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公开(公告)号:CN119040297A
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202411096626.7
申请日:2024-08-11
IPC: C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/867
Abstract: 本发明公开了一种Ⅱ‑B型核酸内切酶介导的基因编辑系统及用途,具体地,本发明利用宏基因组学结合实验鉴定出一种属于Ⅱ‑B型Cas9家族的Gs9‑1核酸酶,其识别含有NGG的PAM序列,且引导RNA(sgRNA)需要特定的骨架序列。本发明还建立了基于Gs9‑1核酸酶介导的基因组靶向编辑技术,在对基因组序列进行精确修饰,诱导基因组中的插入、缺失或碱基替换的技术领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117844782B
公开(公告)日:2024-05-31
申请号:CN202410251297.2
申请日:2024-03-06
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C07K19/00 , C12N15/62 , C12Q1/6844 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了靶标识别范围广的基因编辑核酸酶及其应用,具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的CRISPR系统基因编辑核酸酶Gs12‑9(PAM=NYYN,Y=C/T),其优点在于比已知识别PAM为“TTTV”的LbCas12a靶标覆盖范围更广。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑9系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116676291B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202211017110.X
申请日:2022-08-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C07K19/00 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N1/21 , C12N5/10 , C12Q1/6876 , C12R1/19
Abstract: LtGs12‑1或AfGs12‑1蛋白介导的核酸裸眼可视本发明公开了CRISPR/Cas系统中核酸内切 化检测与基因组定向编辑技术,在基因组定点修酶Genie scissor及其介导的基因编辑系统。具 饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。体地,本发明提供了一种基于宏基因组学方法挖掘到的新型向导RNA依赖型核酸内切酶Genie scissor,特别是新发现来自氨基酸球菌科的(56)对比文件Julijia Dronina等.Towards applicationof CRISPR-Cas12a in the design of modernviral DNA detection tools 《.JNanobiotechenology》.2022,第20卷(第1期),第41篇.赵波等.CRISPR/Cas9系统在植物育种中的应用《.热带作物学报》.2018,(第01期),第202-212页.
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公开(公告)号:CN116179512A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310256014.9
申请日:2023-03-16
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了靶标识别范围广的核酸内切酶及其应用,具体地,本发明提供了两种利用宏基因组学结合实验鉴定的核酸内切酶Gs12‑16(PAM=NYYV)和Gs12‑18(PAM=YTYV)(V=A/C/G) (Y=C/T),其优点在于与已知LbCas12a的PAM序列不同,使得它们具有更加广泛的靶标覆盖范围。本发明还建立了基于CRISPR/Gs12‑16和Gs12‑18系统介导的核酸可视化检测技术,在核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116144631A
公开(公告)日:2023-05-23
申请号:CN202310086152.7
申请日:2023-01-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明公开了一种高活性和耐热性高的核酸内切酶及其介导的基因编辑系统,具体地,本发明提供了一种利用宏基因组学结合实验鉴定出的温度适用范围广的核酸内切酶Gs12‑7,其优点在于蛋白温度耐受性高,识别含有BTYV的PAM序列,因而具有更大基因编辑空间且在基因组中高活性高特异切割靶标DNA。本发明建立了基于CRISPR/Gs12‑7系统介导的核酸可视化检测与基因组靶向编辑技术,在基因组定点修饰与核酸检测领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119351620A
公开(公告)日:2025-01-24
申请号:CN202411283397.X
申请日:2024-09-12
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种基于CRISPR/Gs12系统介导的多重核酸检测技术及应用,将不同Gs12核酸酶分别与相对应的特异crRNA和单链DNA报告基因进行组合,进而联合重组酶聚合酶扩增(RPA)方法,即可实现靶标核酸分子的四重、三重或二重特异准确检测。并由此开发了能同时区分塞内卡病毒(SVA)、猪瘟病毒(CSFV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)的核酸检测技术与试剂盒。本发明方法可实现靶标核酸的快速多重检测,在核酸检测领域具有良好的推广应用价值。
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公开(公告)号:CN118222687A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410396485.4
申请日:2024-04-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6879 , C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a系统介导的鸡性别鉴定的核酸快速检测技术与试剂盒。该技术原理为环介导等温扩增(LAMP)技术扩增鸡W染色体基因组DNA中的雌性特异EE0.6基因片段,并利用CRISPR/Cas12a核酸酶切割扩增产物,从而通过报告基因的荧光信号来确定鸡的性别。此外,为评估核酸检测体系的可靠性,扩增和检测Z染色体的雌雄共有DMRT1基因以作为内参基因。评估发现该技术能实现高灵敏、高特异检测鸡的性别,在禽类性别鉴定领域具有推广应用价值。
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公开(公告)号:CN116410955B
公开(公告)日:2023-12-19
申请号:CN202310247616.8
申请日:2023-03-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12Q1/6818 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了两种CRISPR/Cas系统的新型核酸内切酶及其应用,具体地,本发明首次提供了两种结合宏基因组学与实验手段挖掘到的新型CRISPR/Cas12a系统家族新成员Gs12‑3、Gs12‑5,特别是新发现的Gs12‑3与已知Cas12a蛋白相比具有覆盖靶标位点范围更广的基因组编辑能力,还建立了基于CRISPR/Gs12‑3系统介导的核酸可视化检测技术。
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公开(公告)号:CN114196745B
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202111558508.X
申请日:2021-12-17
Applicant: 中华人民共和国洋山海关 , 华中农业大学
IPC: C12Q1/6876 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113
Abstract: 本发明提供了一种基于等温扩增结合CRISPR‑Cas12a系统的可视化检测鱼粉中牛源成分的试剂盒及方法,所述的试剂盒包含LAMP引物组合、Cas12a蛋白、crRNA以及荧光标记的单链DNA报告分子,本发明所述的方法具有特异性强、灵敏度高和设备要求低的优点,可检测鱼粉中是否含有牛源成分,能有效提高海关进出口鱼粉掺杂查验效率。
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公开(公告)号:CN112592901B
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202011483576.X
申请日:2020-12-15
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种构建表达焦亡蛋白的溶瘤腺相关病毒oAAV‑SP‑GSDM‑NT的包装方法及其应用。本发明利用哺乳动物特异启动子SP和sf9昆虫细胞包装oAAV‑SP‑GSDM‑NT,避免了包装过程中具有很强细胞毒性的焦亡蛋白的表达,成功获得了安全,高效,高滴度的oAAV‑SP‑GSDM‑NT,其在体外可使多种肿瘤细胞发生焦亡,具有很好的肿瘤细胞杀伤作用,在体内可用于治疗动物肿瘤模型。oAAV‑SP‑GSDM‑NT与免疫调节剂联合形成治疗肿瘤的组合药剂,在动物肿瘤模型上比单独使用oAAV‑SP‑GSDM‑NT或免疫调节剂都具有更显著的溶瘤效果,说明该肿瘤治疗组合药剂具有很好的肿瘤治疗应用前景。
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