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公开(公告)号：CN112250651B
公开(公告)日：2023-08-22
申请号：CN202011266567.5
申请日：2020-11-12
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07D311/18 , A61P35/00 , A61K31/37
Abstract: 本发明公开了一种红豆杉枝叶苯丙素类化合物及其提取分离方法和应用，属于苯丙素类化合物提取分离技术领域。本发明从红豆杉枝叶中提取分离制备了一种新的苯丙素类化合物Pu1，该方法操作简单，生产成本低，产率高。以MTT法检测提取分离的苯丙素类化合物Pu1的抗肿瘤活性，抗肿瘤活性选用人乳腺癌、人宫颈癌和人肝癌三种癌细胞。结果显示Pu1抑制三种癌细胞活性的IC50值分别为75.7μmol·L‑1、54.7μmol·L‑1和33.8μmol.L‑1，对照样依托泊苷的IC50值分别为4.8μmol·L‑1、7.5μmol·L‑1和5.9μmol·L‑1，表明苯丙素类类化合物Pu1具有一定的抗肿瘤作用。
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公开(公告)号：CN110423742B
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN201910698944.3
申请日：2019-07-31
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法，构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒；将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞，获得相应的基因工程菌株；将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养，利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶；在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4；将获得的磁性铁蛋白与酶混合，通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用，可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合，与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比，避免了酶活性中心的破坏，明显提高了表面展示酶的效果和酶活，也大大降低了成本。
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公开(公告)号：CN114533698A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210137407.3
申请日：2022-02-15
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K9/51 , A61K31/337 , A61K47/42 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒的制备方法，包括如下步骤：1)利用化学偶联法制备修饰了D型肿瘤穿透肽的铁蛋白；2)在特定离子强度条件下，利用温度法在步骤1)所得的铁蛋白内负载药物，制得铁蛋白载药纳米粒。本发明制得的修饰了肿瘤穿透肽的铁蛋白载药纳米粒，具有较强的肿瘤穿透能力以及肿瘤细胞生长抑制作用，且D型RGERPPR肽修饰的铁蛋白‑紫杉醇载药纳米粒的效果最好，为后续药物靶向穿透至肿瘤细胞的治疗提供了良好的载药模型，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114134828A
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN202010918496.6
申请日：2020-09-03
Applicant: 南京林业大学
IPC: E01D24/00
Abstract: 本发明涉及桥梁拆除施工技术领域，具体涉及一种快速拆除桁架拱桥上部结构的方法，包括以下步骤：(A)拆除桥面附属结构包括栏杆以及人行道板；(B)设置临时支撑系统(a)；(C)拆除桥面铺装以及微弯板；(D)划分拱片，切割分离各个拱片；(E)吊运拱片至指定处。本发明中，优化了传统桁架拱桥结构的拆除的施工顺序，通过设置临时支撑系统(a)，避免了桁架拱桥上部结构拆除过程中可能出现拱片侧向倾覆的情况，保证了拆除过程中拱片的稳定性，确保了施工过程的安全，同时也优化了施工工序，缩短了施工工期，提高了施工效率，降低了施工成本，可以在实际工程中推广。
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公开(公告)号：CN113501746A
公开(公告)日：2021-10-15
申请号：CN202110682423.6
申请日：2021-06-21
