测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法

    公开(公告)号:CN117106855A

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202311382378.8

    申请日:2023-10-24

    Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后测定dATP的消耗量,再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点,可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。

    一种突变体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN115927228A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202210736807.6

    申请日:2020-12-30

    Inventor: 张丽星 陆泽林

    Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:A417V;A417V和T122V;A417V和D229N;A417V和G438D;A417V、T122V和D229N;A417V、T122V和G438D;A417V、D229N和G438D;T122V、D229N、A417V和G438D。本发明提供的L‑赖氨酸氧化酶突变体与野生型L‑赖氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的L‑赖氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑赖氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑赖氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

    一种突变体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN115896053A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202210736810.8

    申请日:2020-12-30

    Inventor: 张丽星 陆泽林

    Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:D229N;D229N和T122V;D229N和A417V;D229N和G438D;D229N、T122V和A417V;D229N、A417V和G438D;D229N、T122V和G438D;T122V、D229N、A417V和G438D。本发明提供的L‑赖氨酸氧化酶突变体与野生型L‑赖氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的L‑赖氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑赖氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑赖氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

    一种突变体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN115896052A

    公开(公告)日:2023-04-04

    申请号:CN202210736790.4

    申请日:2020-12-30

    Inventor: 张丽星 陆泽林

    Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:G438D;G438D和T122V;G438D和D229N;G438D和A417V;G438D、T122V和D229N;G438D、D229N和A417V;G438D、T122V和A417V;T122V、D229N、A417V和G438D。本发明提供的L‑赖氨酸氧化酶突变体与野生型L‑赖氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的L‑赖氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑赖氨酸时,仍然表现出优良的的催化活性,在L‑赖氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

    测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119193763A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202411334801.1

    申请日:2024-09-24

    Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法,该方法为:以环状单链DNA为模板,在含有扩增引物和dATP的反应体系中,以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应,消耗反应体系中的dNTPs;然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量,再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度,最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染,具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。

    一种突变体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN115725525A

    公开(公告)日:2023-03-03

    申请号:CN202210736333.5

    申请日:2020-12-30

    Abstract: 本发明提供了一种突变体,其氨基酸序列为SEQ ID NO.1上发生下列位点的突变:S38R;S38R和G34D;S38R和Y128R;S38R和Q332K;S38R、G34D和Y128R;S38R、Y128R和Q332K;S38R、G34D和Q332K;S38R、G34D、Y128R和Q332K。本发明提供的精氨酸氧化酶突变体与野生型精氨酸氧化酶相比,突变体热稳定性更好。通过本发明所提供的构建方法得到的精氨酸氧化酶突变体热稳定性更好,在较高的温度下氧化L‑精氨酸时,仍然表现出优良的催化活性,在L‑精氨酸生物传感器检测及生物化工等领域具有较高的应用潜力。

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