公开(公告)号：CN110423742B

公开(公告)日：2022-10-18

申请号：CN201910698944.3

申请日：2019-07-31

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 张瑜 ,  董亦馨 ,  周金花 ,  戚岚岚 ,  李迅 ,  王飞

IPC: C12N11/14 ,  C12N15/70 ,  C12N9/42

Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法，构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒；将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞，获得相应的基因工程菌株；将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养，利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶；在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4；将获得的磁性铁蛋白与酶混合，通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用，可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合，与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比，避免了酶活性中心的破坏，明显提高了表面展示酶的效果和酶活，也大大降低了成本。

公开(公告)号：CN111939273A

公开(公告)日：2020-11-17

申请号：CN201910416454.X

申请日：2019-05-17

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 张瑜 ,  马原蒙 ,  李瑞珂 ,  戚岚岚 ,  王飞 ,  李迅

IPC: A61K49/00

Abstract: 本发明公开一种以铁蛋白为载体制备具有肿瘤靶向作用荧光探针的方法，所述铁蛋白载体包含人重链铁蛋白。将笼状结构的人重链铁蛋白解聚为单体状态；向解聚的人重链铁蛋白中加入具有荧光性质的香豆素-6使其与铁蛋白结合；将结合有香豆素-6的所述解聚人重链铁蛋白重新聚合为纳米颗粒。本发明所制备的纳米探针具有生物相容性好，可特异性地在过表达转铁蛋白受体1(TfR1)的肿瘤细胞表面富集，利用香豆素-6的荧光特性为给药系统的体内示踪提供一种高效的检测方法。

公开(公告)号：CN110423742A

公开(公告)日：2019-11-08

申请号：CN201910698944.3

申请日：2019-07-31

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 张瑜 ,  董亦馨 ,  周金花 ,  戚岚岚 ,  李迅 ,  王飞

IPC: C12N11/14 ,  C12N15/70 ,  C12N9/42

Abstract: 一种通过磁性铁蛋白表面展示实现酶固定的方法，构建含Ecoil短肽的铁蛋白重组质粒和含Kcoil短肽的酶重组质粒；将构建好的重组质粒转化至大肠杆菌表达菌株TOP10感受态细胞，获得相应的基因工程菌株；将基因工程菌接种于LB培养基中诱导培养，利用亲和层析和体积排阻色谱得到纯化的铁蛋白与酶；在纯化的铁蛋白内部空腔中合成Fe3O4；将获得的磁性铁蛋白与酶混合，通过Ecoil螺旋肽和Kcoil螺旋肽的相互作用，可形成磁性铁蛋白固定化酶。本发明采用基因融合，与以传统共价键的方式实现酶的固定化相比，避免了酶活性中心的破坏，明显提高了表面展示酶的效果和酶活，也大大降低了成本。