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公开(公告)号：CN104531729A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410758084.5
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAA126C-N152C，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1，C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，为其它酶的改造提供新的技术路径，作为一种耐热型的酶制剂，该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN104404066A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410758070.3
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种天然二硫键与阿魏酸酯酶A功能相关性的验证方法，以及突变阿魏酸酯酶A工程菌构建、突变酶异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的模拟空间结构设计单突变C29T、C91T和C234T，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAC29T、AuFaeAC91T和AuFaeAC234T，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5。突变后该酶的酶活性和最适温度都有大幅下降，证明了二硫键是影响阿魏酸酯酶A功能发挥的关键因素，为其它与AuFaeA一级结构相似的A类阿魏酸酯酶的耐热性改造奠定了基础。
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公开(公告)号：CN103642850A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666357.9
申请日：2013-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种对共表达阿魏酸酯酶/木聚糖酶的酶解产物阿魏酸进行体外抗氧化活性的测定方法。利用共表达阿魏酸酯酶A和木聚糖酶的酵母系统(GS115/faeA-xyn11A)所产的共表达酶液水解小麦麸皮获得阿魏酸，从还原力、DPPH自由基和羟基自由基清除率三个方面对该阿魏酸进行体外抗氧化活性的测定。实验结果证明阿魏酸有良好的还原能力和自由基清除能力，该测定方法简单有效、方便快捷，在工业应用中阿魏酸的抗氧化测定方面有一定的潜在价值。
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公开(公告)号：CN103642777A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666413.9
申请日：2013-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2482 , C12N15/815 , C12Y302/01008
Abstract: 本发明提出了一种新型的利用计算机技术与生物信息学方法对常温的木聚糖酶进行定向改造的方法，运用基因工程技术构建出了具有高效表达能力的突变木聚糖酶工程菌。将来源于米曲霉(Aspergillus oryzae)CICC40186菌株的常温木聚糖酶进行热稳定性的定向改造，获得了一种木聚糖酶突变体，其热稳定性有了一定的提高，而其催化活性较原酶无明显改变。作为一种耐热型的酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和应用价值。
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公开(公告)号：CN102994542A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210562444.5
申请日：2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种新型的共表达源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001阿魏酸酯酶A基因和β-1，4-木聚糖酶基因的工程菌GS115/faeA-xyn11A的构建方法。所构建成的毕赤酵母共表达系统可用于的阿魏酸酯酶和β-1，4-木聚糖酶的工业化生产。所制备的两种酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102994529A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210562519.X
申请日：2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种GH10木聚糖酶Aus Xyn10A热稳定性改造及重组突变酶的高效表达和纯化方法。依据Aus Xyn10A(源于Aspergillus usamii E001)与耐热木聚糖酶(源于Thermoascus Aurantiacus 751K6A)蛋白质序列比对结果，运用基因工程的方法将耐热酶的N末端区域序列替换Aus Xyn10A的对应序列。获得的突变酶命名为ATx10AM。实验结果表明突变后该酶的最适温度和热稳定性有了明显的提高，作为一种耐热型的酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN114868916A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210273198.5
申请日：2022-03-18
Applicant: 江南大学
IPC: A23L33/105 , A23L33/15 , A23P10/30
Abstract: 本发明涉及一种姜黄素/抗坏血酸稳定化核‑壳粒子及其制备方法和应用，属于功能食品技术领域。本发明所述的制备方法包括以下步骤：(1)将壳聚糖与抗坏血酸通过静电作用结合，利用三聚磷酸钠离子交联壳聚糖，形成抗坏血酸‑壳聚糖复合体系；(2)碱性条件下去质子化溶解姜黄素，并使酪蛋白酸钠结构展开，得到酪蛋白酸钠‑姜黄素混合溶液；(3)向步骤(2)所得的酪蛋白酸钠‑姜黄素混合溶液中加入所述抗坏血酸‑壳聚糖复合体系，经优化调节pH至弱酸性，得到所述的姜黄素/抗坏血酸稳定化核‑壳粒子。本发明所述的粒子具有良好的水溶性、稳定性以及抗氧化活性，不涉及醇相溶剂的添加；同时本发明提供了一种简单便捷的制备方法和应用。
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公开(公告)号：CN112126519A
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN202010971483.5
申请日：2020-09-16
Applicant: 江南大学
IPC: C11B5/00 , A61K9/107 , A61K47/42 , A61K47/10 , A61K47/22 , A61K35/60 , A61P39/06 , A61K31/05 , A61K31/353
Abstract: 本发明公开了一种制备共包埋双重抗氧化剂的方法，所述方法是以酪蛋白粒子为载体，共包埋两种具有不同溶解性的抗氧化剂。本发明所得均一共包埋体系，酪蛋白具有很好的营养价值，同时包埋不同溶解性的白藜芦醇和EGCG特点，它们的包埋率分别约为68％和99％。此外，将所得的共包埋体系用于稳定化鱼油乳状液，EGCG和白藜芦醇在油‑水界面含量分别为87％和78％，两者依序起作用，EGCG先于白藜芦醇对鱼油起到保护作用，提高了鱼油的氧化稳定性，延长了鱼油的储藏期。
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公开(公告)号：CN103642768A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666412.4
申请日：2013-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/18 , C12N15/815 , C12Y301/01072
Abstract: 本发明提出了一种源于Aspergillus usamii E001的新型乙酰木聚糖酯酶成熟肽cDNA序列的克隆及表达方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1，相应的氨基酸序列为SEQ ID NO：2，相应的基因命名为Auaxe。本发明还公开了产乙酰木聚糖酯酶工程菌的构建以及重组乙酰木聚糖酯酶的高效表达方法，该酶能有效地消除乙酰基团对木聚糖酶作用时的空间阻碍作用，在提高纤维资源的生物降解性，开发为饲料酶制剂投入工业化生产及生物漂白等方面显示出良好的效果，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN102978224A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210562636.6
申请日：2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种对来源于米曲霉Aspergillus oryzae的11家族的杂合木聚糖酶AEx11A进行耐热分析，通过对AEx11A结构的同源建模及其与AoXyn11A结构的比对，发现在AEx11A的N端引入了一个二硫键(Cys5-Cys32)。利用定点突变法将其5位的半胱氨酸突变为苏氨酸(C5T)，去除该二硫键，以探讨其对AEx11A热稳定性的影响，结果发现突变酶(AEx11AC5T)的Topt由突变前的75℃降为60℃、t1/270和t1/280分别由突变前的197和25min缩短为3.0和1.0min，说明N端二硫键对11家族木聚糖酶热稳定性有一定的影响。能为11家族木聚糖酶的热稳定机制的阐明、热稳定性蛋白工程的改造等奠定理论基础。
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