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公开(公告)号：CN117821560A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202410037274.1
申请日：2024-01-10
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Phi29DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：采用环状双链DNA为模板，在含有扩增引物和dNTPs的反应体系中，以待测Phi29DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dNTPs中的dATP的剩余量，再根据Phi29DNA聚合酶的绝对活性定义，利用公式计算得到Phi29DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有同时测定Phi29DNA聚合酶聚合活性与链置换活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号：CN119639714A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202311196679.1
申请日：2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的UCRT X耐热型逆转录酶突变体，本发明提供的UCRT耐热型逆转录酶突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型UCRT X耐热型逆转录酶相比，突变体在65℃下半衰期更长；双突变体效果更好，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的4倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好，在较高温度下逆转录合成DNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN119639712A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202311196238.1
申请日：2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的UCRT耐热型逆转录酶突变体，突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型UCRT III耐热型逆转录酶相比，突变体在65℃下半衰期更长；双突变体效果更好，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的4倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好，在较高温度下逆转录合成DNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN118064400B
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410469408.7
申请日：2024-04-18
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 , 济南国科医工科技发展有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的S选择性ω‑转氨酶突变体及其构建方法和应用，该S选择性ω‑转氨酶突变体是通过将如SEQ ID NO.1所示的野生型ω‑转氨酶TbTA氨基酸序列的第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸或组氨酸得到的。本发明获得的突变体TbTA‑I263A、TbTA‑I263G催化苯乙酮的酶活相较于野生型提升67.83倍和61.26倍，热稳定性与野生型接近或更好；突变体TbTA‑I263C、TbTA‑I263M、TbTA‑I263V、TbTA‑I263F和TbTA‑I263H酶活分别提升11.85倍、8.76倍、3.56倍、3.49倍和2.55倍。
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公开(公告)号：CN117106855B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311382378.8
申请日：2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119193763A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411334801.1
申请日：2024-09-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种测定Bst DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Bst DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后根据预先构建的表征dATP的浓度与萤光值之间关系的标准曲线f1计算dATP的消耗量，再通过预先构建的表征Bst DNA聚合酶浓度与dATP消耗量之间关系的标准曲线f2计算得到Bst DNA聚合酶浓度，最后根据Bst DNA聚合酶的绝对活性定义计算得到待测Bst DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有测定Bst DNA聚合酶聚合活性、绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点。
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公开(公告)号：CN118620860A
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202410723929.0
申请日：2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种ω‑转氨酶突变体及其在不对称合成普拉替尼药物中间体中的应用，该ω‑转氨酶突变体由野生型ω‑转氨酶通过以下任意一种突变方式得到的：第62位色氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为异亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为亮氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第62位色氨酸突变为甲硫氨酸且第263位异亮氨酸突变为甘氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高，具有实现(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺绿色合成路线工业化的应用前景。
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公开(公告)号：CN118726295A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202410723933.7
申请日：2024-06-05
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的ω‑转氨酶突变体、其构建方法及应用，该ω‑转氨酶突变体是通过将野生型ω‑转氨酶的氨基酸序列按如下任意一种突变方式得到的：第263位异亮氨酸突变为丙氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为异亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为亮氨酸、第263位异亮氨酸突变为甘氨酸且第62位色氨酸突变为甲硫氨酸。本发明公开的转氨酶突变体催化合成(S)‑1‑(6‑(4‑氟‑1H‑吡唑‑1‑甲基)吡啶‑3‑甲基)乙胺的转化率高、立体选择性高、反应条件温和、工艺简单、绿色环保，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN117106855A
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202311382378.8
申请日：2023-10-24
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种测定Taq DNA聚合酶绝对活性的方法，该方法为：以环状单链DNA为模板，在含有扩增引物和dATP的反应体系中，以待测Taq DNA聚合酶引发延伸复制反应，消耗反应体系中的dNTPs；然后测定dATP的消耗量，再根据预先构建的表征Taq DNA聚合酶的绝对活性与dATP消耗量之间关系的标准曲线f1计算得到Taq DNA聚合酶的绝对活性。本发明的方法无放射性污染，具有绝对定活、操作简便、快速灵敏、成本低廉等优点，可用于高通量、自动化的聚合酶活性筛选。
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公开(公告)号：CN119639710A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202311195991.9
申请日：2023-09-15
Applicant: 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体提供了热稳定性提高的UCRT VI耐热型逆转录酶突变体，这种突变体包括4种单点突变体、6种双突变体、4种三突变体，与野生型UCRT VI耐热型逆转录酶相比，突变体在65℃下半衰期更长；双突变体效果更好，其半衰期大约是野生型DNA聚合酶的3倍。本发明还提供了包含该突变体的基因工程菌。通过本发明所提供的构建方法得到的UCRT耐热型逆转录酶突变体热稳定性更好，在较高温度下逆转录合成DNA时，表现出较高的热稳定性，具有较大的应用潜力。
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