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种大孔树脂在分离香叶醇中的应用及提取分离香叶醇的方法，所述大孔树脂为XAD4大孔树脂，利用大孔树脂从发酵液中提取分离香叶醇的方法，包括，在全细胞催化合成香叶醇的过程中，在发酵液中加入有机溶剂，离心，得到预处理液；将预处理的XAD4大孔树脂加入到预处理液中，吸附处理；将吸附了香叶醇的大孔树脂收集，加入到洗脱液中进行洗脱，得到香叶醇洗脱液；将洗脱液浓缩，干燥，得到香叶醇。本发明从全细胞催化的发酵液中提取纯化获得香叶醇，克服了发酵产物香叶醇原位提取分离的问题，同时具有工艺简单、操作简单、环境友好和纯化效率高等特点，获得的香叶醇纯度高，该方法适用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN110904134B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201911292338.8
申请日：2019-12-16
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种表达芳樟醇合成酶的融合基因及其应用，涉及代谢工程菌技术领域，所述融合基因自5’端至3’端依次包括启动子‑核糖体结合位点RBS‑融合标签‑芳樟醇合成酶基因bLIS。本发明利用所述融合基因构建了多种不同的重组表达载体，并转化具有GPP合成能力的大肠杆菌，构建工程菌。经验证，所述融合基因、重组表达载体可显著提高芳樟醇合成酶的表达量和可溶性表达，将改造的重组表达载体转入具有GPP合成能力的大肠杆菌重组菌，可有效提高生产菌的芳樟醇产量，在芳樟醇的生物合成过程中具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN108704002B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201810643455.3
申请日：2018-06-21
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明属于植物提取技术领域，公开了一种人工林树皮活性成分酶处理与超声波辅助耦合提取方法，将人工林树皮粉碎料按照料液比1:6～14与纤维素复合酶水溶液混合，在40～70℃水浴条件下超声处理30～60min，过滤后得到滤渣和滤液；将得到的滤渣按照料液比1:6～14与体积百分含量为40％～70％乙醇混合，在40～60℃下超声提取40～70min，过滤后取滤液；合并两次得到的滤液。本发明的人工林树皮活性成分酶处理与超声辅助耦合提取，提取的活性成分得率最高，比传统有机溶剂提取方法高25％以上，是一种低温、绿色、高效的提取方法。
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公开(公告)号：CN108276591B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201810172194.1
申请日：2018-03-01
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明在15～30℃条件下，将纤维素原料在水中浸泡，然后干燥，得到润胀后的纤维素；再将纤维素与极性有机溶剂混合，得到纤维素分散液；最后将纤维素分散液与四烷基季铵碱在15～30℃条件下混合，得到纤维素溶液,所述混合在搅拌下进行，所述搅拌的速度为200～400r/min，所述搅拌的时间为2～6h。本发明提供的制备方法是将纤维素在15～30℃条件下直接溶解，能够有效抑制高温条件导致的纤维素降解；且本发明所述纤维素溶液的再生纤维素得率≥80％，说明本发明提供的方法能够对纤维素进行高效溶解。
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公开(公告)号：CN108653395B
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201810644321.3
申请日：2018-06-21
Applicant: 南京林业大学
IPC: A61K36/61 , A61K36/76 , A61K36/15 , A61K129/00
Abstract: 本发明属于植物提取技术领域，公开了一种人工林树皮活性成分耦合提取方法，将人工林树皮粉碎料按照料液比1:8～16与纤维素复合酶水溶液混合，在40～70℃下水浴处理30～60min，过滤后得到滤渣和滤液；将得到的滤渣按照料液比1:6～14与体积百分含量为40％～70％乙醇混合，在40～60℃下超声提取40～80min，过滤后取滤液；合并前两次得到的滤液。本发明的酶处理与超声辅助耦合提取，提取的活性成分得率高，比传统有机溶剂提取方法高20％以上，是一种低温、绿色、高效的提取方法。
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公开(公告)号：CN111948589A
公开(公告)日：2020-11-17
申请号：CN201910416453.5
申请日：2019-05-17
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种蔗糖密度梯度离心分离铁蛋白纳米颗粒的方法。该方法的具体步骤为：首先将蔗糖溶于缓冲液中，配制质量百分比浓度分别为20％，35％，50％，65％的蔗糖溶液，采用层铺法，依次缓慢滴加一定量的蔗糖溶液；然后将装载四氧化三铁后的铁蛋白样品缓慢加到蔗糖梯度溶液中；在4℃，50,000rpm，5h的条件下，进行水平离心；最后将混合液缓慢等分吸出，利用紫外分光光度计分别在280nm和410nm波长下分别测定所在蔗糖溶液层的蛋白质含量和铁含量。最终分离得到在铁蛋白空腔内装载了四氧化三铁的铁蛋白，实现了铁蛋白空腔内是否装载四氧化三铁的分离，为分离铁蛋白提供除磁场分离以外的另一种简便可行的方法。
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