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公开(公告)号：CN112553154A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011550577.1
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基，即脂肪间充质干细胞的体外扩大培养的改良培养基。改良后的培养基为添加bFGF的生长培养基，采用此改良培养基培养15天获得的细胞总数是对照生长培养基中获得的细胞总数的6倍，并且更为重要的是，脂肪间充质干细胞在体外大量扩增，达到需要的细胞数量之后，仍能保持较高的分化能力。因此，改良培养基有助于在体外获得大量具有功能性的脂肪间充质干细胞，较好地满足培养肉生产对种子细胞的数量和干细胞功能的需求。
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公开(公告)号：CN112553148A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011550587.5
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外扩大培养的改良培养基,即培养肉目前最优的种子细胞：肌肉干细胞的体外扩大培养的改良培养基。改良后的培养基为添加有VC及其衍生物的细胞培养基，可以在体外扩大培养中获得正常培养基1000倍以上的细胞数量，并且更为重要的是，肌肉干细胞在体外长期连续传代，达到需要的细胞数量之后，仍能保持分化潜能。因此，改良培养基可以帮助体外大量扩培具有功能性的肌肉干细胞，较好地满足培养肉生产的对种子细胞的大规模需求。
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公开(公告)号：CN110628708A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910939799.3
申请日：2019-09-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种用于培养肉研究和生产的高纯度猪肌肉干细胞分离纯化方法。本发明的分离纯化方法包括获取无菌的肌肉组织，高效率的消化肌肉组织以得到大量的肌肉单核细胞以及最终通过流式细胞分选获得高纯度的猪肌肉干细胞。本发明进一步公开了如何高效率消化猪肌肉组织的方法，可以提高消化速度和强度，获得大量的肌肉单核细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得纯度超过92％(以PAX7计)的猪肌肉干细胞。分离得到的猪肌肉干细胞拥有高效的分化效率，MYOSIN的表达量达到85％-90％。应用本发明的方法，可以为培养肉研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
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公开(公告)号：CN114990056A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210695711.X
申请日：2022-06-20
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供一种高纯度猪脂肪祖细胞的分离纯化方法，包括如下步骤：采集猪脂肪组织，漂洗，消化，得到含有猪脂肪祖细胞的单核细胞悬液；取含有脂肪祖细胞的单核细胞悬液，离心、细胞筛过滤、裂解、贴壁培养，取贴壁细胞即为含有猪脂肪祖细胞的单核细胞群；将猪脂肪祖细胞的单核细胞群进行流式分选，先选取出CD31和CD45阴性的细胞，再从前述细胞中选取出CD29和CD140a阳性的细胞，即为纯化后的猪脂肪祖细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得高纯度的猪脂肪祖细胞。分离得到的猪脂肪祖细胞具有高效的分化效率。应用本发明的方法，可以为培养脂肪研究和实际生产提供大量的种子细胞来源。
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公开(公告)号：CN114736851A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210105570.1
申请日：2022-01-28
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 为解决成脂干细胞培养的常规支架的弊端以及现有培养肉风味、营养、口感、多汁性等方面的缺陷，本发明提供植物拉丝蛋白在作为成脂干细胞体外培养支架中的应用以及一种植物基脂肪培养肉的制备方法，具体包括S1：植物拉丝蛋白支架预处理：将植物拉丝蛋白吸水膨胀后，切成合适的大小，烘干，灭菌，在无菌条件下将植物拉丝蛋白支架用生长培养基浸泡过夜；S2：将成脂干细胞加入生长培养基，制成细胞悬液后接种到植物拉丝蛋白支架上，进行增殖培养；S3：增殖培养至细胞在支架上覆盖率达到80％‑90％时，进行诱导分化培养，直至分化为脂肪细胞，最终制备成一种具有动物肉风味的植物基脂肪培养肉。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118374440A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410576309.9
