活性型突变酶的制造方法及新型活性型突变酶、以及可溶性化突变蛋白的制造方法

    公开(公告)号:CN107002074A

    公开(公告)日:2017-08-01

    申请号:CN201680002626.3

    申请日:2016-06-10

    摘要: 本发明提供一种包含选定有效的突变导入位置及突变后的氨基酸的手法的方法,其为使在异源表达系统中不作为活性型酶或可溶性蛋白表达或者即便活性型酶表达也很微量的酶作为活性型突变酶或可溶性蛋白进行表达的方法。此外还提供通过该手法获得的新型的活性型突变酶。本发明涉及活性型突变酶或可溶性化突变蛋白的制造方法,其为对失活型酶或不溶性蛋白进行特定,对失活型酶或不溶性蛋白的存在于α螺旋结构部分的亲水性区域的疏水性氨基酸、存在于疏水性区域的亲水性氨基酸进行特定,制备对存在于亲水性区域的疏水性氨基酸、存在于疏水性区域的亲水性氨基酸进行替换而成的氨基酸序列进行编码的基因,或者对失活型酶的氨基酸序列中的序列同源性的保守性相对低的氨基酸进行特定,制备将该氨基酸用保守性比该氨基酸高的氨基酸进行替换而成的氨基酸序列进行编码的基因,在异源表达系统中使该基因表达,获得蛋白,从所得蛋白中选择活性型突变酶或可溶性化突变蛋白。