一株高耐硒灵芝突变体菌株及其应用

    公开(公告)号:CN114214208A

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202111524579.8

    申请日:2021-12-14

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一株高耐硒灵芝突变体菌株及其应用,属于真菌育种技术领域。其在富硒地区采集灵芝菌子实体,获得菌丝体培养物,收集其孢子后进行诱变育种,在高硒浓度培养基中进行富集培养,获得耐硒能力提高的灵芝菌丝体。所获得的耐硒能力提高的灵芝突变体命名为Ganoderma sp.ML2613,该突变体的菌丝体培养物已保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M20211217。与原菌株菌丝体培养物相比,突变体Ganoderma sp.ML2613可以在硒含量为1600mg/L的培养液中维持正常生长,而原菌株的菌丝体在同样的发酵培养液中生长极其缓慢。突变体Ganoderma sp.ML2613更适合在高硒含量环境中培养,具有获得富硒菌丝体的潜力,也有利于在高硒环境中进行灵芝的野外栽培。

    一种产西柏三烯一醇的酿酒酵母及应用

    公开(公告)号:CN113416662A

    公开(公告)日:2021-09-21

    申请号:CN202110621208.5

    申请日:2021-06-03

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产西柏三烯一醇的酿酒酵母及应用,属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过将关键酶西柏三烯醇合成酶基因、香叶基香叶基焦磷酸(GGPP)合酶基因、法尼基焦磷酸合成酶(ERG20)基因整合至酿酒酵母菌株基因组上,并利用启动子Phxt1替换角鲨烯合成酶(ERG9)原来的启动子来敲低竞争途径麦角固醇途径,还将含有关键酶基因ggpp基因和cbts基因的游离质粒转入该酿酒酵母中,进一步提高了西柏三烯一醇产量。本发明还采用线粒体区室化方法,将GGPP合酶和西柏三烯醇合成酶定位到线粒体中,使西柏三烯一醇产量提高至283.98μg/L,在5L发酵罐发酵水平,西柏三烯一醇产量可达15mg/L。

    产西柏三烯一醇的酿酒酵母的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN113388536A

    公开(公告)日:2021-09-14

    申请号:CN202110621179.2

    申请日:2021-06-03

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了产西柏三烯一醇的酿酒酵母的构建方法及应用,属于代谢工程和微生物工程领域。本发明通过在酿酒酵母W303‑1A中异源表达西柏三烯一醇合成的2个关键酶香叶基香叶基焦磷酸合酶基因ggpps和西柏三烯醇合酶基因cbts,实现了西柏三烯一醇在酿酒酵母中的从头生产,并进一步通过与西柏三烯醇合酶基因cbts的串连过表达关键酶法尼基焦磷酸合成酶(ERG20),获得的重组菌株的西柏三烯一醇产量显著提高。将上述途径构建至酿酒酵母BY4741中,其西柏三烯一醇的产量提高至对照菌株的3倍。在关键酶法尼基焦磷酸合成酶基因前添加启动子,进一步提高重组酿酒酵母的西柏三烯一醇产量。

    提高枯草芽孢杆菌重组蛋白胞外生产水平的信号肽突变体及应用

    公开(公告)号:CN112409464A

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN202011322536.7

    申请日:2020-11-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高枯草芽孢杆菌重组蛋白胞外生产水平的信号肽突变体及应用,属于基因工程技术领域。本发明通过对信号肽M1(MSDEQKKPE QIHRRDILKWGAMAGAAVA)的N端区域进行定向进化,筛选获得具有高效胞外分泌水平的信号肽突变体文库,通过该突变体文库构建获得系列重组蛋白胞外分泌水平显著提高的重组枯草芽孢杆菌菌株。将获得的正向信号肽突变体进行排列组合复合突变,获得具有高效重组蛋白表达分泌水平的信号肽复合突变体,利用其构建获得具有高效胞外蛋白胞外分泌水平的枯草杆菌杆菌突变株。本发明所筛选获得的信号肽突变体,对于重组蛋白在枯草芽孢杆菌中具有高效的胞外蛋白分泌水平,重组蛋白胞外分泌水平提高了15倍以上。本发明方法对信号肽改造及重组蛋白在宿主中的高效分泌与生产具有重要指导意义。

    一种提高胞内普鲁兰酶提取效率的方法

    公开(公告)号:CN111500561A

    公开(公告)日:2020-08-07

    申请号:CN202010380799.7

    申请日:2020-05-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种提高胞内普鲁兰酶提取效率的方法,属于微生物和酶工程技术领域。本发明采用两种特殊试剂对巴斯德毕赤酵母突变株处理,首先将重组巴斯德毕赤酵母突变体GS115/pPICK-BdP5 WB138与10×试剂D反应,随后在冰水中放置,再加入10×试剂E反应。离心收集细胞后用柠檬酸缓冲液悬浮细胞进行超声波破碎。经过两种试剂处理的细胞经超声波处理6 min就将细胞全部破碎,破碎液中酶活保留在85%以上。使用本发明所提供的方法及专用处理液可以大幅度减少细胞破碎所需要消耗的电力等成本,减少设备占用时间。

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