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公开(公告)号:CN117106855A
公开(公告)日:2023-11-24
申请号:CN202311382378.8
申请日:2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后测定dATP的消耗量,再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点,可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号:CN115927228A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202210736807.6
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:A417V;A417V和T122V;A417V和D229N;A417V和G438D;A417V、T122V和D229N;A417V、T122V和G438D;A417V、D229N和G438D;T122V、D229N、A417V和G438D。本发明提供的L‑赖氨酸氧化酶突变体与野生型L‑赖氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的L‑赖氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑赖氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑赖氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN114480342A
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202111180303.2
申请日:2021-10-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型PET水解酶、重组载体、重组工程菌及其应用,突变型PET水解酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽;(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。本发明的突变型PET水解酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型PET水解酶相比,其单点突变体和组合突变体在60℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的2倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。
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公开(公告)号:CN114480342B
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202111180303.2
申请日:2021-10-11
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型PET水解酶、重组载体、重组工程菌及其应用,突变型PET水解酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有相同功能的多肽;(a2)与SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少90%同源性的多肽。本发明的突变型PET水解酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型PET水解酶相比,其单点突变体和组合突变体在60℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的2倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果。
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公开(公告)号:CN115896053A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202210736810.8
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:D229N;D229N和T122V;D229N和A417V;D229N和G438D;D229N、T122V和A417V;D229N、A417V和G438D;D229N、T122V和G438D;T122V、D229N、A417V和G438D。本发明提供的L‑赖氨酸氧化酶突变体与野生型L‑赖氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的L‑赖氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑赖氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑赖氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN115896052A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202210736790.4
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:G438D;G438D和T122V;G438D和D229N;G438D和A417V;G438D、T122V和D229N;G438D、D229N和A417V;G438D、T122V和A417V;T122V、D229N、A417V和G438D。本发明提供的L‑赖氨酸氧化酶突变体与野生型L‑赖氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的L‑赖氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑赖氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑赖氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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公开(公告)号:CN113249349A
公开(公告)日:2021-08-13
申请号:CN202110690363.2
申请日:2021-06-22
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种突变型醇脱氢酶、重组载体及其制备方法和应用,所述突变型醇脱氢酶是在SEQ ID No.2所示的氨基酸序列上进行突变,突变位点选自T105N、G137S、A165E、S180D中的一种或一种以上的组合。本发明的突变型醇脱氢酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型醇脱氢酶相比,本发明的单点突变体和组合突变体的酶活力均得到了提高;尤其是组合突变体,其活性提高了6倍,表现出单点突变体叠加效果;本发明的突变型醇脱氢酶具有优良的催化活性,能够用于催化醛/酮化合物还原,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN119639709A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202311195956.7
申请日:2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体提供了热稳定性提高的逆转录酶UCRT v6突变体,该逆转录酶UCRT v6突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体,与野生型逆转录酶UCRT v6相比,突变体在65℃下半衰期更长;三突变体效果更好,其半衰期大约是野生型逆转录酶UCRT v6的5倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的逆转录酶UCRT v6突变体热稳定性更好,在较高温度下用于RNA逆转录为cDNA时,表现出较高的热稳定性,具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号:CN119193763A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411334801.1
申请日:2024-09-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量,再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度,最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。
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公开(公告)号:CN115725525A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202210736333.5
申请日:2020-12-30
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:S38R;S38R和G34D;S38R和Y128R;S38R和Q332K;S38R、G34D和Y128R;S38R、Y128R和Q332K;S38R、G34D和Q332K;S38R、G34D、Y128R和Q332K。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。
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