公开(公告)号：CN117776899A

公开(公告)日：2024-03-29

申请号：CN202311556933.4

申请日：2023-11-21

申请人： 淮北创新生物新材料有限责任公司 ,  江南大学

发明人： 刘立明 ,  罗旭 ,  潘静宇 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  高聪

IPC分类号： C07C51/02 ,  C07C51/42 ,  C07C51/43 ,  C07C51/47 ,  C07C51/487 ,  C07C55/10 ,  C12P7/46 ,  C12N1/00 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种从含有琥珀酸镁的发酵液中纯化琥珀酸的方法，包括以下步骤：对含琥珀酸的发酵液进行菌体自聚集去除菌体，对去除菌体的发酵液进行微滤处理，对得到的发酵液进行超滤处理；对超滤得到的发酵液进行脱色处理，并过滤；将过滤得到的发酵液通过填充有H+形式的阳离子交换树脂；结晶琥珀酸以形成中间晶体，并将中间晶体与发酵液分离，将分离后的发酵液再循环至超滤步骤；回收中间晶体，进行复溶脱色，结晶并离心，将分离后的处理液再循环至结晶步骤，并回收纯化后的琥珀酸。

公开(公告)号：CN114015634B

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202111299764.1

申请日：2021-11-04

申请人： 江南大学 ,  淮北创新生物新材料有限责任公司

发明人： 刘立明 ,  罗旭 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  宋伟

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/90 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。

公开(公告)号：CN114015634A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111299764.1

申请日：2021-11-04

申请人： 江南大学 ,  淮北创新生物新材料有限责任公司

发明人： 刘立明 ,  罗旭 ,  王学明 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  唐文秀 ,  徐祖伟 ,  高聪 ,  郭亮 ,  胡贵鹏 ,  宋伟

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/90 ,  C12N15/53 ,  C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种生物工程技术领域，尤其涉及一种高产琥珀酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。其中，高产琥珀酸的重组大肠杆菌是将编码大肠杆菌中甲酸脱氢酶的基因fdhF替换为来自假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的外膜蛋白调节器OmpR。本发明采用CRISPR‑cas9基因编辑技术将宿主菌FMME‑N‑5中编码甲酸脱氢酶基因fdhF替换为假丝酵母的甲酸脱氢酶基因fdh1，并运用RBS序列和启动子策略上调耐酸胁迫和耐渗透压胁迫的关键外膜蛋白调节器OmpR，所得到的重组大肠杆菌没有抗性，耐渗透压并可高效生产琥珀酸。

公开(公告)号：CN116144516B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202310228686.9

申请日：2023-03-10

申请人： 江南大学

发明人： 刘立明 ,  刘佳 ,  陈修来 ,  高聪 ,  王学明 ,  吴静 ,  宋伟 ,  魏婉清

IPC分类号： C12N1/18 ,  C12P7/46 ,  C12R1/865

摘要： 本发明公开了一株产丁二酸的酿酒酵母及其应用，属于生物工程技术领域。所述酿酒酵母已于2023年2月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2023098，保藏地址为中国武汉，武汉大学。本发明的酿酒酵母FMME‑SuA912，表现出耐受低pH的能力，可以在pH 3.5条件下正常生长并发酵产丁二酸。经发酵罐扩大培养，发酵120h丁二酸产量和产率分别达到了41.8g/L和0.34g/g，具有低pH发酵生产丁二酸的工业化应用潜力。

公开(公告)号：CN116144516A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202310228686.9

申请日：2023-03-10

申请人： 江南大学

发明人： 刘立明 ,  刘佳 ,  陈修来 ,  高聪 ,  王学明 ,  吴静 ,  宋伟 ,  魏婉清

IPC分类号： C12N1/18 ,  C12P7/46 ,  C12R1/865

摘要： 本发明公开了一株产丁二酸的酿酒酵母及其应用，属于生物工程技术领域。所述酿酒酵母已于2023年2月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2023098，保藏地址为中国武汉，武汉大学。本发明的酿酒酵母FMME‑SuA912，表现出耐受低pH的能力，可以在pH 3.5条件下正常生长并发酵产丁二酸。经发酵罐扩大培养，发酵120h丁二酸产量和产率分别达到了41.8g/L和0.34g/g，具有低pH发酵生产丁二酸的工业化应用潜力。

公开(公告)号：CN116676247A

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202310742801.4

申请日：2023-06-21

申请人： 湖南成大生物科技有限公司 ,  江南大学

发明人： 刘立明 ,  潘静宇 ,  王学明 ,  刘喜荣 ,  曾春玲 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  高聪 ,  谢斯思 ,  孟浩 ,  李静

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/113 ,  C12P7/46 ,  C12R1/19

摘要： 本申请涉及一种高产丁二酸的重组大肠杆菌及其构建方法和应用。所述重组大肠杆菌是通过将大肠杆菌中iscS基因的启动子和RBS分别替换为pJ23119和RBS34得到，所述pJ23119和所述RBS34的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本申请采用CRISPR‑cas9基因编辑技术过量表达大肠杆菌iscS基因，通过将重组大肠杆菌中iscS的启动子和RBS分别替换为pJ23119和RBS34，更高表达强度的iscS能够促进硫化氢的产生，有助于维持大肠杆菌在厌氧条件下的细胞生长和存活，同时有利于丁二酸的积累。