牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法

    公开(公告)号:CN111057132A

    公开(公告)日:2020-04-24

    申请号:CN201910981684.0

    申请日:2019-10-16

    Abstract: 本发明提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。制备方法包括以下步骤:S1、从NCBI GenBank中获取BVDV NADL全基因组序列,从中找出BVDV E0基因序列;S2、对步骤S1得到的E0基因序列进行优化与合成;S3、选择带有MBP标签原核表达载体pMal-c5X,将E0基因与pMal-c5X进行连接,将E0片段插入pMal-c5X;然后将连接好的表达载体pMAL-c5x-E0转化进表达宿主菌BL21(DE3),并诱导表达重组蛋白,分离纯化目的蛋白。本发明通过优化目的基因E0,并与MBP标签蛋白融合表达,最终达到E0蛋白的高效可溶性表达,具有表达产量高、可溶性好、表达蛋白提纯方便等优点,当外源蛋白与MBP融合表达时更能提高大肠杆菌表达蛋白的可溶性,这为表达蛋白的纯化提供了便利。

    重组牛抵抗素蛋白及其制备方法

    公开(公告)号:CN108315341A

    公开(公告)日:2018-07-24

    申请号:CN201810033929.2

    申请日:2018-01-15

    Abstract: 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种重组牛抵抗素蛋白及其制备方法。针对现有制备牛抵抗素蛋白的方法表达的蛋白所含标签过大,容易造成蛋白构象的改变,不利于活性研究等问题,本发明提供了一种重组牛抵抗素蛋白的制备方法,包括以下步骤:RT-PCR方法扩增出牛抵抗素基因,构建pET21a-RETN载体,转化至大肠杆菌,经选择性培养、PCR检测、双酶切鉴定、基因测序,选择带有目的性基因的质粒;再将pET21a-RETN载体转化至大肠杆菌BL21、Rosetta,诱导表达牛抵抗素蛋白。本发明方法操作简单,成本低廉,表达量高,能够高效制备大量重组牛抵抗素蛋白,为一步对其生理功能的研究和应用于相关疾病的预防和治疗奠定基础。

    一种牛输血的方法
    8.
    发明公开

    公开(公告)号:CN103284813A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310064528.0

    申请日:2013-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种牛输血的新方法,将刚刚生下的公牛侧卧或仰卧保定在手术台上,一侧颈静脉沟处剪毛、消毒,用手术刀切开皮肤并将动脉分离出来,结扎远心端,将近心端用止血钳夹注,并在血管上套上一根长约20厘米的手术线备用;在患牛输液即将结束时,将输液器关闭并取下,将其下端的过滤器剪去,套在针头上,由一助手固定;插输液瓶的一端也剪去,并剪成斜口,插入犊牛动脉血管,用线结扎固定;打开止血钳和输液器开关,进行输血。本发明不需要做血液凝集实验、生物学实验,利用这种方法给牛输血,临床操作简便、所需要的药品和器具少,从而大大减少了采血带来的污染,且可增加一次输血量、减少输血次数,降低输血成本。

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