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公开(公告)号：CN114908071B
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202210519254.9
申请日：2022-05-12
Applicant: 江南大学 , 枣庄市杰诺生物酶有限公司
Abstract: 本发明公开了一种壳聚糖亲和蛋白、酶的固定化方法及生物材料，所述壳聚糖亲和蛋白为由核苷酸序列SEQ ID NO.1编码的野生型壳聚糖酶经过其氨基酸第54位定点突变而产生的突变体，所述突变体为壳聚糖酶的突变体E54Q。本发明利用所述壳聚糖亲和蛋白与dit1Δ孢子壁壳聚糖层的亲和能力，实现酶蛋白在dit1Δ孢子中的固定化；本发明方法操作简便，不需要购买商品酶，大大降低了生产成本，且绿色环保，可大量制备并能重复使用。
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公开(公告)号：CN113862211A
公开(公告)日：2021-12-31
申请号：CN202111068850.1
申请日：2021-09-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种chs3Δ酿酒酵母孢子的应用，所述应用为chs3Δ酿酒酵母孢子在制备β‑葡聚糖微球中的应用；本发明还公开了β‑葡聚糖微球的制备方法和应用，所述β‑葡聚糖微球的制备方法包括培养chs3Δ酿酒酵母营养细胞产孢；纯化chs3Δ孢子并制备β‑葡聚糖微球。本发明的制备方法操作过程简便、提纯效率高，制备出的β‑葡聚糖微球能够快速引起哺乳动物细胞的免疫刺激，诱导释放大量细胞因子；制备的β‑葡聚糖微球，可用于食品、生物材料和医药领域，具有极好的发展前景。
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公开(公告)号：CN113736818A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111179096.9
申请日：2021-10-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在毕赤酵母中提高人源溶菌酶分泌效率及酶活的方法，包括如下步骤：构建质粒、启动子替换、重组质粒导入菌株中、验证重组质粒表达、信号肽优化、基因敲除、伴侣蛋白共表达、发酵条件优化等。本发明提供的技术方案有着极高的提高人源溶菌酶分泌效率及酶活的效果。
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公开(公告)号：CN113215103A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110286330.1
申请日：2021-03-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产杂合型N糖链修饰糖蛋白细胞株DFKO及其制备方法，其制备方法包括，将靶序列连接到CRISPR‑Cas9敲除系统的PX330‑EGFP质粒中，转染于HEK293野生型细胞中，转染后利用流式分选仪进行筛选富集和有限稀释，得到DFKO单克隆细胞。本发明在哺乳动物细胞HEK293中，利用CRISPR‑Cas9技术敲除N糖基化路径的MAN2A1、MAN2A2和FUT8基因，建立了三基因敲除细胞DFKO，该细胞可生产以杂合型且不含核心岩藻糖修饰为主要N糖链。该细胞株可应用于生产生物医药糖蛋白，能大大提高其稳定性和生物活性；特别地，由于DFKO细胞株丧失了核心岩藻糖修饰，利用该细胞株生产抗体，可以大大提高该抗体的ADCC效力。
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公开(公告)号：CN112175023A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN202011197003.0
申请日：2020-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N‑乙酰葡糖胺的制备方法，其中，脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N‑乙酰葡糖胺的制备方法，其包括如下步骤：脱保护1、磷酸化1、脱保护2、脱保护3、不对称加氢、磷酸化2、耦合、脱保护4。本发明提供一种能够实现N‑糖基化产物的合成的方法，且反应过程中各反应条件温和可控，制备难度低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111334485A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN201811566703.5
申请日：2018-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种人源N-乙酰葡糖胺转移酶II原核表达方法及其产品，涉及在大肠杆菌中表达人源的GnT-IIΔTM、GnT-IIΔTM的纯化、GnT-IIΔTM的体外活性检测等方面。本发明在大肠杆菌中成功表达并纯化了人源的GnT-IIΔTM，且该酶在体外具有催化活性，解决了哺乳动物膜蛋白GnT-II原核表达极易降解、纯化困难的技术问题，可以大量制备GnT-IIΔTM。获得具有体外活性的重组人源GnT-II解决了重要寡糖结构Gn2Man3Gn2的酶法合成问题，推动糖化学与糖生物学的发展。
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公开(公告)号：CN104911118A
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201510369294.X
申请日：2015-06-29
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/81 , C12R1/865 , C12N9/88 , C12N9/0006 , C12Y101/01027 , C12Y401/01001
Abstract: 本发明公开了一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母及其构建方法，属于微生物技术领域和分子生物学技术领域。本发明采用基因同源重组的方法将酿酒酵母编码PDC的基因PDC1，PDC5和PDC6敲除掉，在酿酒酵母中表达来源于人的LDH并用抗霉素A来阻断电子链传递，使得人源化的乳酸发酵来代替乙醇发酵来维持糖酵解的进行。本发明顺利实现了人的乳酸脱氢酶的异源表达。本发明得到的乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母能够表达人的乳酸脱氢酶，在酿酒酵母pdc1Δ pdc6Δ pdc5Δ三缺陷菌株中表达LDHA或LDHC，加入抗霉素A后，能够生长并检测到乳酸的产生。本发明的乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母将可以作为一种潜在的筛选抗癌药物以及能够调节乳酸脱氢酶活性相关基因的工具。
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公开(公告)号：CN103981171A
公开(公告)日：2014-08-13
申请号：CN201410199661.1
申请日：2014-05-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于酿酒酵母孢子的微胶囊固定化酶的制备方法，属于微生物和固定化酶技术领域。本发明将酶表达定位在酿酒酵母孢子的壳聚糖层和二酪氨酸层之间的周质间隙，然后分离纯化获得含有固定化酶的孢子。相比游离酶，本发明制备的固定化酶更加稳定，可抵御不同水解酶的侵袭和耐受较高温度，同时可以重复利用多次。
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公开(公告)号：CN103436481A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310420997.1
申请日：2013-09-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酿酒酵母孢子的制备方法及应用，其中制备方法包括，酿酒酵母单菌落的培养以及酿酒酵母孢子的制备。本发明所制备的酿酒酵母孢子可以用来吸收金属离子或者脂肪类物质，并且表现出较强的吸附能力，有广泛的应用前景。本发明直接通过培养△dit1菌株获得大量的酵母细胞，再加以破壁纯化得到目的产品，就可以做相应的应用，而无需获得价格昂贵的壳聚糖，此方法易于操作，绿色环保。
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公开(公告)号：CN119040291A
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202310617222.7
申请日：2023-05-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/10 , C12P21/00 , C12N15/866 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种人源复合型N‑糖肽的体外组装方法，包括在昆虫细胞中表达布氏锥虫来源的寡糖基转移酶TbSTT3A；利用寡糖基转移酶TbSTT3A催化，将含N‑糖链的脂肪醇寡糖中的寡糖转移到人源多肽上，得到人源复合型N‑糖肽；其中，所述寡糖基转移酶TbSTT3A基因具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。本发明利用底物适配性高的TbSTT3A首次将复合型N‑糖链直接转移到人源多肽链上，实现了特定结构糖链修饰的人源N‑糖肽/糖蛋白的高效组装，对于全面解析人源N‑糖链结构的生物活性以及开发糖蛋白类药物的生产技术具有重要意义。
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