一种耐热α-L-鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用

    公开(公告)号:CN117187216B

    公开(公告)日:2025-04-08

    申请号:CN202311263540.4

    申请日:2023-09-27

    Abstract: 本发明公开了一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶及其耐糖突变体和应用,属于基因工程及酶工程技术领域。本发明从Dictyoglomus thermophilum DSM 3960基因组中克隆得到一种耐热α‑L‑鼠李糖苷酶基因,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,与现有技术相比,本发明所提供的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha具有优良的耐热性能,对耐热的α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha进行耐糖关键位点突变,获得的新型α‑L‑鼠李糖苷酶DthRha耐糖突变体,其耐糖系数提高了2.3倍以上,该突变体能够特异性水解淫羊藿苷的R2位上通过α‑1糖苷键连接的鼠李糖,能够利用突变体高效转化淫羊藿苷生成淫羊藿次苷I。

    一种生物催化转化β-紫罗兰醇制备二氢-β-紫罗兰酮的方法

    公开(公告)号:CN118006696A

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202410334539.4

    申请日:2024-03-22

    Abstract: 本发明公开了一种生物催化转化β‑紫罗兰醇制备二氢‑β‑紫罗兰酮的方法,属于生物工程技术领域。本发明以β‑紫罗兰醇为底物,加入短链醇脱氢酶NaSDR和烯酸还原酶AaDBR1反应,反应温度为25~60℃,pH为4.0~11.0,反应时间为0.5~3h,得到β‑紫罗兰酮。本发明利用短链醇脱氢酶和烯酸还原酶进行级联反应,建立了以β‑紫罗兰醇为底物体外一锅法生物制备二氢‑β‑紫罗兰酮的工艺,且实现了NADPH的再生和自循环,从而创立了高效、低成本生物合成二氢‑β‑紫罗兰酮的新方法。

    一种白酒饮后舒适度的动物水平综合评价方法

    公开(公告)号:CN117147814A

    公开(公告)日:2023-12-01

    申请号:CN202310856159.2

    申请日:2023-07-13

    Abstract: 本发明公开了一种白酒饮后舒适度的动物水平综合评价方法,该方法以宿醉小鼠的小脑组织乙醛脱氢酶的酶活、宿醉小鼠的海马体中5‑羟色胺含量、宿醉小鼠的脑组织小胶质细胞数量、宿醉小鼠的血清中FGF21蛋白含量、宿醉小鼠的肝组织过氧化氢酶的酶活、肝组织丙二醛的含量、肝组织TNF‑α的含量、肝组织谷丙转氨酶的酶活、肝组织乙醛脱氢酶的酶活作为指标。本发明建立了白酒饮酒后舒适度在动物小鼠水平的评价方法。利用适宜的统计分析方法获得饮后舒适度综合分值来评价产品舒适度,形成了一套比较科学、全面、稳定、可靠的白酒饮后舒适度的动物水平综合评价方法。

    嗜热木糖苷酶的氨基酸突变体及其应用

    公开(公告)号:CN111117988B

    公开(公告)日:2022-10-14

    申请号:CN202010059242.3

    申请日:2020-01-18

    Abstract: 嗜热木糖苷酶的氨基酸突变体及其应用。本发明突变了来源于嗜热网球菌(Dictyoglomus thermophilum)DSM 3960 GH 39家族的β‑木糖苷酶,并利用β‑木糖苷酶多位点突变体特异性水解三七皂苷R1生成人参皂苷Rg1。所述多位点突变体含有2个突变位点,其中HIS284分别突变为ASP和ALA,突变体使得该β‑木糖苷酶耐糖率分别提高了1.35和1.09倍,其Ki系数分别达到了4.6 mol/L和3.7 mol/L;CYS202突变为LEU和PHE,其酶活分别提高了3.28和2.97倍。

    一种碳苷黄酮-山萘酚8-C-葡萄糖苷的制备方法

    公开(公告)号:CN114891709A

    公开(公告)日:2022-08-12

    申请号:CN202210591529.X

    申请日:2022-05-27

    Abstract: 本发明公开了一种碳苷黄酮‑山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的制备方法,以构建的重组菌为基础,通过转化策略的调整及转化条件的优化,抑制了山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的降解,大幅度提高了重组菌产山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的产量,山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的产量达到16.6g/L,底物的摩尔转化率达到94.87%。在此基础上,通过大孔树脂的筛选和纯化体系的优化,实现了山萘酚8‑C‑葡萄糖苷的高效制备。

    β-葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用

    公开(公告)号:CN107164436B

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN201710333064.7

    申请日:2017-05-12

    Abstract: β‑葡萄糖苷酶在转化淫羊藿总黄酮制备宝霍苷I中的应用。该方法是利用一种特异的β‑葡萄糖苷酶定向转化淫羊藿总黄酮,使淫羊藿总黄酮中含量丰富的多个组分都转化为宝霍苷I。本发明筛选获得的一种β‑葡萄糖苷酶,不仅能高效地酶解淫羊藿总黄酮中富含的淫羊藿苷、朝霍定A、箭藿苷A制得宝霍苷I,而且能特异地将朝霍定B和箭藿苷B制得宝霍苷I。本发明酶使用成本低,只需一种酶;总黄酮的转化效率高,摩尔转化率大于95%。而且所制备的宝霍苷I对乳腺癌、肝癌、结肠癌、肺癌等肿瘤增殖的抑制作用等方面的药理学活性显著高于淫羊藿总黄酮中其它的主要淫羊藿苷。

    一种用于液液微萃脱除银杏叶粗提物中银杏酚酸的疏水深共熔溶剂及其制备方法和脱除方法

    公开(公告)号:CN111359260A

    公开(公告)日:2020-07-03

    申请号:CN202010238385.0

    申请日:2020-03-30

    Abstract: 本发明公开了一种用于液液微萃脱除银杏叶粗提物中银杏酚酸的疏水深共熔溶剂及其制备方法和脱除方法,其中疏水深共熔溶剂由薄荷醇、己醇和月桂酸按摩尔比1:0.9:0.1~1:0.4:0.6制备而成。本发明疏水深共熔溶剂制备简单、快速;氢键稳定,流动性好,是绿色溶剂,具有易生物降解、不污染环境、生物相容性高等特点;采用本发明制备的疏水深共熔溶剂液液微萃脱除银杏叶粗提物中银杏酚酸的方法可以将银杏叶粗提物中的银杏酚酸含量降低到5ppm以下,同时保留了银杏叶粗提物中银杏黄酮类和萜内酯类等功能成分的含量,整个液液微萃脱除方法操作简便、快捷、安全,脱除效率高,成本低,而且对环境和人体不会造成危害。

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