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公开(公告)号:CN105164274B
公开(公告)日:2018-11-30
申请号:CN201480017650.5
申请日:2014-01-23
申请人: 布兰代斯大学
CPC分类号: C12Q1/701 , C12Q1/6848 , C12Q2525/186 , C12Q2527/107 , C12Q2527/125 , C12Q2527/143 , C12Q2565/101
摘要: 本文提供了用于提高PCR准确度的试剂。
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公开(公告)号:CN108676846A
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201810516447.2
申请日:2018-05-25
申请人: 艾吉泰康生物科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806 , C12N15/10 , C40B50/06
CPC分类号: C12Q1/6806 , C12N15/1093 , C40B50/06 , C12Q2525/191 , C12Q2531/113 , C12Q2525/186
摘要: 本发明公开了一种改良的序列捕获方法,所述方法包括:1)提取DNA,打断;2)将所述打断的DNA的两端与接头连接,所述打断的DNA一端的接头序列远端包括长度6‑8nt的标签序列;3)将所述连接接头的DNA进行Pre‑PCR反应;4)将探针与封闭试剂混合,对所述Pre‑PCR反应进行捕获,所述封闭试剂包括与打断的DNA之外的序列互补的封闭序列,其中所述标签序列处用同样长度的C3间臂封闭;5)杂交捕获后PCR扩增。本发明的桥式封闭设计策略,分别对插入片段的两端的接头序列设计对应的封闭序列,对于中间部分的标签序列采取用C3间臂进行桥式连接,节约成本和简化文库构建过程中的繁琐性。
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公开(公告)号:CN108300765A
公开(公告)日:2018-07-20
申请号:CN201810004450.6
申请日:2013-03-13
申请人: 斯威夫特生物科学公司
发明人: 弗拉基米尔·马卡罗夫 , 劳里·库里哈拉
IPC分类号: C12Q1/6806 , C12Q1/6813
CPC分类号: C12P19/34 , C12N9/1241 , C12Q1/6806 , C12Q1/6855 , C12Q1/6869 , C12Q2521/131 , C12Q2525/186 , C12Q2525/204 , C12Q2537/163
摘要: 本发明涉及用于通过核酸聚合酶对衬底多核苷酸进行大小受控的同聚物加尾的方法和组合物。更具体而言,本发明涉及用于将具有特定长度的尾部添加至衬底多核苷酸的方法和组合物。本发明还涵盖用于将所加尾的衬底固定至固体支持物的方法和组合物。本公开预期衰减子分子是与添加至衬底多核苷酸的尾部序列缔合,并且控制尾部序列至所述衬底多核苷酸的3'末端的所述添加的任何生物分子。添加至所述衬底多核苷酸的序列本文称为尾部序列,或简称尾部,并且将核苷酸添加至衬底多核苷酸的过程本文称为加尾。
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公开(公告)号:CN107858401A
公开(公告)日:2018-03-30
申请号:CN201711050889.4
申请日:2017-10-31
申请人: 重庆邮电大学
IPC分类号: C12Q1/6806
CPC分类号: C12Q1/6806 , C12Q2531/113 , C12Q2521/101 , C12Q2527/107 , C12Q2525/186
摘要: 本发明公开了一种低丰度基因突变的富集方法,本发明方法在PCR反应体系中使用高保真DNA聚合酶和3'末端碱基在基因突变位点上且3'末端被封闭的引物,并加入3'末端被封闭的含所述突变位点的核苷酸单链,通过设置关键变性温度Tc使所述3'末端被封闭的核苷酸单链与突变型序列杂交形成的异源双链DNA解链,但与野生型序列杂交形成的同源双链DNA不能解链,然后引物退火后高保真DNA聚合酶将3'末端被封闭且3'末端碱基错配的引物的配错碱基移除使其继续延伸,从而选择性地从大量野生型序列中扩增低丰度突变序列,使突变序列得以富集。该发明操作简单易行且扩增准确度和灵敏度高,可应用于医学和生物学的诸多领域。
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公开(公告)号:CN107636166A
公开(公告)日:2018-01-26
申请号:CN201680021886.5
申请日:2016-02-14
申请人: 班纳吉·阿吉特·帕特尔
发明人: 班纳吉·阿吉特·帕特尔
IPC分类号: C12Q1/6851
CPC分类号: C12Q1/6851 , C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C12Q2525/155 , C12Q2525/186 , C12Q2525/191 , C12Q2563/159 , C12Q2563/179
摘要: 本文涉及可对核酸进行简化、灵敏和准确定量的方法和组合物。有些方法可以对多个样本的多个靶向核糖核酸进行高度平行测量。其他方法可以对核酸分子的复杂混合物的低丰度核酸变体进行高度敏感测量。
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公开(公告)号:CN104603287B
