一种高效催化制备生物柴油用新型纤维生物基固定化全细胞催化剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN104818267A

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201510172576.0

    申请日:2015-04-14

    CPC classification number: Y02P20/588

    Abstract: 本发明公开了一种能够高效催化制备生物柴油的新型纤维生物基材料固定化全细胞催化剂及其制备方法, 所述的全细胞催化剂通过如下步骤制备:产脂肪酶真菌孢子悬浮液的制备;固定化载体的预处理;固定化全细胞生物催化剂的制备;固定化全细胞生物催化剂的交联处理。本方法的固定化全细胞生物催化剂具有制备方法简单、固定效果好和成本低等优点,采用本方法固定化全细胞生物催化剂催化植物油甲酯化催化制备生物柴油,催化剂重复使用6次,脂肪酸甲酯得率稳定在82%以上,且反应条件温和,甲醇添加量低,原料适用性广,使得该工艺更具有经济竞争性。

    一种米根霉脂肪酶的表面展示系统及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102876594B

    公开(公告)日:2015-05-06

    申请号:CN201210333817.1

    申请日:2012-09-11

    Inventor: 王飞 王烨 李迅

    Abstract: 本发明公开了一种米根霉脂肪酶的表面展示系统及其制备方法和应用。表面展示系统将米根霉脂肪酶ProROL基因连接于锚定蛋白Pir1p基因的C端,通过表达菌株KM71H的正常分泌表达,以Pir1p的N端重复序列为锚定区域,将融合蛋白通过共价键方式固定于毕赤酵母KM71H菌株表面。本发明运用基因融合方法,将米根霉脂肪酶基因与成熟锚定蛋白Pir1p的C端融合,并将基因mpir1插入含有不同启动子pAOX1、pGAP的载体中,获得重组质粒AOX-mPir1、GAP-mPir1,在毕赤酵母KM71H上实现表面展示,并得到高效表达。与pAOX1启动子相比,pGAP启动子不需进行碳源转换,操作简便,诱导过程中不需添加甲醇,减少了甲醇对菌体生长的毒副作用,且最高酶活为614.5 U/L(180.74 [细胞干重]),高于pAOX1为启动子的酵母菌株。具有很好的实用性,能产生很好的经济效益和社会效应。

    一种制备生物柴油的方法及其使用的复合酶

    公开(公告)号:CN102911701A

    公开(公告)日:2013-02-06

    申请号:CN201210433498.1

    申请日:2012-11-02

    CPC classification number: Y02E50/13 Y02P30/20

    Abstract: 本发明公开了一种制备生物柴油的方法及其使用的复合酶,该方法:在反应容器中,加入短链醇、油脂、水和复合酶,控温30-50℃,反应48-72h,制得生物柴油;其中,短链醇与油脂摩尔比为3~5:1,水的用量为油脂重量的40~100%,复合酶用量为4-22U/g大豆油。该方法不需要加入任何有机溶剂,对环境友好,利用重组菌表达复合酶,不需要购买商业酶,采用复合脂肪酶协同催化,克服单一脂肪酶的底物专一性,提高了酶法制备生物柴油的转酯效率,产品易于分离,且使用复合脂肪酶催化的方法,所需酶量较单一脂肪酶的酶用量减少50%以上,生物柴油中的有效成分即脂肪酸甲酯的得率为98%,从而大大降低了生产成本。具有很好工业化前景。

