一种莱茵衣藻工程菌及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118344976A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202410523319.6

    申请日:2024-04-28

    Applicant: 深圳大学

    Abstract: 本发明公开了一种莱茵衣藻工程菌及其制备方法和应用。所述莱茵衣藻工程菌包括表达NAD+亚磷酸脱氢酶的莱茵衣藻。本发明中,构建具备高抗污染能力且能够进行开放式培养的莱茵衣藻工程菌,可作为细胞工厂平台细胞,制备多种产品,例如,进一步表达金合欢烯合酶,获得能够在开放环境中合成金合欢烯的工程藻,并探索其最佳培养条件,提高金合欢烯的产量。这种通过在微藻细胞工厂建立开放培养体系,为藻类的大规模培养提供了新的思路和策略。

    Aida基因在莱茵衣藻对铜离子胁迫耐受性中的应用

    公开(公告)号:CN118272395A

    公开(公告)日:2024-07-02

    申请号:CN202410555238.4

    申请日:2024-05-07

    Abstract: Aida基因在莱茵衣藻对铜离子胁迫耐受性中的应用,Aida基因的核苷酸序列如SEQ ID No 1所示,其编码区的核苷酸序列如SEQ ID No 2所示;Aida基因编码的Aida蛋白质氨基酸序列如SEQ ID No 3所示。本发明突变Aida基因后所获得的莱茵衣藻细胞株,经铜离子生长曲线及吸附效率的测定,发现突变型藻株的生长速率更快、吸附效率更高,且具有较高的铜离子耐受性。本发明为后续深入研究Aida基因如何影响衣藻内部各种氧化应激反应及金属转运、代谢相关蛋白的表达与活性及相关胁迫细胞器功能提供了便利,后期将为莱茵衣藻重金属铜代谢机制的理论研究及重金属生物修复的应用研究奠定坚实的基础。

    基于不同光照下莱茵衣藻的蛋白相互作用分析方法

    公开(公告)号:CN118185981A

    公开(公告)日:2024-06-14

    申请号:CN202211595132.4

    申请日:2022-12-13

    Inventor: 朱昱诺 周敏

    Abstract: 本发明公开了一种基于不同光照下莱茵衣藻的蛋白相互作用分析方法。所述方法将含有向光性目标蛋白和抗性基因Sh Ble的质粒在莱茵衣藻中融合表达,利用博来霉素筛选出阳性克隆株,然后将阳性克隆株在不同光照下大规模培养,最后利用StrepⅡTag亲和柱同时纯化向光性目标蛋白以及与向光性目标蛋白发生相互作用的相关蛋白。本发明方法不需要额外的筛选标记,大大降低了转化株筛选工作量。本发明方法可以扩展到几乎所有莱茵衣藻光致蛋白信号传递通路的分析检测。

    一种基于转基因小球藻制备的重组流感疫苗的制备方法

    公开(公告)号:CN117844643B

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410251404.1

    申请日:2024-03-06

    Abstract: 本发明公开了一种基于转基因小球藻制备的重组流感疫苗的制备方法。属于生物技术领域。本发明将流感毒株甲型H1N1系、甲型H3N2系、乙型Yamagata系和乙型Victoria系的血凝素HA1基因分别与人源IgG1‑Fc基因进行组合,构建成融合基因,再将含有融合基因的小球藻进行高密度发酵、蛋白的提取与纯化,获得融合蛋白。本发明降低了重组流感疫苗的生产成本,提高了外源基因的表达量。将4种流感毒株的HA1基因分别与人源IgG1‑Fc基因整合到小球藻基因组中,证实了串联重组流感血凝素HA1基因可在小球藻中高效表达,证实了融合蛋白具有良好的免疫原性,可激发机体产生高水平的中和抗体,应用前景良好。

    一种利用流式细胞仪筛选转基因微藻的方法

    公开(公告)号:CN118064484A

    公开(公告)日:2024-05-24

    申请号:CN202211436546.2

    申请日:2022-11-16

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 卢山 朱帅旗

    Abstract: 本发明公开了一种利用流式细胞仪筛选转基因微藻的方法,包括以下步骤,步骤S1、构建重组质粒表达载体,该表达载体中含有目的基因、VENUS蛋白的基因系列、抗性基因;步骤S2、通过电击转化法将步骤S1中的重组质粒表达载体转入野生型微藻,并进行培养;步骤S3、用灭菌的接种环将至少两个上述步骤S2中的单克隆微藻进行混合,并将混合后的微藻移入TAP培养基中,进行培养;步骤S4、将步骤S3中混合的单克隆微藻通过流式细胞仪分析;步骤S5、对步骤S4中检测到荧光蛋白信号的混合单克隆微藻中的每个单克隆微藻,进行通过PCR技术检测以及抗原抗体杂交技术检测。具有筛选效率较高的优点。

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