公开(公告)日:2018-01-19
申请号:CN201380037100.5
申请日:2013-03-11
申请人: 通用医疗公司
发明人: 安东尼·约翰·亚弗拉特 , 李龙飞 , 郑宗立
CPC分类号: C12Q1/6855 , C12Q1/6806 , C12Q1/6874 , C12Q2525/186 , C12Q2535/122 , C12Q2537/159 , C12Q2565/607
摘要: 本文所述的技术针对例如通过在对序列进行测序前富集靶序列来测定寡核苷酸序列的方法。
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公开(公告)号:CN107406882A
公开(公告)日:2017-11-28
申请号:CN201680013462.4
申请日:2016-04-22
申请人: 基纳生物技术有限公司
发明人: A·O·H·尼格伦
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q1/6827 , C12Q1/686 , C12Q2525/186 , C12Q2527/137 , C12Q2535/125 , C12Q2537/143 , C12Q2545/101 , C12Q1/6851 , C12Q2563/107 , C12Q2561/113
摘要: 本文提供了用于检测含有次要核酸物质和一种或多种主要核酸物质的混合物的样品中次要核酸物质是否存在的产品和方法,其中次要核酸物质的量(频率或拷贝数)小于主要核酸物质的量。某些方法包括扩增混合物并用链终止剂和与扩增子特异性杂交的延伸引物延伸所得的扩增子,其中针对主要核酸物质特异性的链终止剂具有小于对于次要核酸物质特异性的链终止剂的浓度。使链终止剂的浓度倾向于相对于主要核酸物质特异性链终止剂有利于对于次要核酸物质特异性的链终止剂的高浓度改善了检测在混合物中以低频率或拷贝数存在的次要核酸物质的检测限(灵敏度)。另外,从主要核酸物质扩增子的延伸产物生成的信号可用作阳性对照并且允许相对于混合物中的主要核酸物质对次要核酸物质进行定量。
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公开(公告)号:CN103266103B
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201310150085.7
申请日:2013-04-26
申请人: 天津精耐特基因生物技术有限公司
CPC分类号: C12N9/1252 , C12P19/34 , C12Q1/68 , C12Q1/6844 , C12Q2521/107 , C12Q2525/121 , C12Q2525/186 , C12Q2565/301
摘要: 本发明提供了用于扩增核糖核酸的方法及分析该方法中RNA模板的方法,开发了一种RNA?PAP的新方法,其可以直接放大RNA模板而无需额外的处理;RNA?PAP为扩增RNA模板带来了一个全新的机理,其中RNA依赖性DNA焦磷酸化反应和RNA依赖性DNA聚合反应是用3'末端阻断性寡核苷酸引物所串联耦合的,由于这种串连耦合,使得RNA?PAP对RNA模板的不匹配性具有高度的选择性,从而提供了高度特异性的RNA模板的扩增;此外,经遗传工程产生的突变体聚合酶具有更高的RNA依赖性DNA焦磷酸化反应和RNA依赖性DNA聚合反应的效率。
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公开(公告)号:CN104145029B
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201280071069.2
申请日:2012-07-03
申请人: SEEGENE株式会社
CPC分类号: C12Q1/6823 , C12Q1/6818 , C12Q2521/319 , C12Q2525/131 , C12Q2525/161 , C12Q2525/186 , C12Q2533/101 , C12Q2563/173 , C12Q2565/1015 , C12Q2565/514
摘要: 本发明涉及利用探测和标记寡核苷酸切割及延伸-依赖性信号传导寡核苷酸杂交(PCE-SH,PTO Cleavage and Extension-Dependent Signaling Oligonucleotide Hybridization)的靶核酸序列的检测。本发明不使用与靶核酸序列杂交来提供靶信号的探针。本发明利用与以靶-依赖性的方式形成的延伸链杂交的探针(信号传导寡核苷酸),将具有人为选择的序列的捕捉和模板化寡核苷酸作为模板合成上述延伸链。
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公开(公告)号:CN105531381A
公开(公告)日:2016-04-27
申请号:CN201480050339.0
申请日:2014-09-10
申请人: 霍夫曼-拉罗奇有限公司
CPC分类号: C12Q1/6806 , C12Q1/6848 , C12Q2521/107 , C12Q2525/173 , C12Q2525/186
摘要: 在RNA分离期间,使用载运体核酸如多聚A-RNA以增加分离的RNA的收率。所述载运体核酸可能产生高分子量产物,其可能干扰后续步骤如逆转录、PCR和凝胶电泳。本发明因此涉及用于逆转录的方法和试剂盒以及封闭性核酸分子用来封闭载运体多聚A-RNA的用途。
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