    一种米根霉脂肪酶的表面展示系统及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN102876594A

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201210333817.1

    申请日:2012-09-11

    Inventor: 王飞 王烨 李迅

    Abstract: 本发明公开了一种米根霉脂肪酶的表面展示系统及其制备方法和应用。表面展示系统将米根霉脂肪酶ProROL基因连接于锚定蛋白Pir1p基因的C端,通过表达菌株KM71H的正常分泌表达,以Pir1p的N端重复序列为锚定区域,将融合蛋白通过共价键方式固定于毕赤酵母KM71H菌株表面。本发明运用基因融合方法,将米根霉脂肪酶基因与成熟锚定蛋白Pir1p的C端融合,并将基因mpir1插入含有不同启动子pAOX1、pGAP的载体中,获得重组质粒AOX-mPir1、GAP-mPir1,在毕赤酵母KM71H上实现表面展示,并得到高效表达。与pAOX1启动子相比,pGAP启动子不需进行碳源转换,操作简便,诱导过程中不需添加甲醇,减少了甲醇对菌体生长的毒副作用,且最高酶活为614.5U/L(180.74[细胞干重]),高于pAOX1为启动子的酵母菌株。具有很好的实用性,能产生很好的经济效益和社会效应。

    一种耐高温阿拉伯多糖酶及其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN102864131A

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201210333857.6

    申请日:2012-09-11

    Abstract: 本发明公开了一种耐高温阿拉伯多糖酶及其编码基因和应用,该阿拉伯多糖酶的氨基酸序列如SEQNO:1所示。该阿拉伯多糖酶具有极强的耐热性能和偏中性pH条件下高活性的特性。在75℃、pH为6.5的条件下酶活性最高,比酶活达到16.7U/mg;该蛋白酶在温度为60℃-85℃、pH为6.0-8.0的范围内,均具有较高的酶活,在75℃的反应体系中,保温2h酶活性保持不变。这些特性使得本发明得到的阿拉伯多糖酶比现有阿拉伯多糖酶具有更大的优越性,适用于75℃以上高温、偏中性pH条件下水果、蔬菜及半纤维素中阿拉伯多糖的降解,具有潜在的工业应用价值。

    一种具有便于清理结构的地铁施工排水槽

    公开(公告)号:CN214940849U

    公开(公告)日:2021-11-30

    申请号:CN202120071225.1

    申请日:2021-01-12

    Abstract: 本实用新型公开了一种具有便于清理结构的地铁施工排水槽,包括长条状的排水槽框,所述排水槽框的内部设置有条形槽,位于所述条形槽的内部间隔等距设置有若干个排水柱管,排水槽框的外侧可拆式连接有清理结构,所述清理结构包括有支架框,支架框的底部设置有动力电机,所述动力电机的输出端连接有清理座箱,所述清理座箱的内部设置有风机,所述风机的输出端连接有吹风管,所述支架框的两端对称设置有扣板,所述扣板的外侧滑动连接有撑杆,位于所述排水槽框的外端对称设置有导轨板。本实用新型可使用排水槽框内部的排水柱管进行排水,同时可配合安装清理结构,使用清理结构上的吹风管,可对排水柱管进行吹风清理内部污垢,防止淤堵,较为实用。

    一种采用L型支撑与拉森钢板桩组合的支护结构

    公开(公告)号:CN220132917U

    公开(公告)日:2023-12-05

    申请号:CN202122903022.7

    申请日:2021-11-24

    Abstract: 本实用新型涉及一种采用L型支撑与拉森钢板桩组合的支护结构,主要包括拉森钢板桩(1)、外侧L型支撑(3)和内侧L型支撑(6),若干个拉森钢板桩(1)垂直插设于地面,合围成基坑护围(2),所述基坑护围(2)为正方形或长方形;基坑护围(2)的内外侧四个角分别布置四个外侧L型支撑(3)和内侧L型支撑(6),外侧L型支撑(3)上下部均留有靠内侧半圆形孔洞(5),内侧L型支撑(6)上下部均留有靠外侧半圆形孔洞(7),均用来插入工字钢(4),且工字钢(4)焊接在基坑护围(2)上,然后在缝隙中填充高强度的水泥砂浆;本实用新型实现了外侧L型支撑(3)和内侧L型支撑(6)与拉森钢板桩(1)组合的支护方法,提高了基坑护围(2)的稳定性和安全性。

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