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公开(公告)号：CN115057915A
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN202111630693.9
申请日：2021-12-28
Applicant: 四川农业大学 , 成都大熊猫繁育研究基地
Abstract: 本申请实施例公开了一种大肠杆菌表达蛋白Cry5B的制备及抗大熊猫蛔虫活性，用于测定大肠杆菌异源表达重组Cry5B蛋白对大熊猫蛔虫的杀灭活性。本申请实施例方法包括：运用在线工具GENSCAN获取Bt Cry5B基因完整开放阅读框序列，分别在序列5’和3’端加入BamH I和Hind III酶切位点及其保护性碱基，得到嵌合序列；合成嵌合序列得到合成序列；将合成序列插入pMD19‑T克隆质粒进行TA克隆和测序分析，得到的克隆质粒用双酶切后连入pET‑32a(+)原核表达载体，得到pET‑32a‑Cry5B重组质粒；将pET‑32a‑Cry5B重组质粒转入原核表达菌DE3进行表达，得到重组Cry5B蛋白；重组Cry5B蛋白亲和层析后，得到纯化的重组Cry5B蛋白；将纯化的重组Cry5B蛋白进行倍比稀释，评价不同浓度重组Cry5B蛋白对大熊猫蛔虫成虫和L4期幼虫的杀灭活性。
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公开(公告)号：CN111057132B
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN201910981684.0
申请日：2019-10-16
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明提供了一种牛病毒性腹泻病毒E0蛋白氨基酸及制备方法，其氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。制备方法包括以下步骤：S1、从NCBI GenBank中获取BVDV NADL全基因组序列，从中找出BVDV E0基因序列；S2、对步骤S1得到的E0基因序列进行优化与合成；S3、选择带有MBP标签原核表达载体pMal‑c5X，将E0基因与pMal‑c5X进行连接，将E0片段插入pMal‑c5X；然后将连接好的表达载体pMAL‑c5x‑E0转化进表达宿主菌BL21(DE3)，并诱导表达重组蛋白，分离纯化目的蛋白。本发明通过优化目的基因E0，并与MBP标签蛋白融合表达，最终达到E0蛋白的高效可溶性表达，具有表达产量高、可溶性好、表达蛋白提纯方便等优点，当外源蛋白与MBP融合表达时更能提高大肠杆菌表达蛋白的可溶性，这为表达蛋白的纯化提供了便利。
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公开(公告)号：CN110196337B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201910561186.0
申请日：2019-06-26
Applicant: 四川农业大学
IPC: G01N33/92 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了多头带绦虫Antigen B作为脑多头蚴病诊断抗原等一系列相关应用，相关实验结果显示，多头带绦虫Antigen B能被感染脑多头蚴的山羊血清所识别而不与阴性血清反应，具有良好的免疫原性和反应原性；同时在间接ELISA方法中表现出较高敏感性和特异性，且相对其他蛋白具有较好的热稳定性，种种结果证明多头带绦虫Antigen B可以作为脑多头蚴病的诊断抗原，以及应用到检测试剂盒中。
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公开(公告)号：CN110208553A
公开(公告)日：2019-09-06
申请号：CN201910561192.6
申请日：2019-06-26
Applicant: 四川农业大学
IPC: G01N33/92 , G01N33/53 , G01N33/535 , C12N15/70
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了多头带绦虫Antigen B作为脑多头蚴病诊断抗原等一系列相关应用，相关实验结果显示，多头带绦虫Antigen B能被感染脑多头蚴的山羊血清所识别而不与阴性血清反应，具有良好的免疫原性和反应原性；同时在间接ELISA方法中表现出较高敏感性和特异性，且相对其他蛋白具有较好的热稳定性，种种结果证明多头带绦虫Antigen B可以作为脑多头蚴病的诊断抗原，以及应用到检测试剂盒中。
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公开(公告)号：CN110184372A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910637634.0
申请日：2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测牛源肺炎克雷伯菌特异性引物及其方法和应用，所述的特异性引物如SEQ ID NO.1～2所示，通过提取待测样品基因组DNA，使用上述引物进行PCR扩增，凝胶电泳检测，于凝胶成像系统下拍照检测，存在204bp的DNA特异性条带，则确定样品中含有肺炎克雷伯菌。采用本发明的检测方法检测肺炎克雷伯菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110184368A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910637080.4