申请日：2024-05-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种高效、稳定的从不同年龄和部位的猪体中分离成纤维细胞的方法。该方法利用组织块贴壁法进行原代培养，并且优化了细胞的生长环境和营养供应，提高了成纤维细胞的活性和纯度。本发明还涉及细胞的体外传代培养和增殖分化能力验证，确保所得成纤维细胞适合细胞培养肉的生产。通过本发明，可获得高增殖能力的成纤维细胞，且这些细胞在体外表现出细胞外基质相关基因的特异性表达，对提高细胞培养肉的生产效率和质量具有重要作用。
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公开(公告)号：CN114645012B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202210403310.2
申请日：2022-04-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/077 , C12N5/071 , A23L13/00
Abstract: 本发明提供一种基于食品级定向支架材料的细胞培养肉的生产方法，包括如下步骤：S1、将胶原蛋白配置成水分散液，利用模具固定水凝胶的形状，通过酶促的成胶方式，促进溶质分子形成网络结构稳定、机械性能良好的水凝胶；S2、将步骤S1制备的水凝胶置于具有良好导热性能的金属板上，通过接触金属板传递来自液氮的热量使得水凝胶梯度降温，从而实现其内部冰晶快速定向生长；S3、将步骤S2制备的具有定向结构的水凝胶进行真空冷冻干燥，形成具有定向排列孔道的支架材料；S4、将步骤S3制备的支架材料接种细胞悬液，待细胞沉积贴附于支架材料上后，补充添加增殖培养液，细胞增殖达到预分化密度时更换分化培养液；S5、收获细胞培养肉，进行食品化处理。
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公开(公告)号：CN114736851B
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202210105570.1
申请日：2022-01-28
Applicant: 南京周子未来食品科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 为解决成脂干细胞培养的常规支架的弊端以及现有培养肉风味、营养、口感、多汁性等方面的缺陷，本发明提供植物拉丝蛋白在作为成脂干细胞体外培养支架中的应用以及一种植物基脂肪培养肉的制备方法，具体包括S1：植物拉丝蛋白支架预处理：将植物拉丝蛋白吸水膨胀后，切成合适的大小，烘干，灭菌，在无菌条件下将植物拉丝蛋白支架用生长培养基浸泡过夜；S2：将成脂干细胞加入生长培养基，制成细胞悬液后接种到植物拉丝蛋白支架上，进行增殖培养；S3：增殖培养至细胞在支架上覆盖率达到80％‑90％时，进行诱导分化培养，直至分化为脂肪细胞，最终制备成一种具有动物肉风味的植物基脂肪培养肉。
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公开(公告)号：CN114645012A
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202210403310.2
申请日：2022-04-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/0775 , C12N5/077 , C12N5/071 , A23L13/00
Abstract: 本发明提供一种基于食品级定向支架材料的细胞培养肉的生产方法，包括如下步骤：S1、将胶原蛋白配置成水分散液，利用模具固定水凝胶的形状，通过酶促的成胶方式，促进溶质分子形成网络结构稳定、机械性能良好的水凝胶；S2、将步骤S1制备的水凝胶置于具有良好导热性能的金属板上，通过接触金属板传递来自液氮的热量使得水凝胶梯度降温，从而实现其内部冰晶快速定向生长；S3、将步骤S2制备的具有定向结构的水凝胶进行真空冷冻干燥，形成具有定向排列孔道的支架材料；S4、将步骤S3制备的支架材料接种细胞悬液，待细胞沉积贴附于支架材料上后，补充添加增殖培养液，细胞增殖达到预分化密度时更换分化培养液；S5、收获细胞培养肉，进行食品化处理。
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公开(公告)号：CN112626008B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202011553454.3
申请日：2020-12-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种用于培养肉种子细胞体外短期增殖的改良培养基，即加快培养肉目前最有潜力的种子细胞—肌肉干细胞体外短期培养的增殖速度。改良后的培养基为添加有水溶性维生素E的细胞增殖培养基，采用改良的增殖培养基细胞在体外短期培养时增殖速度显著提高，细胞数量上是正常培养基的1.2倍；采用添加有水溶性维生素E的改良增殖培养基培养的细胞在分化培养基中诱导分化，能够显著提高细胞的分化能力、产生更多的肌肉蛋白。因此，改良的增殖培养基可以帮助在体外短期获得较多数量的培养肉种子细胞，对于培养肉的生产起到了极有利的作用。
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