRT v6相比,突变体在65℃下半衰期更长;三突变体效果更好,其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT v6的5倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT v6突变体热稳定性更好,在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN119193763A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411334801.1
申请日:2024-09-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量,再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度,最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。
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公开(公告)号:CN118620860A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410723929.0
申请日:2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在不对称合成普拉替尼药物中间体中的应用,该ω‑转氨酶突变体由野生型ω‑转氨酶通过以下任意一种突变方式得到的:第62位色氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为异亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为甲硫氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高,具有实现(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺绿色合成路线工业化的应用前景。
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公开(公告)号:CN116840197A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202210287918.3
申请日:2022-03-23
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种2’‑O‑甲基转移酶活性检测方法、试剂盒及应用。本发明的2’‑O‑甲基转移酶活性检测方法,利用S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸水解酶、腺苷脱氨酶将生成的S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸不可逆地转化为同型半胱氨酸;硫醇特异性荧光分子探针结合同型半胱氨酸后形成的化合物采用特异性结合硫醇基而发射荧光的分子探针来直接测定反应中产生的同型半胱氨酸含量,然后计算出相应的S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸含量,以此测定2’‑O‑甲基转移酶活性;本发明的检测方法具有操作简便,检测快速,准确度高,可实现高通量、自动化检测,无放射性污染等突出优势。
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公开(公告)号:CN120005845A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510481713.2
申请日:2025-04-17
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的辣根过氧化物酶突变体其构建方法及应用,该辣根过氧化物酶突变体通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型辣根过氧化物酶氨基酸序列的第40位组氨酸突变为色氨酸得到。本发明通过定点突变技术将来源于辣根植物的辣根过氧化物酶(PDB:1HCH)氨基酸序列的第40位组氨酸突变为色氨酸,获得的突变体(H40W)催化过氧化氢和ADHP生成试卤灵的活性显著高于野生型,可以看出,本发明公开的辣根过氧化物酶催化ADHP活性高,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN118726295A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410723933.7
申请日:2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的ω‑转氨酶突变体、其构建方法及应用,该ω‑转氨酶突变体是通过将野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列按如下任意一种突变方式得到的:第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为异亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为甲硫氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高、反应条件温和、工艺简单、绿色环保,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118460498A
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202410933065.5
申请日:2024-07-12
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高活性耐热转氨酶突变体及其编码基因、构建方法和应用,该高活性耐热转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型转氨酶MhTA氨基酸序列的第61位色氨酸突变为丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸或缬氨酸得到的。本发明获得的5种突变体(W61A、W61C、W61G和W61V)催化前手性酮的活性显著高于突变前的野生型(简称WT),具体表现为:W61A、W61C、W61G和W61V突变体催化5‑甲氧基‑2‑萘满酮的活性分别是野生型的43.03、192.1、25.87和77.48倍。从催化活性提升效果可以看出,本发明公开的转氨酶突变体具有催化合成罗替戈汀手性中间体的应用潜力。
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公开(公告)号:CN117106855A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202311382378.8
申请日:2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后测定dATP的消耗量,再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点,可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号:CN114606126A
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202210318649.2
申请日:2022-03-29
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供一种超声穿孔真核与原核细胞体外转染转化装置,包括:孔板,设有若干容纳孔;驱动机构;水箱,用以盛放去离子水;孔板底部浸入去离子水内;加热件;至少两不同频率的超声换能器,其设置于孔板下方且其发射端浸入去离子水内;驱动机构驱动孔板在水平面内位移,以使得待测的容纳孔位于相应超声换能器正上方的远场区域内。容纳孔位于超声换能器的声场的远场区域,转染时,超声换能器声场的声强随空间位置的变化较小,声场空间特性稳定,利于保证相对稳定的超声空化强度与超声穿孔效应,且细胞膜可修复性的超声穿孔使得细胞转染效率高,细胞存活率高。超声换能器的发射端置于去离子水内,能够避免直接与细胞悬液接触而带来污染风险。
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公开(公告)号:CN217973229U
公开(公告)日:2022-12-06
申请号:CN202220707800.7
申请日:2022-03-29
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本实用新型提供一种超声穿孔真核与原核细胞体外转染转化装置,包括:孔板,设有若干容纳孔;驱动机构;水箱,用以盛放去离子水;孔板底部浸入去离子水内;加热件;至少两不同频率的超声换能器,其设置于孔板下方且其发射端浸入去离子水内;驱动机构驱动孔板在水平面内位移,以使得待测的容纳孔位于相应超声换能器正上方的远场区域内。容纳孔位于超声换能器的声场的远场区域,转染时,超声换能器声场的声强随空间位置的变化较小,声场空间特性稳定,利于保证相对稳定的超声空化强度与超声穿孔效应,且细胞膜可修复性的超声穿孔使得细胞转染效率高,细胞存活率高。超声换能器的发射端置于去离子水内,能够避免直接与细胞悬液接触而带来污染风险。
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