一种培养和诱导naïve态多能干细胞的LUDY体系

    公开(公告)号:CN117025517A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202311027117.4

    申请日:2023-08-16

    Applicant: 同济大学

    Abstract: 本发明属于细胞组织的体外培养领域,涉及一种#imgabs0#态多能干细胞体外培养和诱导的体系。本发明的#imgabs1#态多能干细胞培养和诱导体系,含有#imgabs2#态多能干细胞的基础培养基、Y‑27632、Human LIF、Debio‑1347与Ulixertinib。本发明还涉及相应的试剂盒和#imgabs3#态多能干细胞培养和诱导体系的应用。本发明的#imgabs4#态多能干细胞培养和诱导体系,能够在体外环境下长期稳定的培养和诱导#imgabs5#态多能干细胞。本发明可以用于信号通路调控#imgabs6#态多能性的研究,解析Debio‑1347与Ulixertinib与信号通路对#imgabs7#态多能性的调控机制。

    一种杜鹃素在基因编辑中的应用

    公开(公告)号:CN111088290B

    公开(公告)日:2021-10-08

    申请号:CN201911398922.1

    申请日:2019-12-30

    Applicant: 同济大学

    Abstract: 本发明涉及一种杜鹃素在基因编辑中的应用。所述杜鹃素能够靶向促进DNA双链断裂中同源重组修复(Homologous recombination,HR)效率但对非同源末端连接修复(Non‑homologous end joint,NHEJ)效率没有影响,进而为基因编辑中提高目的片段靶向整合效率提供更加便捷的依据。与当前多种小分子化合物在基因编辑中促进同源重组打靶的方式相比,本发明涉及的小分子化合物能够更有效及稳定地在基因编辑中实现靶向整合目的,在不同类型细胞以及小鼠胚胎水平均能够适用,其促进靶向整合效率最高达3倍。同时本发明所应用的筛选系统也更为简便有效,为多种天然小分子化合物在DNA双链断裂修复方面提供了合理的筛选方式。

    利用细胞表面分子标志物鉴定人类原态多能性的方法

    公开(公告)号:CN108088997A

    公开(公告)日:2018-05-29

    申请号:CN201611049238.9

    申请日:2016-11-21

    Abstract: 本发明涉及一种利用细胞表面分子ALPPL2鉴定人类 态多能性的方法。步骤是:建立可诱导的2代重编程系统,利用特定的诱导培养体系从人的成纤维细胞中分别建立态及primed态iPSC系;分别提取所建立的 态及primed态iPSCs中的细胞膜蛋白,通过iTRAQ标记及蛋白质谱定量技术,对两者的膜蛋白进行系统比较分析,筛选出相比于primed iPSCs, 中高表达的膜蛋白库;3.在及primed重编程过程中分别选取特定时间节点进行细胞收样,结合RNAseq分析,获得 及primed重编程过程转录组的动态变化,并将在 重编程过程中特异性上调的基因与步骤2中筛选出的膜蛋白库进行综合比较。本发明找到了可特异指征人的 态多能性的表面分子标志物ALPPL2。

    一种培养和诱导naïve态多能干细胞的LADY体系

    公开(公告)号:CN116948951A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202311015935.2

    申请日:2023-08-14

    Applicant: 同济大学

    Abstract: 本发明属于细胞组织的体外培养领域,涉及一种#imgabs0#态多能干细胞体外培养和诱导的体系。本发明的#imgabs1#态多能干细胞培养体系,含有#imgabs2#态多能干细胞的基础培养基、Y‑27632、Human LIF、Debio‑1347和AZD1480。本发明还涉及相应的试剂盒和#imgabs3#态多能干细胞培养和诱导体系的应用。本发明的#imgabs4#态多能干细胞培养和诱导体系,能够在体外环境下长期稳定的培养和诱导#imgabs5#态多能干细胞。本发明可以用于信号通路调控#imgabs6#态多能性的研究,解析Debio‑1347和AZD1480与信号通路对#imgabs7#态多能性的调控机制。

    基于人naive多能性诱导系统的体外类囊胚构建方法

    公开(公告)号:CN116083346A

    公开(公告)日:2023-05-09

    申请号:CN202310088913.2

    申请日:2023-02-09

    Applicant: 同济大学

    Abstract: 本发明属于细胞组织的体外培养领域,涉及一种体外类囊胚的构建方法。本发明的体外类囊胚构建方法基于人naive多能性诱导系统,包括:取体外培养的人primed态多能干细胞,使用5iLAF培养基培养;收取培养至day8的细胞,使用类囊胚诱导培养基重悬细胞,同时补充Rock抑制剂,混匀;转移至防粘附冲洗液处理过20分钟以上的微孔培养板中,将微孔培养板置于37℃培养箱培养。本发明的方法不包括体内发育过程,为胚胎发育研究提供新的类胚胎模型,也将为胚胎发育缺陷、药物筛选等转化研究提供重要的模型。

    生长因子诱导生成神经前体细胞的方法

    公开(公告)号:CN108148807B

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN201611097574.0

    申请日:2016-12-03

    Abstract: 本发明涉及一种生长因子诱导生成神经前体细胞的方法。它是步骤是:A通过向基础培养基中添加特定生长因子,来调控细胞上下游的信号通路,细胞因子使用包括:LIF(白血病抑制因子)、B27(不含维他命A)、肝素、FGF‑2和EGF,通过这些因子的组合,可以将哺乳动物体细胞去分化到部分重编程状态;B接着采用神经类细胞维持传代的生长因子N2、B27(含维他命A)、FGF2、EGF等将这种部分重编程状态的细胞继续分化为功能性的神经前体细胞;C将诱导获得的神经前体细胞在神经干细胞培养基中进一步培养,可进行扩增和保存。本发明的方法一方面规避了传统病毒介导的诱导方法的外源基因插入,免疫原性;又通过使用生长因子降低了潜在的致瘤性;另一方面,又极大改善了已有的小分子化合物诱导方法中存在的效率偏低的问题。

    一种培养和诱导naïve态多能干细胞的LKPY体系

    公开(公告)号:CN117025518A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202311027312.7

    申请日:2023-08-16

    Applicant: 同济大学

    Abstract: 本发明属于细胞组织的体外培养领域,涉及一种#imgabs0#态多能干细胞体外培养和诱导的体系。本发明的#imgabs1#态多能干细胞培养和诱导体系,含有#imgabs2#态多能干细胞的基础培养基、Y‑27632、Human LIF、AZD4547和PHA‑665752。本发明还涉及相应的试剂盒和#imgabs3#态多能干细胞培养和诱导体系的应用。本发明的#imgabs4#态多能干细胞培养和诱导体系,能够在体外环境下长期稳定的培养和诱导#imgabs5#态多能干细胞。本发明可以用于信号通路调控#imgabs6#态多能性的研究,解析AZD4547和PHA‑665752与信号通路对#imgabs7#态多能性的调控机制。

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