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公开(公告)号:CN111057132A
公开(公告)日:2020-04-24
申请号:CN201910981684.0
申请日:2019-10-16
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法,其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。制备方法包括以下步骤:S1、从NCBI GenBank中获取BVDV NADL全基因组序列,从中找出BVDV E0基因序列;S2、对步骤S1得到的E0基因序列进行优化与合成;S3、选择带有MBP标签原核表达载体pMal-c5X,将E0基因与pMal-c5X进行连接,将E0片段插入pMal-c5X;然后将连接好的表达载体pMAL-c5x-E0转化进表达宿主菌BL21(DE3),并诱导表达重组蛋白,分离纯化目的蛋白。本发明通过优化目的基因E0,并与MBP标签蛋白融合表达,最终达到E0蛋白的高效可溶性表达,具有表达产量高、可溶性好、表达蛋白提纯方便等优点,当外源蛋白与MBP融合表达时更能提高大肠杆菌表达蛋白的可溶性,这为表达蛋白的纯化提供了便利。
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公开(公告)号:CN110184369A
公开(公告)日:2019-08-30
申请号:CN201910637088.0
申请日:2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测鲍曼不动杆菌的特异性引物及其方法和应用,所述的特异性引物如SEQ ID NO.1~2所示,通过提取待测样品基因组DNA,使用上述引物进行PCR扩增,凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在410bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有鲍曼不动杆菌。采用本发明的检测方法检测鲍曼不动杆菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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公开(公告)号:CN108315341A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810033929.2
申请日:2018-01-15
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/575
Abstract: 本发明属于生物工程领域,具体涉及一种重组牛抵抗素蛋白及其制备方法。针对现有制备牛抵抗素蛋白的方法表达的蛋白所含标签过大,容易造成蛋白构象的改变,不利于活性研究等问题,本发明提供了一种重组牛抵抗素蛋白的制备方法,包括以下步骤:RT-PCR方法扩增出牛抵抗素基因,构建pET21a-RETN载体,转化至大肠杆菌,经选择性培养、PCR检测、双酶切鉴定、基因测序,选择带有目的性基因的质粒;再将pET21a-RETN载体转化至大肠杆菌BL21、Rosetta,诱导表达牛抵抗素蛋白。本发明方法操作简单,成本低廉,表达量高,能够高效制备大量重组牛抵抗素蛋白,为一步对其生理功能的研究和应用于相关疾病的预防和治疗奠定基础。
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公开(公告)号:CN105688202A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610125890.8
申请日:2016-03-03
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明提供了一种乙型脑炎疫苗组合物,它含有致免疫有效量的乙型脑炎病毒抗原和水性疫苗佐剂。本发明还提供了所述疫苗组合物的制备方法和用途。本发明疫苗组合物具有良好的免疫原性和免疫保护性,免疫效果显著优于单用猪乙型脑炎活疫苗和其它免疫佐剂稀释的活疫苗,临床应用前景良好。
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公开(公告)号:CN104711270A
公开(公告)日:2015-06-17
申请号:CN201510059364.1
申请日:2015-02-05
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,公开了包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的重组载体、重组菌。本发明包含SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示核苷酸序列的重组沙门氏菌SL7207(pVAXD-N-Sa)免疫,可同时诱导产生针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的S蛋白和N蛋白的两种特异性抗体,具有双基因的免疫功能,免疫效果更全面,诱导的抗体水平高,可对猪传染性胃肠炎提供更全面的免疫保护作用,临床应用前景优良。
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公开(公告)号:CN102796679B
公开(公告)日:2014-09-24
申请号:CN201210011702.0
申请日:2012-01-16
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一株无药物抗性标记的血清5型猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)Apx I C/Apx II C双基因缺失疫苗候选株SW1ΔI C/ΔII C的构建与鉴定,于2011年10月11日保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏号为:CCTCC NO:M2011343。该基因缺失株是用血清5型APP分离株(SW1)作为亲本株,利用基因工程技术将其溶血外毒素Apx I、Apx II的激活基因C(Apx I C/Apx II C)缺失,缺失的片段大小分别为475bp和451bp。本发明所构建的基因缺失株无药物抗性标记,符合生物安全要求,遗传稳定性好,不会返强,可作为疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN102600330B
公开(公告)日:2013-12-04
申请号:CN201210091256.9
申请日:2012-03-31
Applicant: 四川农业大学
IPC: A61K36/889 , A61P15/00 , A61K33/06
Abstract: 本发明公开了一种奶牛清宫药物组合,以重量份计,其组成为:槟榔,3;赤芍,2.5;川芎,3;内金,8;甘草,1;益母草,25;红花,3;山楂,10;神曲,4;生地,2.5;大黄,2.5;柴胡,3;淫阳霍,3;石膏,6。清宫药对产后恶露不净有明显治疗作用,并可加速子宫复旧,达到清除子宫污物及止血的目的。
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公开(公告)号:CN103284813A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310064528.0
申请日:2013-02-25
Applicant: 四川农业大学
Inventor: 沈留红 , 杨健美 , 邓俊良 , 杨庆稳 , 何桥 , 王海光 , 曹随忠 , 左之才 , 余树民 , 彭广能 , 胡延春 , 王娅 , 任志华 , 马晓平 , 钟志军 , 卿佰春 , 石锦江 , 王英柱 , 詹庚一
IPC: A61D7/00
Abstract: 本发明公开了一种牛输血的新方法,将刚刚生下的公牛侧卧或仰卧保定在手术台上,一侧颈静脉沟处剪毛、消毒,用手术刀切开皮肤并将动脉分离出来,结扎远心端,将近心端用止血钳夹注,并在血管上套上一根长约20厘米的手术线备用;在患牛输液即将结束时,将输液器关闭并取下,将其下端的过滤器剪去,套在针头上,由一助手固定;插输液瓶的一端也剪去,并剪成斜口,插入犊牛动脉血管,用线结扎固定;打开止血钳和输液器开关,进行输血。本发明不需要做血液凝集实验、生物学实验,利用这种方法给牛输血,临床操作简便、所需要的药品和器具少,从而大大减少了采血带来的污染,且可增加一次输血量、减少输血次数,降低输血成本。
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公开(公告)号:CN116426393A
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202310525195.0
申请日:2023-05-10
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一种竹针孢座囊菌及其制备方法与应用。针对目前关于竹针孢座囊菌研究在基因分子层面的空缺,提供了一种带有适于真菌基因表达的构巢曲霉启动子(PtrpC)及增强绿色荧光(EGFP)能够高效表达绿色荧光基因的敲除载体质粒在竹针孢座囊菌基因敲除中的应用。
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公开(公告)号:CN110184370B
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN201910637096.5
申请日:2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测约翰逊不动杆菌的特异性引物及方法和应用,所述的特异性引物如SEQ ID NO.1~2所示,通过提取待测样品基因组DNA,使用上述引物进行PCR扩增,凝胶电泳检测,于凝胶成像系统下拍照检测,存在365bp的DNA特异性条带,则确定样品中含有约翰逊不动杆菌。采用本发明的检测方法检测约翰逊不动杆菌所需时间短、特异性强、灵敏度高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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