申请日：2019-07-15
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测towneri不动杆菌的特异性引物及方法和应用，所述的特异性引物如SEQ ID NO.1～2所示，通过提取待测样品基因组DNA，使用上述引物进行PCR扩增，凝胶电泳检测，于凝胶成像系统下拍照检测，存在401bp的DNA特异性条带，则确定样品中含有towneri不动杆菌。采用本发明的检测方法检测towneri不动杆菌所需时间短、特异性强、灵敏度较高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。
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公开(公告)号：CN102675446A
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN201210171404.8
申请日：2012-05-29
Applicant: 四川农业大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K39/00 , A61P33/10
Abstract: 一种大熊猫西氏贝蛔虫38kDa抗原以及制备该抗原的方法和应用，该抗原基因为Bsc38基因，该基因核苷酸序列如表1所示：Bsc38编码成熟肽的核苷酸序列，对应氨基酸序列如表2所示。本发明针对目前大熊猫西氏贝蛔虫病的防治仍以药物防治为主，药物的频繁使用导致耐药性虫株的出现以及化学药物所产生的食物链和环境污染等问题，鉴定和筛选出了一个用于制备预防大熊猫西氏贝蛔虫病的基因工程疫苗侯选抗原。与现有技术相比，本发明能减少大熊猫西贝氏蛔虫病药物防治过程中耐药虫株的出现和药物对食物链和环境的污染，能减轻自然环境下大熊猫的重复性感染。本发明在国内外首次阐明了西氏贝蛔虫幼虫感染宿主后的分子免疫机制。
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公开(公告)号：CN117765329B
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202311807863.5
申请日：2023-12-26
Applicant: 四川农业大学 , 中国电信股份有限公司四川分公司
IPC: G06V10/764 , G06V10/774 , G06V10/82 , G06N3/0464 , G06V10/42
Abstract: 本发明公开了一种基于目标检测网络模型YOLOv8的非接触式牛体重测量方法，首先通过采集牛个体信息视频并转化为图像帧，标记出图像中牛的正常姿态和异常姿态特征，基于YOLOv8建立牛的姿态识别模型；将图像中牛的身份信息一一对应，基于YOLOv8建立牛的个体识别模型；使用背景相减、边缘提取等算法提取出牛的体尺参数，将多个体尺参数进行组合，建立牛体重和体尺参数的回归模型，使用该模型对牛的体重进行预测；本发明能够及时有效地测量牛的个体体重，牛体重和体尺参数的回归模型性能指标极好，预测体重与实际体重均方误差极低，使得管理人员能够及时精确的了解牛的体重信息并做出相应的处理，提高牛的养殖效益，具有极好的推广应用前景。
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公开(公告)号：CN115057915B
公开(公告)日：2024-04-26
申请号：CN202111630693.9
申请日：2021-12-28
Applicant: 四川农业大学 , 成都大熊猫繁育研究基地
Abstract: 本申请实施例公开了一种大肠杆菌表达蛋白Cry5B在制备抗大熊猫蛔虫成虫和L4期幼虫活性药物中的应用，用于测定大肠杆菌异源表达重组Cry5B蛋白对大熊猫蛔虫的杀灭活性。本申请实施例方法包括：运用在线工具GENSCAN获取Bt Cry5B基因完整开放阅读框序列，分别在序列5’和3’端加入BamH I和Hind III酶切位点及其保护性碱基，得到嵌合序列；合成嵌合序列得到合成序列；将合成序列插入pMD19‑T克隆质粒进行TA克隆和测序分析，得到的克隆质粒用双酶切后连入pET‑32a(+)原核表达载体，得到pET‑32a‑Cry5B重组质粒；将pET‑32a‑Cry5B重组质粒转入原核表达菌DE3进行表达，得到重组Cry5B蛋白；重组Cry5B蛋白亲和层析后，得到纯化的重组Cry5B蛋白；将纯化的重组Cry5B蛋白进行倍比稀释，评价不同浓度重组Cry5B蛋白对大熊猫蛔虫成虫和L4期幼虫的杀灭活性。
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公开(公告)号：CN115725742A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202210856989.0
申请日：2022-07-20
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种痒螨的ITS2、16S、12S和COX1基因序列在制备诊断痒螨病试剂盒中的用途，另外本发明公开了一种用于诊断痒螨病的PCR试剂盒，所述试剂盒中的特异性引物可与痒螨的ITS2，和/或12S，和/或16S，和/或COX1基因序列特异性结合。本发明提供的用于诊断痒螨病的定性PCR试剂盒，以及利用所述试剂盒进行痒螨病PCR检测方法的检测灵敏度高于镜检，可以更早更全面的发现早期感染的动物，具有较高的敏感性和特异性，可用于低荷载量寄生虫感染的亚临床病例和隐形感染病例的诊断，并且能够区分既发感染和现症感染。
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