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公开(公告)号：CN112553148A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011550587.5
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基,即培养肉目前最优的种子细胞：肌肉干细胞的体外扩大培养的改良培养基。改良后的培养基为添加有VC及其衍生物的细胞培养基，可以在体外扩大培养中获得正常培养基1000倍以上的细胞数量，并且更为重要的是，肌肉干细胞在体外长期连续传代，达到需要的细胞数量之后，仍能保持分化潜能。因此，改良培养基可以帮助体外大量扩培具有功能性的肌肉干细胞，较好地满足培养肉生产的对种子细胞的大规模需求。
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公开(公告)号：CN110628708A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910939799.3
申请日：2019-09-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种用于培养肉研究和生产的高纯度猪肌肉干细胞分离纯化方法。本发明的分离纯化方法包括获取无菌的肌肉组织，高效率的消化肌肉组织以得到大量的肌肉单核细胞以及最终通过流式细胞分选获得高纯度的猪肌肉干细胞。本发明进一步公开了如何高效率消化猪肌肉组织的方法，可以提高消化速度和强度，获得大量的肌肉单核细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得纯度超过92％(以PAX7计)的猪肌肉干细胞。分离得到的猪肌肉干细胞拥有高效的分化效率，MYOSIN的表达量达到85％-90％。应用本发明的方法，可以为培养肉研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112626008B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202011553454.3
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外短期增殖的改良培养基，即加快培养肉目前最有潜力的种子细胞—肌肉干细胞体外短期培养的增殖速度。改良后的培养基为添加有水溶性维生素E的细胞增殖培养基，采用改良的增殖培养基细胞在体外短期培养时增殖速度显著提高，细胞数量上是正常培养基的1.2倍；采用添加有水溶性维生素E的改良增殖培养基培养的细胞在分化培养基中诱导分化，能够显著提高细胞的分化能力、产生更多的肌肉蛋白。因此，改良的增殖培养基可以帮助在体外短期获得较多数量的培养肉种子细胞，对于培养肉的生产起到了极有利的作用。
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公开(公告)号：CN112626008A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011553454.3
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外短期增殖的改良培养基，即加快培养肉目前最有潜力的种子细胞—肌肉干细胞体外短期培养的增殖速度。改良后的培养基为添加有水溶性维生素E的细胞增殖培养基，采用改良的增殖培养基细胞在体外短期培养时增殖速度显著提高，细胞数量上是正常培养基的1.2倍；采用添加有水溶性维生素E的改良增殖培养基培养的细胞在分化培养基中诱导分化，能够显著提高细胞的分化能力、产生更多的肌肉蛋白。因此，改良的增殖培养基可以帮助在体外短期获得较多数量的培养肉种子细胞，对于培养肉的生产起到了极有利的作用。
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公开(公告)号：CN110643512A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201911062724.8
申请日：2019-11-03
IPC: C12M3/00 , C12N5/0775 , C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种规律排布微柱阵列的多孔网状培养肉生产模具及基于该模具的多孔肌肉组织生产方法。包括将肌源性细胞和I型胶原、含酚红的DMEM培养基、氢氧化钠溶液，得到含有细胞的混合溶液，将含有细胞的混合溶液加入到模具中，37℃，5％二氧化碳的培养箱中培养2h以形成水凝胶肌肉组织。之后加入生长培养基，水凝胶肌肉组织培养1-3天之后，将生长培养基换为分化培养基，水凝胶肌肉组织在分化培养基中培养5-7天后，即得多孔网状肌肉组织。使水凝胶肌肉组织能在微柱之间收缩形成肌肉束，微柱周围由于肌肉束形成的收缩空间可以增强营养物质向细胞的扩散，有利于废弃物排出，并通过控制机械张力的空间格局来引导局部的三维细胞排列，促进分化，实现在体外生产出较大的、符合工业生产的培养肉产品。
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公开(公告)号：CN114958730A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210429466.8
申请日：2022-04-22
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种肌肉干细胞增殖培养基、分化培养基及其应用。包括添加有3，2’‑二羟基黄酮的肌肉干细胞增殖培养基，添加有槲皮素的肌肉干细胞分化培养基。采用肌肉干细胞增殖培养基在体外短期培养猪肌肉干细胞时增殖速度显著提高，培养3天得到的细胞数量是正常培养基的1.35倍；在肌肉干细胞分化培养基中诱导分化5天，细胞的分化能力显著上升，肌肉特异性表蛋白肌球蛋白重链表达量显著上升。本发明还提供所述培养基的应用，以及基于本发明所述培养基制备培养肉的方法，提高肌肉干细胞在体外短期培养的扩增数量及分化能力，有利于培养肉的生产。
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公开(公告)号：CN211394496U
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN201921875316.X
申请日：2019-11-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12M3/00 , C12N5/0775 , C12N5/077
Abstract: 本实用新型涉及一种多孔的网状培养肉生产模具。该生产模具包括外壁，第一凹槽，第二凹槽和由若干微柱规律排布组成的微柱阵列。所述第一凹槽设置在外壁内侧，所述第二凹槽设置在第一凹槽内部；所述第二凹槽底部设置若干个微柱，所述若干个微柱规律排布形成微柱阵列。微柱阵列的设计考虑了后期混合凝胶压实过程中的力学变化，增强营养物质向细胞的扩散，并通过控制机械张力的空间格局来引导局部的三维细胞排列，促进分化过程。第二凹槽是培养肉肌肉组织的培养空间。第一凹槽的设计有利于阳模脱模过程，还可以扩大培养液的使用量，促进营养物质的交换。利用该模具，可以生产获得较大的网状培养肉肌肉组织。(ESM)同样的发明创造已同日申请发明专利
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